利用雙T-DNA載體選育含有耐貯基因獼猴桃的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、紅陽獼猴桃是原產于我國的一種紅心中華獼猴桃。因其肉質鮮美,營養(yǎng)豐富,口感極佳,具有極高的商業(yè)價值。但紅陽獼猴桃果實成熟后常溫下儲存期極短,一般不足一個星期就開始潰爛,經常使果農和商家蒙受巨大的經濟損失。為了建立獼猴桃基因功能研究技術平臺,并通過生物技術改良紅陽獼猴桃,本實驗構建了一個雙T-DNA載體pCAMBIA1300-ACO-actin-term,載體中兩個T-DNA結構順序相連,兩條不同T-DNA區(qū)上分別有標記基因hpt和目的基因

2、ACO,中間沒有其他插入序列。將鑒定正確的反義表達載體,轉化農桿菌EHA105。采用葉盤轉化法通過根癌農桿菌EHA105菌株介導,將ACO反義基因導入紅陽獼猴桃中,得到再生植株。并對再生植株進行PCR檢測,PCR法檢測證明ACO反義基因已轉入轉化植株基因組中。本研究在世界上首次使用雙T-DNA載體將含有獼猴桃的ACO基因的反義表達載體成功轉入中華獼猴桃,并獲得了再生植株。為下一步從轉化的再生植株分離的后代中,選育無篩選標記的耐貯轉基因紅

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