TFAR19（PDCD5）蛋白在正常腎、腎透明細胞癌組織及正常膀胱、膀胱癌組織中的表達及意義.pdf

1、研究背景和目的：腎癌又稱腎細胞癌、腎腺癌，是最常見的腎臟實質性腫瘤，其中以透明細胞癌最常見。其起病隱襲，死亡率高，根據統(tǒng)計，發(fā)病率居泌尿系腫瘤第二位。侵襲和轉移是性腫瘤的生物學特征之一，腎癌也不例外，由于腎癌早期缺乏典型的臨床癥狀，大約1/4-1/3病人就醫(yī)時已有轉移，可有血行轉移，也可以經淋巴轉移。膀胱癌是我國泌尿生殖系腫瘤中最常見的腫瘤，臨床上90％以上為移行細胞癌，容易復發(fā)及對化療藥物不敏感，保留膀胱的各種手術治療，2年內超過50

2、％以上腫瘤要復發(fā)。研究腎透明細胞癌及膀胱癌侵襲和轉移的分子機制，不僅有助于為臨床判斷預后提供有價值的分子標記物，而且有助于設計和尋找抗腫瘤侵襲和轉移的新思路和新途徑，進一步改善腎癌及膀胱癌的預后。 TFAR19(TF-1cellapoptosis-relatedgene19、PDCD5)基因是由北京大學人類疾病基因中心1999年在國際上首先報道的一個人類新基因，是從人白血病細胞株TF-1細胞中克隆到的凋亡相關新基因(GenBan

3、k登記號AF014955)，參與調控細胞凋亡過程。PDCD5的mRNA在50種人類組織中均有表達，并不限定于造血系統(tǒng)，其中在成年心、睪丸、腎臟、腎上腺及胎盤中高表達，其中胚胎組織表達明顯低于成年組織，國內外已有多家實驗室利用不同技術發(fā)現PDCD5在疾病情況下，特別是在腫瘤、自身免疫性疾病和局部損傷的表達明顯下降。PDCD5除參與細胞凋亡外，預測還與泛素有功能相關性，并可能參與蛋白質的翻譯調控。目前有幾個研究表明，PDCD5在多種腫瘤中呈

4、現低表達，在正常組織中呈現高表達，其表達與腫瘤侵潤、轉移及預后密切相關。 但迄今為止，對PDCD5在腎細胞癌中的表達及其與腎細胞癌轉移的相關性研究國內未見報道。本研究目的是檢測PDCD5在腎細胞癌中的表達，探討二者間的關系及其在腫瘤轉移中的作用，以期尋找判斷腎細胞癌轉移及估計預后可靠的分子標記物和抗腫瘤治療新靶點。 方法：63例腎組織標本均來自我院腎癌標本數據庫，為2002年3月至2005年10月手術治療的腎細胞癌患者標

5、本；42例膀胱組織標本均來自我院2004年10月至2005年10月手術治療的膀胱癌患者標本；其中43例腎癌標本為腎透明細胞癌，所有患者術前均未接受放療、化療及免疫治療。20例腎癌旁正常腎組織(遠離腫瘤邊緣＞5cm)作為對照，10例膀胱癌旁正常膀胱組織(遠離腫瘤邊緣＞3cm)作為對照，并經病理切片證實，用免疫組織化學SABC法檢測PDCD5的表達。用已知宮頸上皮細胞切片作陽性對照，PBS代替一抗作陰性對照。采用免疫組織化學的方法，對43例

6、腎透明細胞癌組織(按照病理分期，Ⅰ期17例、Ⅱ期16例、Ⅲ～Ⅳ期10例；按照臨床TNM分期，包括T1期14例、T2期13例、T3～4期16例)和20例正常腎組織切片進行PDCD5的免疫組化染色；對32例膀胱癌組織和10例正常膀胱組織切片進行PDCD5的免疫組化染色。采用人工閱片評分及計算機輔助染色強度判定2種方法判斷腎組織PDCD5的染色陽性率及染色強度，用單因素方差分析法及列聯表的卡方檢驗和關聯度測量判斷PDCD5的表達與正常腎、腎透

7、明細胞癌組織的相關性；采用人工閱片判斷膀胱組織PDCD5的染色陽性率。并用圖像分析系統(tǒng)對切片進行光密度分析。應用SPSS10.0統(tǒng)計軟件對數據進行統(tǒng)計學處理，采用列聯表的卡方檢驗分析和關聯度測量。 結果：免疫組織化學的結果顯示，在正常腎組織腎小管區(qū)中，PDCD5表達多呈強陽性，腎透明細胞癌組織表達隨著分期的增加呈遞減趨勢。正常腎組織、Ⅲ期、Ⅲ期、Ⅲ～Ⅳ期、T1期、T2期、T3～4期腎透明細胞癌組織之間PDCD5的平均光密度值分別

8、為0.180、0.160、0.141、0.121、0.160、0.145、0.130，按病理分型F=37.173，p=0.000，按TNM分型F=29.006，p=0.000。提示無論是病理分期還是臨床分期，PDCD5表達的平均光密度值在腎透明細胞癌各期差異有統(tǒng)計學意義。光鏡分析結果判定，按病理分型X3=34.175，p=0.000，列聯程度Gamma=-0.640，按TNM分型X3=26.185，p=0.000，列聯程度Gamma=-

9、0.627。兩種分期內各級病變之間差異均有顯著性，并且負關聯，提示無論是病理分期還是臨床分期，PDCD5表達的平均光密度值在腎透明細胞癌各期差異有統(tǒng)計學意義，且隨著腎透明細胞癌分期的上升，PDCD5的表達逐漸下調。分組統(tǒng)計結果顯示不同性別、年齡腎透明細胞癌患者PDCD5表達無顯著性差異，提示腎透明細胞癌中PDCD5的表達在不同性別、年齡組中差異無統(tǒng)計學意義(t=0.330，P=0.743，t=0.373，P=0.711，P＞0.05)；

10、分組統(tǒng)計結果顯示腫瘤大小，有無轉移腎透明細胞癌患者PDCD5表達有顯著性差異，提示腎透明細胞癌中PDCD5表達在不同腫瘤大小，有無轉移組中差異有統(tǒng)計學意義(t=2.414，P=0.020；t=2.637，P=0.012)。正常膀胱、膀胱癌組織中PDCD5未見顯著表達。 結論： 1.在正常腎組織腎小管區(qū)中，PDCD5表達多呈強陽性，腎透明細胞癌組織表達隨著分期的增加呈遞減趨勢，可能是腎細胞癌組織表達的重要負性調控因子之一；