中藥健脾養(yǎng)胃方治療胃癌作用機理的研究.pdf

1、目的:胃癌(Gastric Cancer)是消化道最常見惡性腫瘤之一。世界范圍內最常見惡性腫瘤中胃癌居第四位。中國是胃癌高發(fā)地區(qū)，患者幾乎占全球胃癌患者的一半，發(fā)病有年輕化趨勢，嚴重威脅人類健康。中藥健脾養(yǎng)胃方在臨床上對胃癌的術后復發(fā)預防、改善癥狀、減少副反應及延長生存期方面均取得較好效果。但是其在腫瘤的治療中其作用地位、作用點、作用效應強度依然受到質疑，其抗腫瘤的確切機理尚未完全明確，需要有更大量確切的現(xiàn)代醫(yī)學數(shù)據(jù)支持及闡明。因此，本

2、實驗目的就是分析中藥健脾養(yǎng)胃方，探討其治療胃癌的細胞和分子生物學作用機理，為臨床應用提供科學數(shù)據(jù)和指導。
　　方法:1采用液相色譜-質譜聯(lián)用(LC-MS)技術分析鑒定健脾益胃方水提液和醇提液中的有效化合物成分;2以SGC-7901胃癌細胞株進行體外細胞學試驗，采用MTT試驗、Transwell試驗及流式細胞技術，研究研究健脾養(yǎng)胃方對腫瘤細胞的增殖、侵襲、凋亡及周期等幾方面的作用，并以抗腫瘤藥物作為陽性對照。3以荷瘤裸鼠和SGC-7

3、901胃癌細胞株進行體內動物性試驗，制作胃癌移植瘤模型，采用病理組織切片、免疫組化和WesternBlotting檢測基因表達技術，研究健脾養(yǎng)胃方干預后的病理組織中胃癌相關分子的表達。
　　結果:1 LC-MS技術分析:健脾養(yǎng)胃方水提液和醇提液處方中均至少含有一定量要鑒定的有效成分。在同一藥物濃度下，醇提液各化合物含量多高于水提液。2體外細胞學實驗:①健脾養(yǎng)胃方組在一定濃度范圍內，對細胞增殖有顯著的抑制作用，抑制率呈正向梯度改變，

4、與空白組相比，P＜0.01;②健脾養(yǎng)胃方干預組穿過Transwell微孔濾膜的細胞數(shù)(67.3±18.3)明顯低于對照組(229.7±40.2)，P＜0.01③健脾養(yǎng)胃方組細胞凋亡率顯著高于對照組，尤以晚期凋亡較為明顯(P＜0.01)。④健脾養(yǎng)胃方組S期縮短，G2/M期則延長。3體內動物學實驗:①與對照組相比，健脾養(yǎng)胃方組可延緩裸鼠體重下降。②健脾養(yǎng)胃方可以減少Ki67的表達;③與對照組相比健脾養(yǎng)胃方顯著減少MMP-9的表達(P＜0.0

5、1);④健脾養(yǎng)胃方可以減少Bcl-2的表達;⑤與對照組相比，健脾養(yǎng)胃方可以減少VEGF的表達(P＜0.01);⑥與對照組相比，健脾養(yǎng)胃方可減少PI3K、pAKT、NF-kB的表達(P＜0.01);⑦健脾養(yǎng)胃方可以激活抗癌基因和抑制癌性基因的表達，如增加PTEN蛋白的表達(P＜0.01)，降低CXCR2的表達。
　　結論:藥物提取，醇提效率明顯優(yōu)于水提，體內外實驗研究表明，健脾益胃方中具有一定含量的多種有效化合成分，發(fā)揮多種抗腫瘤效