伊犁黑蜂蜂膠對變形鏈球菌屬及其生物膜代謝影響的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過比較伊犁黑蜂蜂膠乙醇提取物(Ethanol extract of Propolis EEP)與氟化鈉對致齲變形鏈球菌屬產(chǎn)酸，產(chǎn)糖代謝關(guān)鍵酶乳酸脫氫酶(Lactate dehydrogenaseLDH)與葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(Glycosyltransferase GTFs)及其相關(guān)基因表達的影響來探討其對變形鏈球菌屬代謝影響機制。
　　方法:分別培養(yǎng)游離狀態(tài)與生物膜狀態(tài)下生長的變形鏈球菌、遠緣鏈球菌;并以含梯度濃度EEP的腦心

2、浸液培養(yǎng)基(Brian HeartInfusionBHI)，50mg/L NaF的BHI培養(yǎng)基，不含藥物的BHI培養(yǎng)基分別作為實驗組，陽性對照組與陰性對照組與不同生長狀態(tài)的目的細菌作用18小時，①通過還原性輔酶I氧化法測定乳酸脫氫酶活性。②通過硫酸銨鹽析結(jié)合超濾離心法提取GTFs粗酶，蒽酮法測定GTFs活性。③RT-qPCR法測定各組LDH編碼基因ldh表達。④RT-qPCR法測定各組GTFs編碼基因gtfB，gtfC，gtfD表達。<

3、br>　　結(jié)果:
　?、僭谟坞x狀態(tài)與生物膜狀態(tài)下，變形鏈球菌、遠緣鏈球菌各實驗組和NaF組LDH活性均明顯受到抑制(P＜0.05)。
　?、谠谟坞x狀態(tài)和生物膜狀態(tài)下，EEP組，NaF組變形鏈球菌GTFs活性沒有變化(P＞0.05)。
　?、塾坞x狀態(tài)時，變形鏈球菌，遠緣鏈球菌實驗組組和NaF組ldh表達明顯受到抑制（P＜0.05）;生物膜狀態(tài)下，變形鏈球菌實驗組在MBEC、1/2MBEC、1/4MBEC濃度時ldh表達受

4、到抑制（P＜0.05），遠緣鏈球菌實驗組在MBEC、1/2MBEC、1/4MBEC、1/8MBEC濃度時ldh表達受到抑制(P＜0.05)，兩種細菌NaF組ldh表達差異沒有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。
　?、苡坞x狀態(tài)與生物膜狀態(tài)下，變形鏈球菌實驗組gtfB、gtfC、gtfD基因表達與陰性對照組沒有差異（P＞0.05）。游離與生物膜生長狀態(tài)變形鏈球菌NaF組對gtfB基因表達有抑制作用（P＜0.05)。
　　結(jié)論:伊犁黑蜂

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