應激影響肉雞骨骼肌葡萄糖代謝的機制研究.pdf

1、為探討應激對肉雞骨骼肌葡萄糖代謝的影響及內在機制，本研究以外源？？糖皮質激素的方法建立應激反應模型，采用在體和離體試驗相結合的方式，較為系統(tǒng)地研究了糖皮質激素、胰島素和NO三者對肉雞骨骼肌葡萄糖代謝的獨立影響及其組合效應。 在第二章中，第一節(jié)研究應激對肉雞機體基礎糖代謝的影響，共分長期應激和急性應激兩個試驗。第二節(jié)研究離體CORI’處理對肉雞骨骼肌糖攝取能力的影響，選取21日齡雄性AA肉雞36只，剝離左右小腿后側的腓骨長肌，然后

2、體外孵育。將來自同一只雞的兩條肌肉樣本組成應激和對照兩個配對組，應激組內的肌肉樣本進行如下6種處理：cORT、CORT+SNP、 CORT+L-NAME、 CORT+INS、 CORT+INS+SNP 和CORT+INS+L-NAME處理，對照組內的肌肉樣本也進行6種處理：空白、SNP、L-NAME、INS、INS+SNP和INS+L-NAME處理，每個處理都有6條肌肉樣本。孵育結束后，測定肌肉樣本的NO水平、NOS的活力和肌糖原含量；

3、同時利用同位素雙標法測定在NO供體SNP、NOS抑制劑L-NAME和糖皮質激素CORT存在條件下，基礎狀態(tài)或INS誘導的肉雞離體骨骼肌的2-DG轉運速率。第三節(jié)研究活體CORT處理對肉雞骨骼肌糖攝取能力的影響，試驗設計與第二節(jié)類似，唯一不同點是將CORT的處理方式由體外孵育液添加改為活體皮下注射。結果發(fā)現，SNP引起肌肉基礎狀態(tài)和INS誘導的2-DG轉運速率增加，表明NO是調節(jié)骨骼肌糖代謝的一個重要因子。CORT引起肌肉基礎狀態(tài)下2-D

4、G轉運速率增加，提示其可能是應激狀態(tài)下機體糖原合成增加的重要原因，但這并不能說明其促進了GLU的有效利用。CORT抑制INS誘導的肌肉對2-DG的轉運速率，加入SNP后，骨骼肌的糖攝取能力明顯改善，表明應激早期，機體NO濃度的下降，可能與糖皮質激素誘發(fā)的IR有一定關系。與前人所做的活體L-NAME處理不同的是，沒有觀察到離體L-NAME處理對骨骼肌2-DG轉運速率的影響，表明血液動力學因素在骨骼肌糖攝取機制中同樣起著非常關鍵的作用。

5、 第三章研究內容將GLU與ARG負荷試驗結合起來，共分三個試驗，分別研究肉雞在正常生理狀態(tài)、急性應激狀態(tài)和高INS狀態(tài)下的糖代謝狀況。試驗一、二、三分別選取40、41、42日齡Arbor Acres肉用公雞24只，分為GLU、GLU+L-ARG、L-ARG和對照四組，所有雞單籠飼養(yǎng)，首先禁食，6小時后，所有雞空腹采血，然后試驗-肉雞按0.4ml/kgBW的劑量皮下注射玉米油和生理鹽水，試驗二肉雞按0.4ml/kgBW的劑量皮下注射C

6、ORT(溶于玉米油，10mg/ml)和生理鹽水，試驗三肉雞按0.4ml/kgBw的劑量皮下注射INS(溶于生理鹽水，2.5IU/ml)和玉米油。注射完畢后，GLU組肉雞按5ml/kgBW灌服GLU溶液(0.4g/ml)，GLU+L-ARG組肉雞按5ml/kgBW灌服GLU和ARG混合溶液(GLU濃度0.4g/ml，ARG濃度0.1g/ml)，L-ARG組肉雞按5ml/kgBW灌服ARG溶液(0.1g/ml)，對照組按5ml/kgBw灌服

7、蒸餾水。灌服完畢后，每只雞于30min、60min和120min采血，分離血漿，測定NO、NOS、UA、血糖、TG和INS含量。結果發(fā)現，L-ARG能夠促進機體NO的產生，在實際生產和臨床治療中可以作為一種NO的供體使用。應激影響動物機體的蛋白質、糖類和脂肪代謝，而L-ARG可以通過抑制應激引起的機體NO水平降低，從而在一定程度上改善機體物質代謝，降低應激的不利影響。應激時糖皮質激素的大量釋放誘發(fā)IR現象，使用L-ARG處理后，機體的高