ABA、SA預處理對水分和鹽脅迫下水稻DNA甲基化水平的影響.pdf

1、碩士學位論文論文作者：學科專業(yè)：指導教師：培養(yǎng)單位：培養(yǎng)類別：完成時間：沈陽師范大學學位評定委員會單位代碼：單位代碼：10166ABA、SA預處理對水分和鹽脅迫下水稻預處理對水分和鹽脅迫下水稻DNA甲基化水平的影響甲基化水平的影響陳強生物化學與分子生物學李雪梅教授化學與生命科學學院全日制2012年03月01日ABA、SA預處理對水分和鹽脅迫下水稻DNA甲基化水平的影響摘要干旱脅迫和鹽脅迫是兩個重要的環(huán)境脅迫因子。由于干旱和鹽脅迫對農(nóng)業(yè)生

2、產(chǎn)造成巨大的危害，嚴重影響糧食產(chǎn)量，因此二者對植物影響的研究受到了廣泛重視。本文以水稻(yzasativaL.)為試材，研究了在水分脅迫（PEG模擬）下和鹽脅迫（NaCl）下水稻DNA甲基化的變化規(guī)律，揭示水稻對水分、鹽脅迫的響應機制；同時研究了脫落酸、水楊酸預處理對水分和鹽脅迫下DNA甲基化的影響，實驗預處理方法為：挑選籽粒飽滿的水稻種子，用1mmolL水楊酸（SA）和0.1mmolL脫落酸（ABA）溶液浸種。主要結果如下：本文對水稻

3、基因組DNA提取和純化方法進行比較，通過CTAB法I和CTAB法II對水稻DNA提取和純化：CTAB法I在提取和純化DNA時，加入適量的RNA酶，除去DNA中殘留的RNA的效果較好，盡可能減少RNA對高效液相體系檢測結果的影響，保證實驗的準確性；對高效液相法（HPLC）進行DNA總甲基化水平測定的體系進行了優(yōu)化，測定水稻葉片DNA甲基化總體水平的最佳色譜條件：流動相為甲醇：磷酸二氫鉀（10mmolL）（10:90，VV），pH3.5左右

4、，流速0.5mlmin，柱溫35℃，C18柱（250mm）是最佳的色譜條件。水分和鹽脅迫下處理組DNA甲基化水平要明顯高于對照組各個時期的總甲基化水平，這說明逆境脅迫會導致DNA總甲基化水平的升高。ABA、SA兩個預處理組及對照組（未予處理）在受到水分脅迫后，DNA甲基化水平均呈上升趨勢。0h至4h，ABA、SA、CK組上升均較快，SA和CK組在4h到達了最高值，而ABA預處理組脅迫后4h接近最高峰值，且CK組明顯高于兩個預處理組；4h

5、至24h，ABA組達到最高值，而SA組和CK組則緩慢降低；24h至144h，CK組又呈緩慢升高趨勢，而ABA和SA預處理組則呈緩慢降低趨勢。由此說明ABA、SA預處理在一定程度上降低了因水分脅迫而導致DNA甲基化水平的升高。ABA、SA兩個預處理組及對照組（未予處理）在受到鹽脅迫后，DNA甲基化水平均呈上升趨勢。0h至4h，ABA、SA、CK組均呈明顯增高趨勢且未到達最高值；4h至24h時ABA和CK組DNA甲基化水平到達了最高值，而S