小麥過氧化物酶基因TaPrx的遺傳轉化及耐旱耐鹽功能鑒定.pdf

1、小麥在受到干旱、鹽堿、高低溫等逆境脅迫時，植物體內會產生并積累不同類型的活性氧（Reactive oxygen species，ROS），這些活性氧會對植物體造成一定的傷害甚至導致植物的死亡。過氧化物酶（Peroxiredoxin，Prx）被認為可以清除植物體內多余的活性氧，保護植物不受損害，從而提高了植物的抗逆能力。本研究在小麥種質Apogee73S2中分離得到一個TaPrx基因，并對該基因構建了兩個表達載體。利用基因槍法將TaPrx

2、基因導入普通小麥科農199中，經(jīng)過除草劑篩選和PCR檢測，得到2棵轉基因植株;經(jīng)加代得到純合后，對轉基因植株進行了耐旱、耐鹽功能鑒定;同時本研究還利用煙草和洋蔥對TaPrx基因進行了亞細胞定位研究。主要研究結果如下:
　　(1)相關表達載體的構建:將TaPrx基因構建到載體pBIN-eGFP和PC186上，得到了亞細胞定位載體pBIN-Prx-eGFP和基因槍法過表達載體PC186-Bar-Hpt-Prx。
　　(2)TaP

3、rx的小麥基因槍遺傳轉化:通過組織培養(yǎng)獲得科農199幼胚愈傷組織2082個，經(jīng)基因槍轟擊和分化篩選后得到抗性苗174棵，通過提取DNA進行PCR檢測，初步確定通過基因槍遺傳轉化得到2棵TaPrx轉基因陽性植株。對這兩株轉基因陽性植株進行小麥加代處理，以繁殖獲得純合的轉基因植株后代。分別對轉基因受體材料科農199和經(jīng)加代繁殖得到的純合轉基因植株后代提取RNA，利用qRT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)，轉基因植株中TaPrx基因表達量是受體科農199中的