銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶酶學性質及其抑制劑研究.pdf

1、酚氧化酶(phenoloxidase，EC.1.14.18.1，簡稱PO)又稱絡氨酸酶、兒茶酚氧化酶等，是結構復雜的多亞基的含銅氧化還原酶。它廣泛存在于動物、植物、微生物、昆蟲及人體內，位于黑素細胞的黃素體中，與黃素體膜結合，只有極小部分以游離形式存在。它是昆蟲體內的一種重要酶類，在昆蟲的變態(tài)發(fā)育和免疫系統(tǒng)中起著重要作用。由于酚氧化酶具有重要的理論意義和發(fā)展前景，大量的研究工作集中在此領域。
　　 本文以鞘翅目昆蟲銅綠金龜子An

2、omalacorpulentaMotsch幼蟲酚氧化酶為試驗對象，對其進行了部分純化，研究了該酶的基本酶學特性，并以曲酸、熊果甙、桑黃素、槲皮素、4-己基間苯二酚和4-十二烷基間苯二酚等六種化合物為效應物研究其對該酶活性的抑制，并對其抑制參數(shù)及抑制動力學進行了研究。結果表明：
　　 1.經過35％飽和硫酸銨沉淀，銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶的最適溫度為50℃，最適pH值為7.5，以L-多巴和鄰苯二酚為底物時，銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶的K

3、m分別為11.11mmol·L-1和9.52mmol·L-1。
　　 2.研究曲酸、熊果甙、桑黃素、槲皮素、4-己基間苯二酚和4-十二烷基間苯二酚對銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶活力的抑制作用，結果表明：以L-多巴為底物時，銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶對曲酸、桑黃素、槲皮素、4-己基間苯二酚和4-十二烷基間苯二酚敏感，其IC50分別為0.65mmol·L-1、1.05mmol·L-1、0.146mmol·L-1、1.7μmol·L-1和1.2

4、μmol·L-1。
　　 3.研究曲酸、熊果甙、桑黃素、槲皮素、4-己基間苯二酚和4-十二烷基間苯二酚對銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶活力的抑制作用類型，結果表明：以L-多巴為底物時，這六種效應物對銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶的抑制類型均為可逆性抑制類型。
　　 4.研究曲酸、熊果甙、桑黃素、槲皮素、4-己基間苯二酚和4-十二烷基間苯二酚對銅綠金龜子幼蟲酚氧化酶活力的抑制作用機理，結果表明：以L-多巴為底物時，曲酸、桑黃素、槲皮素、4