兔糞堆肥控制參數(shù)研究及其微生物群落變化的PCR-DGGE分析.pdf

1、本試驗(yàn)采用主動(dòng)通風(fēng)方式，以兔糞和菌渣為原料進(jìn)行室內(nèi)高溫堆肥試驗(yàn)。設(shè)置了2個(gè)試驗(yàn)組和2個(gè)純兔糞對(duì)照組，在為期51d的堆肥過程中，研究了堆體溫度、含水率、pH、總有機(jī)碳、總氮、總磷、總鉀、種子發(fā)芽指數(shù)、細(xì)菌群落總數(shù)和大腸桿菌菌群數(shù)的變化規(guī)律及其影響因素。利用PCR-DGGE分子生物學(xué)方法研究了在堆肥高溫發(fā)酵過程中微生物群落結(jié)構(gòu)動(dòng)態(tài)及其變化規(guī)律，并分析了微生物群落結(jié)構(gòu)演替與理化指標(biāo)之間的關(guān)系，從而進(jìn)一步了解兔糞高溫發(fā)酵的作用機(jī)制。旨在為兔糞高

2、溫堆肥過程中的輔料選擇、配方確定以及控制各種影響因素等提供科學(xué)依據(jù)，從而探索一種兔糞無害化、減量化和資源化利用的高效實(shí)用的堆肥方法，為規(guī)?；脠?chǎng)兔糞堆肥處理提供技術(shù)儲(chǔ)備。試驗(yàn)結(jié)果表明：
　　 1、兔糞高溫堆肥生產(chǎn)中，利用兔糞和菌渣按2.6:1混合，初始水分控制在55％～60％，進(jìn)行堆肥能正常發(fā)酵，且能達(dá)到無害化處理的目的，在生產(chǎn)中可以此為參考對(duì)兔糞進(jìn)行堆肥生產(chǎn)有機(jī)肥料。
　　 2、在整個(gè)堆制過程中，兔糞菌渣混合堆肥和純兔

3、糞堆肥的TOC相對(duì)含量和C/N持續(xù)下降，TN相對(duì)含量則持續(xù)升高，TP、TK的絕對(duì)含量基本不變，這與其他畜禽糞便堆肥規(guī)律相似。細(xì)菌總數(shù)整體呈下降趨勢(shì)，純兔糞組下降趨勢(shì)不明顯；大腸桿菌在堆肥高溫期大部分死亡：在腐熟階段少量蘇醒繁殖。
　　 3、整個(gè)堆肥過程中，試驗(yàn)組和對(duì)照組的pH分別為8.70和8.73;C/N分別為22.53和17.86;隨著堆肥化的進(jìn)行抑制種子發(fā)芽的物質(zhì)被慢慢消除，在37天以后種子發(fā)芽指數(shù)全部達(dá)到0.8以上，以上

4、各指標(biāo)均基本符合國家堆肥腐熟的標(biāo)準(zhǔn)。
　　 4、利用PCR-DGGE技術(shù)對(duì)堆肥微生物的群落結(jié)構(gòu)進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)堆肥過程中微生物群落結(jié)構(gòu)的演替比較清楚。DGGE指紋圖譜顯示堆肥細(xì)菌的變化規(guī)律：“升高-降低-平穩(wěn)”，在高溫階段有比較豐富的優(yōu)勢(shì)細(xì)菌群落。
　　 5、在整個(gè)堆制期間，DGGE指紋圖譜多樣性與傳統(tǒng)培養(yǎng)細(xì)菌結(jié)果并不十分吻合；對(duì)照組的細(xì)菌多樣性指數(shù)平均為1.82，略高于試驗(yàn)組1.74，表明，對(duì)照組中細(xì)菌群落數(shù)多于試驗(yàn)組

5、，但其優(yōu)勢(shì)菌群不如試驗(yàn)組明顯；堆體中微生物主要來源于兔糞中的土著微生物，所以二者的DGGE條帶相似度在50％以上；兔糞高溫堆肥中細(xì)菌多樣性與堆體溫度變化趨勢(shì)相似而與C/N比變化趨相反。
　　 6、試驗(yàn)中對(duì)照組除pH值變化與試驗(yàn)組差異較大外，其它參數(shù)變化均與試驗(yàn)組趨于一致。50℃以上的高溫期能持續(xù)9天，大腸桿菌和GI值也符合堆肥腐熟的要求，TN、TP水平略高于試驗(yàn)組。說明生產(chǎn)中如調(diào)節(jié)好初始水分，采用被動(dòng)通風(fēng)堆肥方式，即可以利用兔糞