透骨消痛膠囊對(duì)退變軟骨細(xì)胞增殖影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：觀察透骨消痛膠囊含藥血清對(duì)正常及退變軟骨細(xì)胞增殖速率和細(xì)胞周期分布的影響，從細(xì)胞學(xué)的角度上探討透骨消痛膠囊對(duì)正常及退變軟骨細(xì)胞增殖的干預(yù)作用。
　　 方法：1.含藥血清及不含藥血清的制備：取健康六月齡新西蘭大白兔16只，雌雄各半，隨機(jī)分成2組，即模型組與給藥組。給藥組予以透骨消痛膠囊水溶液灌胃，模型組則以等量的生理鹽水灌胃。取模型組與給藥組動(dòng)物血清制備含透骨消痛膠囊含藥血清和不含藥血清。
　　 2.含藥血清和不含藥

2、血清培養(yǎng)第3代軟骨細(xì)胞：取健康六月齡新西蘭大白兔16只，雌雄各半，隨機(jī)分成2組，即正常組與造模組，通過(guò)改良Hulth法，對(duì)造模組動(dòng)物實(shí)施造模手術(shù)。喂養(yǎng)1周后，開(kāi)始強(qiáng)迫造模組兔每日活動(dòng)1次，每次1h。8周后處死動(dòng)物，分離并培養(yǎng)正常組和造模組動(dòng)物軟骨細(xì)胞，培養(yǎng)至第三代，用甲苯胺藍(lán)染液對(duì)其進(jìn)行鑒定。取第3代正常及退變軟骨細(xì)胞用含藥血清與不含藥血清進(jìn)行培養(yǎng)，分為A組（正常軟骨細(xì)胞不含藥血清組）、B組（正常軟骨細(xì)胞含藥血清組）、C組（退變軟骨細(xì)胞

3、不含藥血清組）、D組（退變軟骨細(xì)胞含藥血清組）。用光鏡對(duì)增殖的軟骨細(xì)胞進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)觀察，MTT法測(cè)細(xì)胞相對(duì)數(shù)，用流式細(xì)胞儀測(cè)軟骨細(xì)胞周期分布。
　　 結(jié)果：1.倒置顯微鏡觀察血清培養(yǎng)后的正常及退變軟骨細(xì)胞形態(tài)，增殖后的正常軟骨細(xì)胞呈多角形或長(zhǎng)梭形，細(xì)胞核清晰；增殖后的退變軟骨細(xì)胞呈多角形或長(zhǎng)梭形，部分細(xì)胞核固縮，有的偏向一側(cè)。
　　 2.MTT檢測(cè)顯示，各組軟骨細(xì)胞增殖速度B組>A組>D組>C組，其中B組>A組（P<0

4、.05），B組>C組（P<0.05），B組>D組（P<0.05），A組>C組（P<0.05），A組>D組（P<0.05），D組>C組（P<0.05）。
　　 3.流式細(xì)胞儀檢測(cè)顯示，各組軟骨細(xì)胞周期分布隨著時(shí)間的變化以及血清干預(yù)而發(fā)生變化。干預(yù)24、48、72h，B組含藥血清S、G2/M期比例上升及PI升高高于同期A組不含藥血清（P<0.05），D組含藥血清S、G2/M期比例上升及PI升高高于同期C組（P<0.05），C、D組退