巴西橡膠芽接樹砧穗互作的蛋白質組學初步研究.pdf

1、目前巴西橡膠樹栽培中應用的主要種植材料是芽接樹。已知砧木對芽接樹生長、產量和抗性等有明顯影響。因此,闡明砧木與接穗間的關系對于橡膠樹砧木的選擇和應用具有重要意義。本文以海墾2(PB86×PR107)和熱研88-13(RRIM600×PiIB84)花藥壁體細胞組培苗的自接和互接樹為實驗材料,采用蛋白質組學的研究方法,分離并鑒定與橡膠樹砧穗互作相關的蛋白,為進一步闡明橡膠芽接樹砧穗間在蛋白質方面的影響機制打下了基礎。主要研究成果如下:

2、>　　 1.采用TCA-丙酮沉淀法提取不同實驗材料砧木和接穗的膠乳蛋白,運用蛋白質雙向凝膠電泳技術分離膠乳蛋白,使用圖譜分析軟件對膠乳蛋白的圖譜進行對比分析,再通過MALDI-TOF MS技術對比較分析得出的差異蛋白點進行鑒定。結果共鑒定出與砧穗互作相關的差異蛋白質32個,包括:Os05g0105900(RNA結合區(qū)域核蛋白-1(RNA識別基序)域含有蛋白質)、pre-mRNA splicing factor(前體mRNA剪接因子)、

3、methylenetetrahydrofolate dehydrogenase,putative(推測的亞甲基四氫葉酸脫氫酶)、celldivision cycle protein48(細胞分裂周期蛋白48)、ribophorinⅠ family protein(ribophorinI家族蛋白)、ribosomal protein S8(S8核糖體蛋白)、Os12g0271600(類似肌球蛋白重鏈)基因、transitional end

4、oplasmic reticulum ATPase(過渡時期內質網ATP酶,簡稱特爾ATP酶)、hypothetical protein LOC_Os12g24270(假定的反轉錄轉座子蛋白質)和light-harvesting chlorophyll-a/b protein of photosystemⅠ(光系統(tǒng)Ⅰ的捕光葉綠素蛋白a/b)等。依據功能分類,這些差異蛋白參與轉錄、翻譯、光合作用、細胞分裂、蛋白質合成和膠乳合成等生物學過程

5、。
　　 2.采用TCA-丙酮沉淀法提取不同實驗材料砧木和接穗的樹皮蛋白,運用蛋白質雙向凝膠電泳技術分離樹皮蛋白,使用圖譜分析軟件對樹皮蛋白的圖譜進行對比分析,再通過MALDI-TOF MS技術對比較分析得出的差異蛋白點進行鑒定。共鑒定出與砧穗互作相關的差異蛋白質52個,包括:photosystemⅡ protein33kD(光系統(tǒng)Ⅱ33 kD蛋白)、condensin complex component SMCl(Conden

6、sin復雜組分SMC41)、Putative mudrAprotein-maize transposon MuDR(推測的穆德拉蛋白-玉米轉座子穆德爾)、classⅢperoxidase(第三類過氧化物酶)、maturase K(內含子成熟酶)、putativephotoreceptor-interacting protein(光感受器相互作用蛋白)、heat shock factor(熱激因子)、taxadiene synthase(

7、紫杉烯合酶)、theta class glutathione transferase GSTT1(西塔類谷胱甘肽轉移酶(GSTT1缺失的基因))、calcineurin B-like protein9(鈣調磷酸酶B細胞樣蛋白)、putative ATP synthase beta subunit(推測的ATP合成酶β亞基)、Oxygen-evolvingenhancer protein1,chloroplastic(不斷增強的氧蛋白1,

8、葉綠體)、phytochrome B(光敏色素B)、peroxidase(過氧化物酶)、mitochondrial F1-ATPase beta subunit(β-亞基的線粒體的F1-ATP酶)、phosphoenolpyruvate carboxylase(磷酸羧化酶)、Ethylene receptor2(乙烯受體2)、pollen-specific profilin3(花粉特異性纖維蛋白3)、FLP1(FPF1-LIKEPROT

9、EIN1)(FPF1樣蛋白1,開花促進因子1)、arginase(精氨酸酶)、cytochrome(細胞色素)和ATP binding protein,putative(推測的ATP結合蛋白)等。依據功能分類,這些差異蛋白參與膠乳合成、光合作用、轉錄和翻譯、抗逆和機體代謝等生物學過程。
　　 3.從樹皮和膠乳中分離、鑒定出的差異蛋白數量和種類有所不同,但其功能主要與轉錄翻譯、光合作用和膠乳合成等有關,由此推斷,砧木與接穗的相互作