腎陽虛證膝骨關節(jié)炎的差異基因表達譜研究.pdf

1、目的：以腎陽虛證膝骨關節(jié)炎為樣品研究腎陽虛證的差異基因表達譜，在前期研究的基礎上進一步分析腎陽虛證的基因表達譜及分子通路，探討腎陽虛證發(fā)病的微觀分子機制。 方法：應用基因芯片技術，通過病證結(jié)合的方法，精選兩組來自不同地區(qū)典型腎陽虛證膝骨關節(jié)炎病人和正常對照組各8例，作以下評定：植物神經(jīng)系數(shù)測定?；蛐酒瑢嶒灒簩嶒灹鞒贪ú裳?，提取RNA，逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，用Cy3和Cy5兩種熒光物質(zhì)分別標記，制備成探針，在22000

2、點的基因芯片上進行雜交，通過計算機掃描后，得到兩張病人一正常對照組混合樣品表達譜數(shù)據(jù)。 結(jié)果：病例篩選結(jié)果：兩組患者腎陽虛證因子定性定量積分相加均大于18分，為典型腎陽虛證；經(jīng)骨科專家和x線檢查系膝骨關節(jié)炎患者。植物神經(jīng)系數(shù)：兩組患者與對照組比較均未達到統(tǒng)計學差異。差異基因表達譜：芯片1得到75條差異表達基因，上調(diào)49條，下調(diào)26條：簽片2得到1302條差異表達基因，上調(diào)291條，下調(diào)1011條；兩張芯片共同出現(xiàn)的差異表達基因有

3、6條。兩組差異表達基因生物學過程均以代謝基因所占的比例最大，分別占70％和63.06％，且集中在基礎代謝和細胞代謝，其次為信號轉(zhuǎn)導基因，還涉及到免疫反應等；通路查詢以代謝通路和信號轉(zhuǎn)導通路的基因最多，主要集中于MAPK信號通路和氧化磷酸化通路。 討論：本實驗結(jié)果顯示腎陽虛證的差異基因表達譜主要集中于代謝類尤其是細胞代謝、信號轉(zhuǎn)導和免疫類基因；特別是某些與代謝、免疫、信號轉(zhuǎn)導相關的多生物學過程基因與腎陽虛證的關系值得進一步研究，提