銀鯧淀粉卵甲藻病治療藥物的毒副作用研究.pdf

1、寧波大學銀鯧研究課題組在2013年5月-9月及2014年7月-10月，連續(xù)兩年養(yǎng)殖的銀鯧爆發(fā)了嚴重的淀粉卵甲藻病，給銀鯧養(yǎng)殖科研工作帶來了毀滅性的打擊。淀粉卵甲藻病又稱“淀粉卵渦鞭蟲病”，是一種由原蟲引起的常見于海水養(yǎng)殖魚類的寄生蟲疾病，該病具有發(fā)病時間長，感染快，死亡率高的特點，有報道稱硫酸銅、乙酸銅、甲醛以及淡水浸泡等都是治療該病的有效方法。然而，已有研究表明這些治療方法對不同魚類的毒副作用差異較大，由于銀鯧的人工養(yǎng)殖剛剛起步，上述

2、藥物對銀鯧的毒副作用尚不明確，因此無法掌握科學用藥的劑量以及藥浴時間，這給淀粉卵甲藻病的預防與治療造成了極大的困難。就此，本研究開展了三種治療藥物對銀鯧幼魚的96h急性毒性試驗和淡水脅迫試驗，研究了不同濃度梯度下銀鯧的半致死濃度、安全濃度、血細胞微核率，并測定了三種抗氧化酶（SOD、CAT、GPX）、Na+K+ATP酶的活性變化，還著重比較了正常魚與染病魚的組織病理學，以及三種治療藥物和淡水脅迫對其鰓、肝、腎組織的影響。從而明確了銀鯧對

3、三種藥物的敏感性及藥物的毒副作用，以期為今后銀鯧養(yǎng)殖中淀粉卵甲藻病的防治提供科學的用藥指導，以及為銀鯧藥物毒理學研究提供理論資料。論文獲得的研究成果綜合如下：
　?。?）用解剖學及組織切片技術，觀察了淀粉卵渦鞭蟲形態(tài)及其寄生后鰓的病理組織學結構變化；觀察發(fā)現(xiàn)淀粉卵渦鞭蟲呈梨形或近球形，外表面較為光滑，直徑在50μm左右，其內部具有豐富的淀粉粒，以假根狀突起的附著器附著于銀鯧鰓小片基部汲取養(yǎng)分；感染蟲體的銀鯧鰓組織結構遭到嚴重破壞，

4、主要表現(xiàn)為鰓小片毛細血管擴張、基部充血，上皮細胞破損、增生，嚴重者鰓小片發(fā)生粘連；由于鰓組織的輸氧能力遭受破壞，病魚最終因呼吸衰竭而死亡。
　?。?）采用魚類急性毒性試驗方法，研究了硫酸銅、甲醛、乙酸銅對銀鯧幼魚的毒性試驗。結果表明：硫酸銅對銀鯧幼魚的48h和96h半致死濃度 LC50分別為0.860和0.770mg/L，安全濃度為0.077mg/L；甲醛對銀鯧幼魚的48h和96h半致死濃度 LC50分別為110和160mg/L，

5、安全濃度為11mg/L；乙酸銅對銀鯧幼魚的48h和96h半致死濃度LC50分別為0.898和0.264mg/L，安全濃度為0.026 mg/L。三種藥物對銀鯧的毒性強度依次是乙酸銅>硫酸銅>甲醛。
　?。?）不同濃度的硫酸銅、甲醛和乙酸銅對銀鯧肝臟三種抗氧化酶（SOD、CAT和GPX）活性的影響均表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢，即低濃度誘導高濃度抑制的拋物線型的劑量效應關系，其中SOD對三種藥物的耐受閾值最低，即其對藥物敏感性較高，可以

6、靈敏地指示低濃度的藥物污染。
　　（4）組織學研究發(fā)現(xiàn)，不同濃度的硫酸銅、甲醛和乙酸銅均會對銀鯧的鰓、肝、腎組織造成損傷。HE染色顯示：鰓組織學損傷主要是鰓小片扭曲變形，鰓絲上皮細胞增生，鰓小片充血，鰓小片末端膨大成小球狀，肝組織出現(xiàn)肝細胞輕度變性、腫脹呈彌漫疏松化，竇狀隙膨脹、損害嚴重時肝細胞溶解，細胞界限模糊；腎臟腎小管上皮腫脹，水樣變性，間質細胞增多，嚴重者腎小管萎縮壞死。這些組織病變都顯示出劑量的關聯(lián)性。
　?。?）

7、微核實驗結果顯示：Cu2+能誘發(fā)銀鯧外周血紅細胞產生微核，另外還包括其他核異?，F(xiàn)象，包括核質內凹、核質外凸、雙核等，Cu2+對銀鯧具有明顯的核損傷作用。而且隨著Cu2+濃度的增加銀鯧血細胞微核率和核異常率均上升，當Cu2+濃度達到0.670 mg/L時，血細胞微核率和核異常率均達到最大，細胞微核率達13.23‰，為對照組的12.36倍，之后隨著Cu2+濃度增加，微核率和核異常率反而下降。
　?。?）淡水浸泡治療表明：淡水脅迫時間超