特異性人免疫球蛋白分離純化方法研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、論文對乙肝人免疫球蛋白(HHBIG)和狂犬人免疫球蛋白(HRIG)兩種特異性免疫球蛋白的分離純化方法進行了研究,針對親和3號配基這樣的生物大分子物質(zhì)制備親和介質(zhì)所遇到的配基密度低的難題進行了探索。主要工作如下: (1)通過對HHBIG原料進行物性分析,確定采用親和層析方法進行HHBIG的純化。以瓊脂糖凝膠為基質(zhì)制備了用于純化乙肝免疫球蛋白的親和層析介質(zhì)Sepharose4FF-HHBIG,并優(yōu)化了HHBIG親和層析的操作條件。對

2、效價為95 IU/mL的HHBIG原料,純化倍數(shù)達到30左右,活性收率達到45%以上;對效價為45 IU/mL的HHBIG原料,純化倍數(shù)達到40左右,活性收率達到50%以上。通過在HHBIG親和層析單元操作中加入2% PEG D作為純化伴侶保護HHBIG的活性,使得HHBIG的活性回收率提高10-15%。 (2)以瓊脂糖凝膠為基質(zhì)制備了用于純化狂犬免疫球蛋白的親和層析介質(zhì)Sepharose4FF-HRIG,并對親和層析條件進行了

3、優(yōu)化,對狂犬免疫球蛋白的純化倍數(shù)在15左右,活性收率達到18%。 (3)以改性PS大孔微球制備了用于純化狂犬免疫球蛋白的新型親和介質(zhì)mPS-HRIG,并將mPS-HRIG和Sepharose4FF-HRIG親和介質(zhì)的理化性能和層析效果進行了比較。新型mPS-HRIG親和介質(zhì)的配基密度約為Sepharose4FF-HRIG親和介質(zhì)的兩倍,mPS-HRIG親和介質(zhì)分離純化的活性回收率和純化倍數(shù)高于Sepharose4FF-HRIG親

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