骨髓基質(zhì)細胞與bcl-2基因聯(lián)合治療腦缺血大鼠療效以及對IGF-1表達影響的研究.pdf

1、缺血性腦血管病越來越嚴重地威脅著人類的健康和生命，但仍缺乏有效治療手段。因此，如何改善腦梗死后的神經(jīng)功能恢復是當前神經(jīng)病學領域的一個研究重點。 MSCs具有多向分化潛能，移植后的MSCs在受體腦內(nèi)可分化為神經(jīng)細胞和神經(jīng)膠質(zhì)細胞。MSCs移植可促進卒中大鼠的神經(jīng)功能恢復，其療效與所移植的細胞數(shù)量有關。然而MSCs移植后的存活率很低，因此找到提高MSCs腦內(nèi)存活率的方法是增加MSCs治療腦缺血療效的關鍵。 bcl-2基因是第

2、一個被發(fā)現(xiàn)的具有抗凋亡作用的基因，并且應用bcl-2基因治療大鼠局灶性腦缺血可以改善大鼠神經(jīng)功能。 根據(jù)以上兩點，聯(lián)合應用bcl-2基因可能會對MSCs移植產(chǎn)生協(xié)同作用，提高MSCs治療腦缺血的療效。本實驗的目的就是探討聯(lián)合應用MSCs和bcl-2基因來治療大鼠局灶性腦缺血，能否促進大鼠神經(jīng)功能恢復，抑制移植后MSCs的凋亡，增加MSCs治療腦缺血的療效，同時檢測具有神經(jīng)保護作用的IGF-1的表達是否增加，從而為腦梗死的治療開辟

3、一條新途徑。 實驗方法： 40只Wistar大鼠采用改良線栓法制成大腦中動脈閉塞模型，兩小時后再灌注。隨機分成4組：空白對照組、bcl-2組、MSCs組和MSCs+bel-2組，每組再分為3d、14d兩個時間點，每一時間點均為5只大鼠。bcl-2組及MSCs+bcl-2組在大鼠腦缺血再灌注3小時后，經(jīng)頸動脈注入pLXSN-bcl-2質(zhì)粒；MSCs組及MSCs+bcl-2組在大鼠腦缺血再灌注24小時后，經(jīng)尾靜脈植入MSCs

4、。各組于再灌注后1d、3d、7d及14d進行神經(jīng)功能評分；于3d及14d分別處死5只大鼠，采用免疫組化法檢測BrdU、IGF-1及Bcl-2蛋白的表達；通過TUNEL法檢測細胞凋亡情況。結果判定：每個標本取兩張切片，分別在高倍鏡(400×)下隨機觀察額頂葉及紋狀體區(qū)不重疊的5個視野，顯微圖像分析系統(tǒng)采集圖像，分析陽性細胞面積百分比或計數(shù)陽性細胞數(shù)。 統(tǒng)計學處理：采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件進行方差分析及t檢驗，P<0.05為差