當歸紅芪超濾物輔助12c6重離子束治療肝癌減毒增效實驗研究

1、分類號：分類號：R73密級：密級：公開公開研究生學位論文論文題目（中文）論文題目（中文）當歸紅芪超濾物輔助當歸紅芪超濾物輔助1212C66重離子束治療肝癌重離子束治療肝癌減毒增效實驗研究減毒增效實驗研究論文題目（外文）論文題目（外文）ExperimentalStudyonToxityReducingEfficacyEnhancingEffectofAngelicanRadixHedysariUltrafiltrationContentA

2、ssisting12C6HIBTreatmentofLiverCancer研究生姓名研究生姓名劉凱學科、專業(yè)學科、專業(yè)中西醫(yī)結合中西醫(yī)結合中西醫(yī)結合臨床中西醫(yī)結合臨床研究方向研究方向中西醫(yī)結合中西醫(yī)結合內科臨床（腫瘤內科臨床（腫瘤防治防治）學位級別學位級別博士導師姓名、職稱導師姓名、職稱李應東李應東教授教授論文工作論文工作起止年月起止年月2011年9月至月至2016年12月論文提交日期論文提交日期2017年4月論文答辯日期論文答辯日期2

3、017年5月學位授予日期學位授予日期校址：甘肅省蘭州市校址：甘肅省蘭州市當歸紅芪超濾物輔助當歸紅芪超濾物輔助12C6重離子束治療肝癌重離子束治療肝癌減毒增減毒增效實驗研究效實驗研究中文摘要中文摘要目的目的:基于實驗研究證明當歸紅芪超濾物輔助12C6重離子束治療肝癌的減毒增效作用并對其可能機制進行探討，為當歸紅芪超濾物輔助12C6重離子束治癌的臨床應用提供依據(jù)。方法方法：超高效液相色譜法和超高效液相色譜質譜聯(lián)用比較當歸紅芪超濾物與水提取物

4、組分差異；基于AnnexinVFITCPI雙染、流式細胞儀、實時定量PCR陣列分析、激光共聚焦、蛋白印跡技術觀察不同劑量的12C6重離子束輻射誘導人肝癌HepG2細胞的功效并對機制進行研究；原代體外培養(yǎng)小鼠H22肝癌細胞，構建H22肝癌荷瘤小鼠腹水瘤與實體瘤動物模型；基于血液白細胞（WBC）、紅細胞（RBC）、血小板(PLT)數(shù)量及血紅蛋白(HGB)含量檢測，脾臟指數(shù)、胸腺指數(shù)測定，流式細胞儀技術血液T淋巴細胞亞群分析，ELISA法血清

5、補體C3、IFNγ、IL4、IFNγIL4檢測，骨髓涂片骨髓象分析，肺臟、心臟、肝臟、脾臟、腎臟HE染色病理形態(tài)學觀察觀察當歸紅芪超濾物對12C6重離子束治療H22荷瘤小鼠的減毒效應；基于腫瘤直徑測量，小動物成像技術檢測腫瘤面積，紅外線成像系統(tǒng)檢測H22荷瘤小鼠機體及腫瘤溫度，腫瘤指數(shù)、抑瘤率測定，HE染色腫瘤組織病理形態(tài)學觀察，電鏡下腫瘤組織微觀形態(tài)學，免疫組化法檢測腫瘤組織TP53、Bax、Bcl2、Survivin、VEGF的表達

6、觀察當歸紅芪超濾物對12C6重離子束治療H22荷瘤小鼠的增效效應；基于細胞凋亡檢測、細胞周期分析、MouseGenome4302.0芯片小鼠腹水細胞基因表達譜檢測技術初步篩選當歸紅芪超濾物輔助12C6重離子束治療H22荷瘤小鼠減毒增效的可能分子機制。結果：結果：（1）超高效液相色譜法和超高效液相色譜質譜聯(lián)用比較當歸紅芪超濾物與水提取物組分差異顯示，當歸紅芪超濾物中組分少于當歸紅芪浸膏粉中組分，部分所具有的相同組分在超濾物中含量有一定提高

7、；（2）12C6重離子束6Gy劑量單次輻射人肝癌HepG2細胞24小時后，與0Gy劑量組比較，細胞晚期凋亡率、G2M期細胞比例明顯上升（P0.01），電子顯微鏡下顯示了細胞凋亡及線粒體腫脹的表現(xiàn)，在此過程中p53信號通路涉及DNA損傷修復、凋亡、細胞周期調控、轉錄調節(jié)、血管新生等31個基因表達出現(xiàn)了明顯變化；與0Gy劑量組比較，6Gy劑量12C6重離子束輻射組細胞線粒體膜電位呈現(xiàn)崩解表現(xiàn)，細胞FAS、TP53BP2、TP53AIP1、C