玉米大斑病菌轉錄因子StSte12的結構分析及其下游靶基因的篩選.pdf

1、分類號：墨壘35：131密級：公玨單位代碼：學號：100862010082玉米大斑病菌轉錄因子StStel2的結構分析及其下游靶基因的篩選ThestructureanalysisoftranscriptionfactorStStel2andscreeningofdownstreamtargetgenesofStStel2inSetosphaeriaturcica學位申請人：張長志指導教師：韓建民教授董金皋教授學科專業(yè)：植物學學位類別：理

2、學碩士授予單位：河北農(nóng)業(yè)大學答辯日期：二。一三年五月二十七日摘要本實驗室在前期研究中已經(jīng)克隆了玉米大斑病菌Fus3／KsslhomologMAPK級聯(lián)途徑下游的一個轉錄因子基因StSTEl2，并獲得了3株該基因的不同沉默程度RNAi轉化子。本研究在此基礎上利用生物信息學技術，明確了StSTEl2在基因組中的位置并解析了StStel2蛋白質(zhì)的結構特征；并在分析釀酒酵母ScStel2轉錄因子的下游調(diào)控基因的基礎上，從玉米大斑病菌基因組數(shù)據(jù)庫

3、中篩選得到了ScStel2的同源基因；以玉米大斑病菌StSTEl2基因RNAi轉化子為實驗材料，利用RTPCR和RealtimePCR技術，分析這些基因的表達規(guī)律，最終確定玉米大斑病菌轉錄因子StStel2可能的下游調(diào)控基因。本試驗的主要研究結果如下：1利用生物信息學方法，確定了玉米大斑病菌StSTEl2基因位于scaffold13正鏈的10617471064127，其ID為105656；該基因的編碼蛋白具有Stel21ike蛋白所特有

4、的保守結構域(STEhomeodomain和ZnFC2H2鋅指結構)及空間結構。2利用Westernblotting技術，分析了玉米大斑病菌在菌絲發(fā)育、分生孢子形成及附著胞形成等不同發(fā)育時期StStel2蛋白的表達情況。結果表明，Ststel2蛋白在附著胞形成時期的表達量最大。3通過搜索釀酒酵母基因組數(shù)據(jù)庫，得到了釀酒酵母中受轉錄因子ScStel2調(diào)控的下游靶基因；進一步查詢玉米大斑病菌基因組數(shù)據(jù)庫，獲得了上述所有基因的同源基因；通過對