黃瓜硝酸鹽含量SRAP標記分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、黃瓜(Cucumis sativus L.)是我國北方各省市場周年供應中的主要蔬菜之一，但其較高硝酸鹽含量對人類的健康構成了巨大的威脅。本研究利用高硝酸鹽含量和低硝酸鹽含量的黃瓜純合材料，采用BSA(Bulked Segregant Analysis)法結合SPAP(Sequence-related AmplifiedPolymorphism，SRAP，序列相關擴增多態(tài)性)分子標記技術并進行克隆，尋找與黃瓜硝酸鹽含量相關的基因全長或部分

2、片段。研究結果對于選育低硝酸鹽含量品系，提高黃瓜的品質具有重要意義，為今后黃瓜品質育種提供了依據和材料，對于提高黃瓜的品質具有重要意義。
　　 本研究主要結果包括：⑴對高硝酸鹽黃瓜品種1058(190.71mg/kg·FW)與低硝酸鹽品種D0327(136.22mg/kg·FW)以及其雜交衍生的150個F2代的硝酸鹽含量采用磺基水楊酸比色法進行測定，其基本符合正態(tài)分布。⑵采用改良的CTAB(三甲基十六烷基溴化銨)法，提取黃瓜基因

3、組DNA。經1％瓊脂糖凝膠電泳檢測，結果表明提取的基因組DNA帶型整齊，質量好。⑶利用正交設計法，建立了穩(wěn)定高效的黃瓜SRAP-PCR反應體系，提高了SRAP-PCR檢測效率。⑷采用BSA(集群分離分析法)構建極端高/低硝酸鹽DNA池。用380對SRAP隨機引物基因池進行擴增，篩選到具有差異帶(高濃度硝酸鹽植株沒有而低濃度硝酸鹽植株有)的引物一對(ME8-EM1)。用上述引物對F2植株個體進行擴增，獲得了與低濃度硝酸鹽性狀連鎖的穩(wěn)定的差

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