17059.植物甾醇氧化物的制備及其細胞毒性的初探

1、獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得安徽農業(yè)大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名：簽字日期：冽年多月莎日學位論文版權使用授權書本學位論文作者完全了解安徽農業(yè)大學有關保留、使用學位論文的

2、規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子文件，允許論文被查閱和借閱。本人授權安徽農業(yè)大學可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，收錄到《中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫》，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編學位論文，向社會公眾提供信息服務。(保密的學位論文在解密后適用本授權書)。學位論文作者簽名：簽字口期：勱／)年易月孑|1學位論文作者畢業(yè)后去向：工作單位：通信地址：擼導教師簽名：孜堤簽字日期：幻膽年／月

3、8卜』電話：郵編：摘要植物甾醇因具有降fL王I：J嗵吲醇吸收的功效，近年來備受關注，許多閉家相繼開發(fā)1『，種類繁多的富含植物甾；醇的功能性食品。然而，由’Ⅱ其化。學結構上含訂雙鍵，植物甾醇和H日固醇郜容易受到外界各種因索(如空7e、光、熱、嗨等)的影響，在‘fi產和1儲存過程可能發(fā)牛氧化，產牛人量氧化物。已有研究表明，膽固醇氧化物與‘一系列柏‘害的與磷脂代謝和細胞功能相火的人類疾病有天，并矗示出細胞毒性、致突變和致癌等性質。植物甾醇，J

4、以經(jīng)歷與_Jl固醇問樣的氧化過程，7卜成植物甾醇氧化物，【qj1E植物甾醇氧化物很有一叮能對人體健康產牛不利影響。11前對f這類物質的牛琿活性研究卻很少，豐要原兇是由于|二j前尚兀商業(yè)化的植物甾醇氧化物標準品，因此對于植物甾醇氧化物的牛理效應和安全性尚無定論。木研究以膽【州醇、豆甾醇和混合植物甾醇為實驗材料，采用薄層色譜法和高效液相色潛法分析制備了植物甾醇單體和熱氧化物，采刖化學合成法合成1廠兩類ii要的甾醇氧化物，對氧化物及中間產物的

5、色譜行為和化學結構性質進行了研究，并對氧化物的細胞毒性效應進行了初探。高效液相色譜法是分析植物甾醇及其氧化物的1i要方法之。。在木實驗巾，通過對液相色譜柱和流動相的試驗，獲得J7最佳分析條件：色譜柱為AgilentEclipseXDB—C8柱，流動相為乙腈／異丙醇=9：l(v／v)39混合溶劑，流速為10mL／min，紫外檢測波長208nm。該分析條件／fi儀能夠有效地分離植物甾醇混合物，而lL還能成功分離后續(xù)合成的氧化產物，H對符類被

6、分析物的保留時間較短，可往化學合成過程中監(jiān)洲反應進度。為了獲得足鏈牛理活性研究所需的植物甾醇氧化物，術研究白‘先分別從高純度的膽Ib】醇和i、，甾醇單體出t發(fā)，化學合成了結構為7keto一幣N71]一OH膽固醇氧化物，以及7keto一和76一OH—k』甾醇氧化物：然后，以一種混合植物甾醇(Generol95R)為起始物，合成J77keto一和7B—OH一混合植物甾醇氧化物。根據(jù)薄層色譜(TLC)和高效液相色譜(HPLC)的分析結果I叮以

7、發(fā)現(xiàn)，植物甾孵氧化物及其中問產物的保留值與月L!同醇和。了甾孵同結構的化合物相同一且洗脫順序』飛有棚似的規(guī)律，這表明起始混合植物甾醇巾的荇單體以相同的速二莽參!』了化學反應。基于6訂述的分析：堰JHPLC對7一keto一$117B—OH一植物甾醇氧化物的分析結果，我們采用m恥號的、仁制備高效液市I色譜(semi—preparativeHPLC)對植物甾孵氧化物進仃J7分離制備，經(jīng)過循環(huán)進樣并收餾分，獲得了，U種r島純度的植物甾醇氧化物單