熱應激條件下內(nèi)毒素對肉雞肝損傷的研究.pdf

1、細菌內(nèi)毒素是革蘭陰性菌細胞壁的外膜成分，在細菌死亡或快速生長時期被釋放出來，內(nèi)毒素進入機體后可激活間質(zhì)細胞和髓樣細胞，尤其是誘導單核巨嗜細胞合成和釋放各種細胞因子、生長因子、趨化因子和炎癥介質(zhì)作用于全身，引起機體炎癥反應、休克、多器官功能衰竭甚至死亡。內(nèi)毒素也能直接作用于內(nèi)皮細胞、心肌細胞、成纖維細胞等實質(zhì)細胞，造成細胞損傷或凋亡，不同種屬的革蘭陰性細菌內(nèi)毒素引起機體的病理變化和臨床癥狀大致相同。內(nèi)毒素穩(wěn)定性強，不容易滅活，所以臨床上因

2、為革蘭陰性菌造成的內(nèi)毒素血癥非常常見，手術(shù)器械、沖洗系統(tǒng)、灌洗液、藥液以及各種介入治療、導管、引流管的置入都可能因為細菌內(nèi)毒素的污染而使動物發(fā)生外源性內(nèi)毒素血癥，而各種應激、手術(shù)創(chuàng)傷、消化系統(tǒng)疾病會導致動物出現(xiàn)腸源性內(nèi)毒素血癥。臨床上很多醫(yī)師在對動物的診療中對內(nèi)毒素造成的危害認識不足，例如在革蘭陰性菌感染的治療中，雖然用抗生素殺死了細菌，動物卻產(chǎn)生嚴重的內(nèi)毒素血癥，對動物造成嚴重的危害。如寵物犬的膿皮病、腹膜炎、子宮蓄膿等病的治療，不僅

3、要控制細菌感染，也要糾正嚴重的內(nèi)毒素血癥，否則會增加寵物死亡的風險，即在動物疾病診療中要“菌毒并治”。
　　夏季高溫肉雞常常因為急性熱應激而死亡，而熱應激引發(fā)的腸源性內(nèi)毒素血癥是肉雞死亡的重要原因。本試驗以AA肉雞為研究對象，建立肉雞熱應激內(nèi)毒素血癥模型，通過臨床觀察、組織病理學檢查、血常規(guī)檢查、鱟試劑檢查法、血液生化和分子生物學檢查等技術(shù)，檢測熱應激條件下肉雞血液內(nèi)毒素的變化、肝臟損傷和內(nèi)毒素受體基因表達情況，探討熱應激條件下肉

4、雞的發(fā)病機理。
　　隨著熱應激時間的延長，肉雞出現(xiàn)精神沉郁，氣喘，拉稀等現(xiàn)象。病理組織學顯示，熱應激初期小腸絨毛、漿膜、肌層和黏膜下層未見明顯變化，到后期小腸絨毛斷裂、毛細血管淤血、黏膜上皮細胞發(fā)生脫落。初期肝細胞部分細胞核溶解、肝血竇輕度擴張，到后期肝細胞脂肪變性，肝索排列紊亂，炎性細胞浸潤，肝臟組織受到損傷，導致肉雞食欲下降，消化不良，體溫升高，機體處于氧化應激狀態(tài)。
　　鱟試驗法檢測結(jié)果顯示，熱應激初期肉雞血液內(nèi)毒素水

5、平即上升;熱應激后期，血液內(nèi)毒素水平升至高至對照組的7倍。證明急性熱應激下肉雞腸道黏膜受到損傷，腸道內(nèi)毒素進入血液循環(huán)而使內(nèi)毒素水平升高，肉雞熱應激條件下發(fā)生內(nèi)毒素血癥的理論得到了驗證。而VC組對試驗組相比差異不顯著。
　　血細胞鏡檢結(jié)果顯示，熱應激內(nèi)毒素血癥初期雞血液紅細胞數(shù)目略微升高，中后期顯著降低，與對照組相比差異顯著，VC組與試驗組紅細胞數(shù)目在各時間段相比差異不顯著。血液白細胞初期顯著降低，而后顯著升高，說明熱應激內(nèi)毒素血

6、癥降低了肉雞免疫力，后期肉雞處于應激狀態(tài)。VC不能很好的改善肉雞熱應激內(nèi)毒素免疫力低下的狀況。
　　血液生化檢測結(jié)果顯示，ALT等主要指標持續(xù)升高，與對照組相比差異極顯著，說明肉雞熱應激條件下肝臟組織受到損傷，肝臟功能受到影響，同時說明肉雞血液內(nèi)毒素升高的另一個原因是肝功能受損后內(nèi)毒素清除機制被破壞。
　　RT-PCR技術(shù)對肝臟內(nèi)毒素受體檢測結(jié)果顯示，肝臟TLR4受體mRNA表達在熱應激初期即上升，熱應激后期表達量升高為對照

7、組的1.4倍，與對照相比差異顯著。TLR4受體激活后通過NF-κB誘導大量炎癥因子產(chǎn)生，導致全身炎癥反應綜合征(SIRS)、彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)、膿毒性休克及多器官功能衰竭(MODF)的發(fā)生，這可能是急性熱應激肉雞大量死亡的原因。
　　綜合以上結(jié)果可得出結(jié)論，熱應激能導致肉雞腸道損傷，繼而出現(xiàn)內(nèi)毒素血癥，且隨著熱應激時間的延長嚴重程度加劇;腸源性內(nèi)毒素血癥的發(fā)生導致肝臟TLR4受體mRNA的表達上調(diào)，內(nèi)毒素誘導產(chǎn)生的炎癥因子