10260.共振光散射技術在核酸分析中的研究及其應用

1、分類號密級UDC學號20110913012青海師范大學碩士學位論文共振光散射技術在核酸分析中的研究及其應用研究生姓名夏曉姍導師姓名（職稱）王建朝，教授申請學位類別碩士學科專業(yè)名稱無機化學研究方向名稱超分子化學論文提交日期2014年3月論文答辯日期2014年6月學位授予單位青海師范大學學位授予日期2014年6月答辯委員會主席評閱人，I共振光散射技術在核酸分析中的研究及其應用中文摘要核酸是遺傳信息的載體和基因表達的物質基礎在生物的生長、發(fā)育

2、等活動中具有十分重要的作用。核酸的研究逐漸成為生命科學中的活躍領域，核酸的定量測定是分子生物學領域研究的基礎，而核酸與小分子的相互作用研究對發(fā)現(xiàn)新藥物和在基因水平上疾病的治療尤其是藥物分子的作用機理具有非常重要的意義因此一直是人們關注和研究的課題之一。本論文以建立對核酸和有機染料及藥物痕量組分的分析為目的，建立了測定核酸的共振光散射新方法，并對各實驗條件進行研究和優(yōu)化，主要進行了以下幾方面的創(chuàng)新性研究工作。1.研究了吖啶橙與酵母核糖核酸

3、相互作用的共振光散射光譜(RLS)和紫外可見吸收光譜的特征，建立了測定酵母核糖核酸的新分析方法。在堿性條件下，酵母核糖核酸與吖啶橙相互作用，在333nm處產(chǎn)生顯著增強的散射信號。共振光散射增強的程度與酵母核糖核酸的質量濃度呈良好的線性關系，在最佳的實驗條件下，測定酵母核糖核酸的線性范圍為0.05~15.0μgmL，檢出限為0.017μgmL。該方法簡單、快速、靈敏度高，將該法用于合成樣品中酵母核糖核酸的測定，結果令人滿意。2.將4氨基安

4、替比林(4AAP)用于酵母核糖核酸的共振光散射測定。在pH=4.78的緩沖溶液中，酵母核糖核酸的加入導致4氨基安替比林在472nm處共振光散射的增強，其增強強度與酵母核糖核酸的濃度呈線性關系，據(jù)此建立了一種測定酵母核糖核酸的共振光散射法。該方法的線性范圍為0.25~18.0μgmL，檢出限為0.23μgmL。該方法具有操作簡單，線性范圍寬，檢出限低的特點。3.研究了溴酚藍(BPB)在陽離子表面活性劑CTMAB存在下與核酸的共振光散射光譜

5、。在pH=4.78的條件下，溴酚藍和表面活性劑在核酸分子表面上發(fā)生聚集，形成了核酸CTMAB溴酚藍締合物聚集體。在形成締合物的過程中，CTMAB縮短了溴酚藍與核酸之間的距離，增強了它們之間的相互作用。共振光散射的增強程度與核酸的濃度在一定范圍內呈線性關系，據(jù)此建立了一種新的測定核酸的共振光散射法。yRNA與DNA的線性范圍分別為0.15~10.0μgmL和1.0~10.0μgmL，檢出限分別為0.12μgmL和0.23μgmL。關鍵詞：