牙周致病菌Pg-LPS對(duì)組織特異性單核-巨噬細(xì)胞炎癥因子表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:比較牙周致病菌Pg-LPS對(duì)同一個(gè)體不同部位單核/巨噬細(xì)胞炎癥因子(CRP、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α)表達(dá)的影響,并探討外源性IL-10作用后的相應(yīng)變化,為進(jìn)一步研究牙周病與全身性疾病可能相關(guān)的病理機(jī)制提供依據(jù)。
　　 方法:1.以喂養(yǎng)高脂飼料的方法建立新西蘭兔高脂血癥模型,通過(guò)血脂檢測(cè)、體重監(jiān)測(cè)、主動(dòng)脈和肝臟病理等方法了解高脂膳食對(duì)新西蘭兔生化及病理形態(tài)的影響,從而確定新西蘭兔高脂血癥模型是否成功建立。

2、2.(1)在新西蘭兔不同部位(血液、腹腔、肺、肝臟)的單核/巨噬細(xì)胞成功分離的基礎(chǔ)上,建立同一個(gè)體(正常新西蘭兔和高脂血癥新西蘭兔)不同部位單核/巨噬細(xì)胞與牙周致病菌Pg-LPS、大腸桿菌E.coli-LPS及外源性IL-10的共同培養(yǎng)細(xì)胞模型；(2)體外通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(Real-time fluorescence quantitative polymerasechain reaction,Realtime PCR)的方法

3、比較同一個(gè)體不同部位單核/巨噬細(xì)胞炎癥因子基因的表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:1.(1)6周高脂飲食后,高脂飲食喂養(yǎng)組血脂含量明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01)；(2)高脂飲食喂養(yǎng)組和正常對(duì)照組新西蘭兔體重?zé)o顯著性差異(P>0.05)；(3)主動(dòng)脈弓和肝臟病理變化:光鏡觀察結(jié)果顯示,6周時(shí)高脂飲食喂養(yǎng)組主動(dòng)脈內(nèi)膜變化不明顯,但是肝臟局部脂肪變性,肝細(xì)胞呈空泡狀。2.RealtimePCR檢測(cè)炎癥因子(CRP、IL-1β、IL-6、IL

4、-8、TNF-α)的基因表達(dá)情況,結(jié)果發(fā)現(xiàn):(1)不同部位的單核/巨噬細(xì)胞中同種炎癥因子mRNA的表達(dá)水平不全相同(P<0.05)；(2)1μg/ml的牙周致病菌Pg-LPS刺激同一個(gè)體(正常新西蘭兔和高脂血癥新西蘭兔)不同部位的單核/巨噬細(xì)胞,可使炎癥因子CRP、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α mRNA的表達(dá)水平總體呈上升的趨勢(shì)(P<0.05)；且高脂血癥組表達(dá)水平總體上高于正常組(P<0.05)；(3)以0.1μg/ml

5、的IL-10作用于Pg-LPS刺激后的同一個(gè)體(正常新西蘭兔和高脂血癥新西蘭兔)不同部位的單核/巨噬細(xì)胞,可使炎癥因子CRP、IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α mRNA的表達(dá)水平總體呈現(xiàn)下調(diào)的趨勢(shì)(P<0.05)。
　　 結(jié)論:1.采用高脂膳食方式喂養(yǎng)新西蘭兔6周,可成功地建立新西蘭兔高脂血癥動(dòng)物模型。2.不同部位的單核/巨噬細(xì)胞對(duì)牙周致病菌Pg-LPS的刺激存在敏感性差異。3.高脂血癥新西蘭兔單核/巨噬細(xì)胞炎癥因子基