SCF對HUVECs增殖、遷移、管狀形成功能影響和對EPCs的趨化作用.pdf

1、目的：SCF也稱c—Kit配體(KL或c—Kit—L)、MGF及SLF，其受體c—Kit可表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞和內(nèi)皮祖細(xì)胞上，我們通過觀察SCF對HUVECs增殖、遷移、管狀形成功能的影響和對EPCs的趨化作用，探討SCF是否在血管新生、血管發(fā)生中發(fā)揮生物學(xué)活性。 方法：用0.1％Ⅰ型膠原酶消化分離HUVECs；首先設(shè)置空白對照、SCF、VEGF、Anti—SCF、IgG共5組，然后用MTT法、CCK—8法，細(xì)胞劃痕法，Matrige

2、l體外三維成型法分別檢測SCF是否具有提高內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移和管狀形成能力的生物學(xué)活性。用流式細(xì)胞儀分選臍血中CD133+細(xì)胞(EPCs)；并應(yīng)用transwell技術(shù)(設(shè)為5組，同前)檢測SCF對EPCs是否具有趨化作用。 結(jié)果：①0.1％Ⅰ型膠原酶消化15min為最佳分離HUVECs的方法：②SCF無促進(jìn)HUVECs增殖能力的作用，與空白對照組的100±3.1％(MTT)100±1.9％(CCK—8)相比，SCF組(100

3、ng/ml)的增殖百分率為99±4.4％(MTT)101±2.3％(CCK—8)，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)；③SCF具有顯著提高HUVECs遷移能力的作用；④SCF具有提高HUVECs管狀形成能力的作用，并呈劑量依賴性，100ng/ml SCF為最佳濃度，完整小管形成數(shù)量達(dá)30±3.4個，明顯高于空白對照組的5±2.6個，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。⑤流式細(xì)胞儀分選標(biāo)記有CD133熒光抗體的臍血單個核細(xì)胞可成功獲得EPC