大豆GmNF-YC1,2,3基因的克隆與功能分析.pdf

1、在植物中，NF-Y(Nuclear Factor Y)家族轉(zhuǎn)錄因子參與調(diào)節(jié)多種生理生化過(guò)程，諸如胚胎發(fā)育、藍(lán)光信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、干旱脅迫、光周期開(kāi)花、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)、ABA(abscisic acid)的傳輸、固氮根瘤的發(fā)育、光合作用和根的延伸等等。但是，對(duì)大豆的NF-YC家族基因的研究，尚屬空白。
　　 本研究根據(jù)擬南芥NF-YC基因家族蛋白序列和大豆基因蛋白序列比對(duì)分析，預(yù)測(cè)到了15個(gè)大豆GmNF-YCs基因，他們分屬于9條染色體上

2、。根據(jù)已發(fā)表的大豆基因組序列，我們從大豆“墾農(nóng)18”的cDNA中克隆到了3個(gè)NF-YC基因，分別命名為GmNF-YC1，2，3。生物信息學(xué)分析表明：它含有DNA結(jié)合域、與NF-YA和NF-YB的相互作用區(qū)域以及CCAAT結(jié)合域，這些功能域與擬南芥等植物中的同源基因NF-YC3，4，9高度保守，表明GmNF-YC1，2，3基因可能具有與擬南芥的AtNF-YC3，4，9的類似功能相似，可能參與光周期開(kāi)花調(diào)控。
　　 利用實(shí)時(shí)定量PC

3、R(quantitative real time RT-PCR，qPCR)對(duì)它們時(shí)空表達(dá)進(jìn)行了監(jiān)測(cè)。結(jié)果顯示，GmNF-YC2在長(zhǎng)日照和短日照下均表現(xiàn)出明顯的節(jié)律性，GmNF-YC3在長(zhǎng)日照下表現(xiàn)出一定的節(jié)律性，而GmNF-YC1轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)不受光周期及生物鐘的調(diào)控。生長(zhǎng)發(fā)育時(shí)期及不同組織器官中，GmNF-YC1，2，3具有類似的時(shí)空表達(dá)模式，并都在特定的組織有較高表達(dá)，其表達(dá)主要集中在葉片中并且最高表達(dá)量出現(xiàn)在開(kāi)花期。