牛朊蛋白3個單氨基酸變異體的原核表達及其包涵體蛋白的變性與復性.pdf_第1頁
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1、目的本研究擬以牛朊蛋白正?；蚝推浜瑔蝹€氨基酸突變的3個變異體基因克隆為實驗材料,構建牛朊蛋白基因重組表達質粒pGEX-BoPrP(93~241)、pGEX-BoPrP(93~241)(S154N)、pGEX-BoPrP(93~241)(A129V)和pGEX-BoPrP(93~241)(Q234R)及其各原核表達重組菌,以獲得4種有活性的牛重組朊蛋白,進而為牛朊蛋白基因突變與其蛋白結構和性質變化關系的研究提供實驗材料.結果成功構建了重

2、組菌E.coli GST-BoPrP(93~241)、GST-BoPrP(93~241)(S154N)、GST-BoPrP(93~241)(A129V)和GST-BoPrP(93~241)(Q234R),分別可表達預期分子質量約為42.4 ku的與單抗4C11發(fā)生反應的融合蛋白;在37℃以1 mmol/LIPTG誘導表達6 h的優(yōu)化條件下,各重組菌可產(chǎn)生表達量占細菌總蛋白量30﹪~45﹪的目的蛋白;各重組菌誘導表達后所產(chǎn)生的目的蛋白以包

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