含cry1Ab和cry2Ab雙基因的抗蟲轉基因水稻的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、蘇云金桿菌(Bacillus thuringiensis，簡稱Bt)是一類非常重要的殺蟲微生物，它能產生殺蟲結晶蛋白，對農業(yè)上的許多有害昆蟲有特異性的毒殺作用。近三十年來，以蘇云金桿菌殺蟲蛋白為基礎的轉基因植物已在世界范圍內商業(yè)化，用于防治重要經濟作物的害蟲。隨著抗蟲轉基因植物的廣泛應用，使得害蟲連續(xù)暴露在Bt毒蛋白的選擇壓力下，害蟲對Bt殺蟲蛋白質抗性的發(fā)生不可避免。部分害蟲已經產生了Bt抗性，影響了Bt轉基因農作物的功效。同時使用兩

2、個以上殺蟲機理有差別的Bt毒蛋白基因轉化植物，可以防止或延緩害蟲抗性的發(fā)生，同時也可以擴大轉基因植物的抗蟲譜和抗蟲效果。Cry1Ab蛋白與Cry2Ab蛋白的氨基酸序列同源性非常低，研究表明它們不易產生交互抗性。因此本論文構建了同時包括抗蟲基因cry1ab表達框、抗蟲基因cry2Ab表達框和草甘膦抗性基因1174表達框的T-DNA轉化載體1300-cry1Ab-cry2Ab-1174。以攜帶該載體的農桿菌LBA4404侵染粳稻“秀水110

3、”，獲得了雙抗蟲基因同時抗草甘膦的轉基因水稻。
　　 對獲得的轉基因水稻進行PCR鑒定和Southern雜交試驗，結果顯示，抗蟲基因已成功地轉入到水稻中；Western Blot分析表明抗蟲基因cry1Ab、cry2Ab和草甘膦抗性基因1174均在轉基因水稻葉片中成功獲得表達。利用棉鈴蟲和稻縱卷葉螟對轉基因水稻進行抗蟲生物測定，結果顯示該轉基因水稻具有良好的抗蟲性能；通過噴施20mM/L的草甘膦，發(fā)現該轉基因水稻對草甘膦具有很好

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