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文檔簡介
1、 本課題利用已建系的成牙本質(zhì)細胞樣細胞MDPC-23，構(gòu)建DSPP基因啟動子螢火蟲熒光素酶報告基因載體，分析Smads信號分子對DSPP的調(diào)控作用，并利用凝膠電泳遷移率變動分析等方法，研究Smad3與DSPP基因的可能結(jié)合位點。結(jié)果表明：pGL3LUC-Pdspp-410～176bp和pGL3LUC-Pdspp-410～+54bp都有較強的啟動活性，而pGL3LUC-Pdspp-195～+54bp雖然帶有基本啟動子，但是它的啟動活
2、性極弱，表明在這一區(qū)域中，存在轉(zhuǎn)錄抑制因子。TGF-β1對pGL3LUC-Pdspp-410～-176bp和pGL3LUC-Pdspp-410～+54bp活性具有下調(diào)作用，說明在410～176bp之間，存在TGF-β1信號分子的作用位點，發(fā)揮TGF-β1的調(diào)控作用。在MDPC-23細胞內(nèi)轉(zhuǎn)染入帶有綠色熒光蛋白的Smad3質(zhì)粒后，主要表達于細胞胞漿中；在TGF-β1的作用下，綠色熒光的位置發(fā)生轉(zhuǎn)移，由胞漿轉(zhuǎn)移至胞核內(nèi)，證實Smad3是TG
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