國家藥品審評中心

1、CDE SFDA,注射劑的無菌保證與工藝研究,國家食品藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心 黃曉龍2008.10,CDE SFDA,藥品管理法與藥品生產,2001年2月28日修訂的《藥品管理法》第十條，經修訂后明確要求：“藥品必須按照（原法規(guī)：工藝規(guī)程）國家藥品標準和國務院藥品監(jiān)督管理部門批準的生產工藝進行生產，…。改變影響藥品質量的生產工藝的，必須報原批準部門審核批準?！鄙a工藝的源頭：藥品研發(fā)中經工藝研究與驗證獲得的申報工藝,CDE

2、 SFDA,目 錄,一、注射劑的特點二、注射劑的無菌三、相關知識簡介四、注射劑的無菌保證工藝研究五、總結,CDE SFDA,一、注射劑的特點,不通過人體固有的保護屏障，直接進入血液起效快、安全性要求高。無菌嚴格控制熱原及雜質,CDE SFDA,二、注射劑的無菌,歷史的教訓：1970-1975年，美國因輸液污染導致敗血癥400多起，但問題產品全部通過了無菌檢查。2006年，安徽華源的“欣氟”事件：滅菌工藝與無菌檢查,C

3、DE SFDA,方法本身是否經過充分驗證——05版藥典的新要求。檢測結果有無代表性。 抽檢，樣本數一般為20/批。 樣本數、污染率及通過無菌檢查（取不到污染樣）的概率遵循二項式定律（泊松分布）,通過無菌檢查的概率P=(1-q)n式中：q為批產品污染率 n為樣本數,無菌檢查的局限性,CDE SFDA,計 算 實 例,假設當某批藥品的實際染菌率為5%時，如果根據通常取樣的數量為20支，則該批藥

4、品通過無菌檢查的概率 P=(1-q)n=（1-0.05）20 =0.359 即有35.9%的可能性，該批藥品將會被判定為無菌。,CDE SFDA,無菌檢查特性數據表,中國藥典現取樣數為：20，如污染率為5%，從曲線得，檢出概率為64%。,CDE SFDA,如何保證注射劑無菌合格呢？,CDE SFDA,質量控制的三種模式,檢驗控制質量（Quality by Test） 不夠全面生產控制質量（Quality

5、 by Manufacture） 將質控延伸到生產環(huán)節(jié)設計控制質量（Quality by Design，QbD） 全方位的控制、發(fā)展的方向三者互為補充，后者包括前者,CDE SFDA,保證注射劑無菌的措施,研究階段 研究設計出符合無菌要求的產品（包括合適的劑型、滅菌工藝、包裝材料）——前提與源頭生產階段 批產后應嚴格按照研究驗證后的工藝進行生產,CDE SFDA,三、相關知識簡介,D值（微生物的耐熱參數）：在

6、一定溫度下，將微生物殺滅90%所需的時間，以分鐘為單位。一般小于1分鐘。F0值：產品在121℃下的標準滅菌時間。滅菌率L：某溫度下滅菌1分鐘所對應的F0值。,CDE SFDA,Z=10℃時，不同溫度下的滅菌率和所相當的滅菌時間,CDE SFDA,濕熱滅菌法：將物品置于滅菌柜內利用高壓飽和蒸汽、過熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋白質、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法。濕熱滅菌法通常分為過度殺滅法和殘存概率法兩種。,CDE SFDA,過

7、度殺滅法,F0不低于12適用于熱穩(wěn)定性好的產品以徹底殺滅任何污染的微生物為實現無菌的手段無菌保證值不小于6,CDE SFDA,殘存概率法,滅菌過程8≤ F0<12分鐘適用于熱穩(wěn)定性不很好的產品通過控制工藝過程的微生物污染和滅菌工藝參數使產品無菌無菌保證值不小于6,CDE SFDA,其它濕熱滅菌工藝,F0值低于8的滅菌工藝熱穩(wěn)定性很差的產品以無菌生產工藝為基礎，滅菌是提高無菌保證水平的輔助手段不計算F0值，污染概率

8、不大于0.1%除血液制品外，發(fā)達國家的大容量注射劑很少采用此類工藝小容量注射劑也較少采用,CDE SFDA,SAL （無菌保證水平） ：產品經滅菌后微生物殘存概率的負對數。國際上規(guī)定，濕熱滅菌法的SAL不得低于6。 SAL ＝ F0/D121–lgN0 N0：滅菌前的染菌量 SAL除了和F0 有關，還與染菌量（N0）及所染菌的耐熱參數（D121）有關。,CDE SFDA,F0和SAL的關系： F0=8

9、 N0=100 SAL＝ 8/1–lg100 =6 D121=1時 注意：污染菌在不同的產品中的耐熱性可能不同，故驗證時應采用實際的藥液。 eg: 嗜熱脂肪芽孢桿菌（常規(guī)D值在1.5-3.0分鐘）在復方氨基酸注射液中的D值為0.8分鐘左右，在30％的葡萄糖溶液中的D值為2.2分鐘。,,CDE SFDA,無菌保證水平應用實例1,假定N0為100cfu/瓶，D值為1分鐘，要達到SAL不小于6，滅菌F0值應

