慢性低O2高CO2對腺苷A2A受體基因敲除小鼠骨骼肌形態(tài)及caveolin-3的影響.pdf

1、目的:觀察慢性低O2高CO2對腺苷A2A受體基因敲除小鼠股外側(cè)肌形態(tài)的影響，探討慢性低O2高CO2對腺苷A2A受體基因敲除小鼠股外側(cè)肌caveolin-3的影響。
　　方法:3月齡SPF級C57BL/6雄性小鼠，腺苷A2A受體基因敲除小鼠及其同胞的野生型小鼠各16只，各隨機分為2組（每組8只）:腺苷A2A受體基因敲除對照組（KONC組），腺苷A2A受體基因敲除低氧高二氧化碳組（KOHH組）;野生型對照組（WTNC組），野生型低氧高

2、二氧化碳組（WTHH組）。將WTHH組和KOHH組小鼠置于常壓低氧高二氧化碳艙內(nèi)，通入氮氣(N2)調(diào)節(jié)艙內(nèi)氧濃度維持在9％～11％，輸入二氧化碳(CO2)使其艙內(nèi)濃度維持在5％～6％，每天8小時，每周6天。WTNC組和KONC組小鼠除吸入空氣外，其余條件同實驗組。所有小鼠于實驗開始和結(jié)束時各稱取體重一次。4周后，小鼠用1％水合氯醛腹腔注射麻醉后處死，取小鼠左后肢股外側(cè)肌，HE染色后光鏡下觀察肌纖維形態(tài)學改變、免疫熒光法檢測肌肉caveo

3、lin-3蛋白表達，熒光顯微鏡下觀察其熒光強度，右后肢股外側(cè)肌RT-PCR法檢測肌肉caveolin-3 PCR產(chǎn)物表達水平。
　　結(jié)果;1.與WTNC,KONC組比，WTHH和KOHH小鼠體重增長減慢(p＜0.01);2.光鏡示:WTNC，KONC組骨骼肌形態(tài)正常，WTHH和KOHH肌纖維萎縮，KOHH組小鼠更明顯。3.RT-PCR法示:與WTNC組相比，KONC組caveolin-3mRNA表達無明顯變化，WTHH組、KOHH

4、組降低，差異均有統(tǒng)計學意義（p＜0.01），KOHH組更明顯。4.免疫熒光法示:與WTNC組相比，KONC組caveolin-3熒光強度無明顯變化，WTHH組、KOHH組降低，KOHH組更明顯。
　　結(jié)論:慢性低O2高CO2可導致小鼠骨骼肌纖維萎縮;慢性低O2高CO2引起caveolin-3表達降低，慢性低O2高CO2可能通過降低caveolin-3進而引起肌萎縮;敲除腺苷A孫受體小鼠在慢性低O。高CO2條件下，可使caveoli