玉米根系蛋白磷酸酶ZmPP2C基因的克隆、表達(dá)特性及轉(zhuǎn)化的研究.pdf

1、山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文玉米根系蛋白磷酸酶ZmPP2C基因的克隆、表達(dá)特性及轉(zhuǎn)化的研究姓名：徐云峰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專(zhuān)業(yè)：植物學(xué)指導(dǎo)教師：李德全20050602山東農(nóng)業(yè)大學(xué)碩f ? 學(xué)位論文玉米根系蛋白磷酸酶Z m P P 2 C 基因的克隆、表達(dá)特性及轉(zhuǎn)化的研究2 0 0 5 屆植物學(xué)專(zhuān)業(yè)碩士研究生徐云峰指導(dǎo)教師李德全教授摘要本文以抗逆( 旱) 性較強(qiáng)的玉米品種L D 9 0 0 2 為試驗(yàn)材料，采取溶液培養(yǎng)幼苗，信號(hào)調(diào)節(jié)物質(zhì)、低溫和

2、干旱脅迫的處理方式，對(duì)玉米根系中的蛋白磷酸酶基因進(jìn)行了分離克隆、表達(dá)特性及轉(zhuǎn)基因植株生理功能的研究。運(yùn)用R T —P C R 方法，首次從玉米根系中分離到一個(gè)P P 2 C 基因的c D N A克隆，通過(guò)S o u t h e r n 雜交、N o r t h e r n 雜交、轉(zhuǎn)化等技術(shù)對(duì)該基因的組成情況、表達(dá)特性和生理功能進(jìn)行了初步研究，旨在探討玉米等禾谷類(lèi)作物抗逆的分子機(jī)制，為改良農(nóng)作物抗逆性提供理論依據(jù)，主要結(jié)果如下：1 ． 依

3、據(jù)植物蛋白磷酸酶2 C ( p r o t e i np h o s p h a t a s e2 C ，P P 2 C ) 基因的保守區(qū)設(shè)計(jì)簡(jiǎn)并引物，運(yùn)用R T - P C R 方法，從玉米根系中分離出一個(gè)長(zhǎng)度為9 3 6 b p 的P P 2 F 基因的c D N A 克隆，命名為Z m P P 2 G G e n B a n k注冊(cè)號(hào)為A Y 6 2 1 0 6 6 。2 ． 提取正常生長(zhǎng)狀態(tài)下的玉米基因組D N A ，用B a

4、m H I ，E c o R V ，S a c I 三種限制性?xún)?nèi)切酶對(duì)玉米基因組D N A 進(jìn)行完全酶切，以歷臌基因5’端為模板合成探針進(jìn)行S o u t h e r n 雜交。結(jié)果表明：Z m P P 2 C 基因在玉米基因組中可能是兩個(gè)拷貝，弱帶可能是其他同源基因，在玉米中存在一個(gè)小的P P 2 C 基因家族。3 。 提取玉米根莖時(shí)的總R N A ，以Q 一“P —d C T P 標(biāo)記的Z 皿P P 2 C 基因5 7 端為探針進(jìn)行