10、達到多少？相當于115 ℃下滅菌多少分鐘？F0=（SAL＋lgN0）×D =（6+ lg100）×1= 8分鐘。換算成115 ℃下的F0 /L115=8/0.25=32分鐘。殘存概率法有效的基礎： N0≤100， D ≤1。,CDE SFDA,某輸液采用110℃，30分鐘的滅菌程序，起始污染微生物仍為100cfu/瓶，D值為0.5分鐘，經計算此時的無菌保證值和殘存微生物污染的概率為：SAL= F0/D - l

11、gN0 = L110×t /D - lg100 = 0.08×30/0.5-2 = 2.8殘存微生物的概率為10-2.8＝0.158％通過無菌檢查的概率為(1-0.158％)20=96.9%。無菌檢查的結果不能保證產品的SAL符合要求（ ≤6）。,無菌保證水平應用實例2,CDE SFDA,四、注射劑的無菌保證工藝研究,滅菌和化學指標的平衡點？,CDE SFDA,工藝選擇的考慮要點,無菌產品必須達到規(guī)定的無菌保證

12、水平。不得以理化性質等硬指標來壓無菌的軟指標?？勺罱K滅菌產品一定要首選最終滅菌方式，以保證產品的無菌特性。無菌制造工藝的基本特征是：低安全+高成本。應盡可能避免采用。當滅菌可能會造成副產物等問題時，盡可能從工藝上創(chuàng)造條件，使滅菌成為可行。,CDE SFDA,國食藥監(jiān)注[2008]7號通知,08年1月10日國家局發(fā)布了化學藥品注射劑基本技術要求。國家局已受理但尚未批準注冊的化學藥品注射劑應參照《技術要求》進行研究。已經批準注冊的

13、化學藥品注射劑也應參照《技術要求》進行相關研究（完善滅菌工藝等），并在申報再注冊時提供相關研究資料。,CDE SFDA,劑型選擇的合理性,要權衡考慮各劑型的無菌保證水平、雜質的控制水平、工藝的可行性、臨床使用的方便等。首先要考慮被選劑型可采用的滅菌工藝的無菌保證水平的高低。原則上首選劑型應能采用終端滅菌工藝，并保證SAL不小于6。對于有充分的依據證明不適宜采用終端滅菌工藝且臨床必需注射給藥的品種，可考慮選擇采用無菌生產工藝的劑型。通

14、常無菌生產工藝僅限于粉針劑或部分小容量注射劑。,CDE SFDA,輸液產品滅菌工藝的選擇原則,應采取終端滅菌工藝，建議首選過度殺滅法（F0≥12）。例如：氯化鈉大輸液。如產品不能耐受，可采用殘存概率法(8≤F0<12)，但均應保證產品滅菌后的SAL不小于6。采用其它F0值小于8的終端滅菌條件的工藝，原則上不予認可。如產品不能耐受終端滅菌工藝條件，應盡量優(yōu)化處方工藝，以改善制劑的耐熱性。如確實無法耐受，則應考慮選擇其他劑型，而非大

15、容量注射劑。,CDE SFDA,工藝驗證要求,主要包括以下試驗：滅菌前微生物污染水平測定，包括滅菌前產品中的污染菌及其耐熱性；熱穿透試驗；微生物挑戰(zhàn)試驗：生物指示劑的耐熱性及數量應對滅菌工藝構成必要的挑戰(zhàn)。過度殺滅法（F0≥12）不要求此項驗證,CDE SFDA,粉針劑的工藝與驗證,粉針劑的無菌保證水平應能保證SAL不大于10-3。常規(guī)的工藝驗證試驗包括：培養(yǎng)基模擬灌裝試驗：至少在線灌裝三批，每批的批量詳見附表，每瓶產品均應進

16、行無菌檢查。除菌過濾系統(tǒng)適應性驗證：包括過濾系統(tǒng)相容性測試、過濾前后濾膜完整性測試，必要時尚需進行濾膜的微生物截留量測試。,CDE SFDA,附表：培養(yǎng)基灌裝試驗的批量與判斷合格的標準,CDE SFDA,小容量注射劑的工藝與驗證,應首選終端滅菌工藝，相關技術要求同大容量注射劑。如有充分的依據證明不能采用終端滅菌工藝，且為臨床必需注射給藥的品種，可考慮采用無菌生產工藝，相關技術要求同凍干粉針劑。,CDE SFDA,歐盟1999年8月正

17、式開始執(zhí)行滅菌方法選擇的決策樹決策樹的作用是在考慮各種復雜因素的情況下，輔助選擇最佳的滅菌方法,歐盟滅菌方法選擇的決策樹,CDE SFDA,CDE SFDA,決策樹越往下，風險越大需要提供的研究與驗證的證據也越多,CDE SFDA,工藝選擇的基本原則:無菌產品應在灌裝到最終容器后進行最終滅菌（首選）如因產品對熱不穩(wěn)定不能進行最終滅菌時，可采用最終滅菌方法的替代方法--過濾除菌和/或無菌生產工藝（退而求其次）,CDE SFDA,四