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1、 為了探索骨髓間充質(zhì)干細胞橫向分化為肝細胞的作用機制,研究骨髓源性的肝細胞肝內(nèi)移植定向分化,筆者向肝纖維化形成大鼠肝臟內(nèi)移植經(jīng)誘導(dǎo)的骨髓間充質(zhì)干細胞來源的肝細胞,觀察其分布、分化情況,并觀察聯(lián)合應(yīng)用中藥軟肝煎對肝纖維化形成大鼠肝臟功能改善的效果?! ∈紫葟腟D大鼠的股骨中提取骨髓干細胞,利用Percoll分離液密度梯度離心法結(jié)合貼壁法實現(xiàn)骨髓間充質(zhì)干細胞的體外分離純化、培養(yǎng)、傳代擴增。取第3代的骨髓間充質(zhì)干細胞,應(yīng)用流式細胞儀檢
2、測細胞表面抗原CD44、CD34、CD45、CD31、CD90,對骨髓間充質(zhì)干細胞進行鑒定?! ⊙芯恳越?jīng)BrdU(以5ug/ml加入BrdU孵育24小時)標記骨髓間充質(zhì)干細胞及誘導(dǎo)后的肝細胞行肝纖維化形成的SD大鼠肝內(nèi)移植。通過計算機圖像分析儀觀查在肝臟標記細胞的分布以及白蛋白的表達。結(jié)果表明體內(nèi)誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細胞及體外誘導(dǎo)后的肝細胞均能定向移植到肝纖維化形成的SD大鼠肝臟組織中。 試驗結(jié)果為,建立了一種短期內(nèi)快速有效的富集
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