青島沿海海藻次級(jí)代謝產(chǎn)物及其生物活性篩選的初步研究.pdf

1、我國(guó)海洋資源豐富，大型海藻分布廣泛，由于其特殊的生長(zhǎng)環(huán)境，代謝產(chǎn)物豐富，結(jié)構(gòu)獨(dú)特，引起了國(guó)內(nèi)外科學(xué)家的重視和關(guān)注，從而加大了對(duì)海藻資源的開(kāi)發(fā)和利用。
　　 植物病原菌是農(nóng)業(yè)發(fā)展的一大嚴(yán)重威脅。農(nóng)藥的大量使用，不僅對(duì)生態(tài)環(huán)境造成極大傷害，而且也會(huì)使植物病原菌的抗藥性和耐藥性大大增強(qiáng)，藥效明顯減弱。然而新化學(xué)農(nóng)藥的開(kāi)發(fā)費(fèi)用高，農(nóng)藥殘留問(wèn)題嚴(yán)重，因此尋找一種新型環(huán)保的農(nóng)藥迫在眉睫。此外，海洋細(xì)菌對(duì)海產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展和海洋設(shè)備的污損都存在

2、較大的影響，因此尋找天然抑菌活性物質(zhì)是保護(hù)海洋環(huán)境，發(fā)展海產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)和海洋防污的重點(diǎn)。因海藻獨(dú)特和新穎的代謝產(chǎn)物能夠?yàn)槠涮峁┝己玫慕Y(jié)構(gòu)模板，合理的開(kāi)發(fā)和利用海藻資源具有極其重要的意義。
　　 本課題主要利用青島沿海收集的多管藻、粗枝軟骨藻、蜈蚣藻、海頭紅四株海藻為研究對(duì)象，通過(guò)對(duì)其運(yùn)用有機(jī)溶劑浸提、液液萃取、梯度洗脫、薄板層析等方法初步處理后，得到不同極性的次級(jí)代謝產(chǎn)物，并對(duì)這些次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行4株海洋細(xì)菌和4株植物病原菌的抑菌活

3、性初步篩選實(shí)驗(yàn)。此外，通過(guò)抑菌活性大小的對(duì)比，對(duì)抑菌活性效果較好的海藻粗提物進(jìn)行色譜分離純化和現(xiàn)代波譜分析，對(duì)部分次級(jí)代謝產(chǎn)物進(jìn)行分離純化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn):
　　 1、四種海藻的粗提物及次級(jí)代謝產(chǎn)物的抑菌活性研究:
　　 收集青島沿海的四種大型海藻，干燥、粉碎、過(guò)篩、乙醇浸提、超聲提取后獲得紫黑色浸膏，再分別用石油醚和乙酸乙酯先后對(duì)浸膏進(jìn)行液-液萃取，獲得的乙酸乙酯相樣品再通過(guò)石油醚、乙酸乙酯、二氯甲烷和甲醇等進(jìn)行梯度洗脫

4、，并對(duì)每個(gè)海藻的各個(gè)組分進(jìn)行HPLC檢測(cè)和抑菌活性的篩選。綜合薄層分析和抑菌活性的試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)多管藻為優(yōu)勢(shì)藻種，次級(jí)代謝產(chǎn)物豐富，抑菌活性較其他三個(gè)海藻有明顯優(yōu)勢(shì)。
　　 2、四種海藻各梯度洗脫組分的生物活性篩選:
　　 在抑制4種海洋細(xì)菌活性的實(shí)驗(yàn)中，陽(yáng)性對(duì)照為氯霉素，四種海藻同樣也表現(xiàn)出了一定的抑菌活性。粗枝軟骨藻的Fr5對(duì)SA（金黃色葡萄球菌）的抑制效果較好（抑菌圈為16.2mm，陽(yáng)性對(duì)照為29.2 mm）。多管藻的

5、抑菌活性最明顯，中極性組分Fr5、Fr6、Fr7都有效果較好的抑菌活性，抑菌圈大小分別為:BS（枯草芽孢桿菌）12.3mm、15.0mm、15.2mm（陽(yáng)性對(duì)照28.3mm），SA（金黃色葡萄球菌）11.2mm、12.3mm、14.2mm（陽(yáng)性對(duì)照29.2mm），BT（蘇云芽孢桿菌）9.1mm、11.5mm、8.6mm（陽(yáng)性對(duì)照30.6mm），EC（大腸埃希氏桿菌）8.8mm、9.2mm、14.2mm（陽(yáng)性對(duì)照30.3mm）。由此可見(jiàn)，