蕪菁花葉病毒CDN1株系植物表達載體構建和蕪菁花葉病毒CHN5株系cDNA克隆.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、蕪菁花葉病毒是十字花科作物上的一種重要病原物.該文在分析蕪菁花葉病毒NIa蛋白酶在多聚蛋白上識別位點基礎上,設計了新的編碼NIa蛋白酶識別位點的序列.同時根據蕪菁花葉病毒各株系基因組保守的非限制性內切酶識別位點,設計出多克隆位點序列.在此基礎上,將含有多克隆位點和編碼NIa蛋白酶識別位點的Adaptor通過PCR介導插入到蕪菁花葉病毒CDN1株系全長cDNA的NIb與CP區(qū)之間的NIa蛋白酶識別位點之后,將蕪菁花葉病毒CDN1株系全長c

2、DNA侵染性克隆pVIR95T改造成一個可利用的基因插入型表達載體pVIR95TM.利用DNA合成和PCR的方法得到人α-降鈣素基因相關肽的編碼序列DNA,將這段DNA插入到pVIR95TM載體的多克隆位點中,構建成在病毒寄主植物中表達人降鈣素基因相關肽的表達載體pVIR95TCa.根據蕪菁花葉病毒各株系保守序列,設計引物,利用免疫捕獲RT-PCR的方法獲得蕪菁花葉病毒CHN5株系覆蓋其全長基因組94﹪的長約9.4Kb的DNA片段,并克

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