血液系統(tǒng)惡性疾病小鼠模型的構建及應用.pdf

1、目的：
　　在傳統(tǒng)的化療及骨髓造血干細胞移植的基礎上，靶向藥物的應用使血液系統(tǒng)惡性疾病的預后較前有一定的改善。然而，耐藥、復發(fā)仍是此類疾病治療失敗的主要原因。因此，建立能夠模擬病人疾病表現(xiàn)及疾病表型的動物模型將為疾病機制的研究及靶向藥物的研發(fā)提供一個良好的平臺。本實驗主要闡述如何使用血液系統(tǒng)惡性疾病細胞系及原代標本構建小鼠模型及模型的應用。
　　方法：
　　第一部分：使用11種常見的血液系統(tǒng)惡性疾病細胞系（包括急性髓系

2、白血病、急性淋巴細胞白血病、急性雙表型白血病、慢性粒細胞白血病、淋巴瘤）通過尾靜脈注射的方式接種至小鼠體內構建11種細胞系動物模型，采用流式細胞術動態(tài)檢測外周血中腫瘤細胞的比例，當小鼠出現(xiàn)體重下降大于20％、嚴重嗜睡、毛發(fā)豎立等體征時處以安樂死，詳細了解各組織臟器腫瘤的浸潤情況。通過構建的模型了解Raptor基因在MLL白血病中的作用。
　　第二部分：收集血液系統(tǒng)惡性疾病患者治療前的骨髓標本，我們不僅通過傳統(tǒng)尾靜脈接種的方式成功將

3、原代標本植入到NOD/SCID小鼠體內構建模型，更首創(chuàng)使用脾臟接種的方式構建模型，并使用此類模型進行體內藥物實驗和急性淋巴細胞白血病起始細胞的表型預測。
　　結果：
　　使用細胞系成功構建了急性髓系白血病、急性淋巴細胞白血病、急性雙表型白血病、慢性粒細胞白血病、淋巴瘤等11種動物模型，并詳細了解各模型的發(fā)病特點。Raptor基因敲除后可延緩RS4;11（MLL-AF4）小鼠模型的生存期，而不能延緩K562小鼠模型的生存期。<

4、br>　　使用尾靜脈注射(5/9)和脾臟注射(10/21)的方式成功構建了ALL人源化NOD/SCID小鼠模型；ALL標本植入組中CD150表達明顯比未植入組低(P<0.01)。成功構建了3例含有FLT3-ITD的AML人源化NOD/SCID小鼠模型；1例ANKL模型正在構建中。
　　結論：
　　脾臟注射可成功構建血液系統(tǒng)惡性疾病小鼠模型，細胞系比原代標本容易構建模型，ALL原代標本比AML原代標本容易構建模型。CD150可