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文檔簡介
1、苯酚是重要的有機化工原料,下游產(chǎn)品涉及眾多領域,在工業(yè)上用途很廣,但對環(huán)境造成的污染極其嚴重。本研究以多刺裸腹溞(Moina macrocopa)為實驗材料,在對其外部形態(tài)結(jié)構(gòu)和營養(yǎng)成分進行觀察分析的基礎上,研究了苯酚脅迫下裸腹溞腸道微絨毛形態(tài)、消化酶活力、脂肪代謝以及氨基酸組成的變化,旨在探討裸腹溞中毒后消化機能的變化及適應機制,為苯酚的致毒機制提供科學依據(jù)。
實驗在掃描電鏡下對多刺裸腹溞外部形態(tài)結(jié)構(gòu)進行了詳細觀察,并運用生
2、化方法測定了其營養(yǎng)成分,包括一般生化組成和氨基酸組成。采用急性毒性實驗方法,設空白對照組和5個苯酚染毒組(0.25、0.75、1.25、1.75和2.25mg/L)。采用組織學方法和電鏡技術,對苯酚(0.25、1.25和2.25mg/L)處理48h的腸道顯微和亞顯微結(jié)構(gòu)進行了觀察。并且分別在苯酚處理24h和48h用分光光度法測定了消化酶活力、脂肪代謝相關指標,其中消化酶活力包括淀粉酶(Amylase)、脂肪酶(Lypase)、胰蛋白酶(
3、Trypsinase)和蛋白酶(Protease)活力;脂肪代謝指標包括游離脂肪酸(FFA)含量、甘油三酯(TG)含量和脂蛋白脂酶(LPL)活力。運用液相色譜法測定了0.25、1.25和2.25mg/L苯酚處理48h氨基酸組成。結(jié)果顯示:
(1)多刺裸腹溞雌體呈卵形,通體透明。100g多刺裸腹溞濕樣中水分、粗蛋白、粗脂肪和灰分含量分別是90.92、6.38、1.11g和0.67g。多刺裸腹溞17種氨基酸占蛋白含量的54.44%
4、,實驗未檢測出色氨酸。
(2)光鏡下,經(jīng)苯酚處理的多刺裸腹溞,紋狀緣由光滑變?yōu)榇植?,甚至脫落。電鏡下可以清晰地觀察到,低濃度苯酚處理的裸腹溞,腸道上皮細胞排列出現(xiàn)輕微不整齊。中濃度苯酚處理后,微絨毛出現(xiàn)部分脫落和斷裂,排列稀疏。而經(jīng)高濃度苯酚處理的裸腹溞,腸道微絨毛排列零亂、間隙加大、形狀不規(guī)則。隨著苯酚濃度的增加,裸腹溞腸道上皮細胞和微絨毛受損程度明顯加劇。
(3)隨著苯酚濃度的增加和處理時間的延長,淀粉酶、脂肪酶
5、、胰蛋白酶和蛋白酶四種消化酶活力表現(xiàn)出不同的變化趨勢,其中苯酚脅迫對淀粉酶活力無顯著影響;脂肪酶活力在苯酚0.25和0.75mg/L處理24h后較對照組顯著(P<0.05)上升;胰蛋白酶活力在24h和48h均有濃度組出現(xiàn)顯著變化,0.75mg/L濃度組處理48h時顯著升高(P<0.05);蛋白酶活力在苯酚脅迫下,隨著濃度的增加,呈現(xiàn)先升后降的趨勢,0.75mg/L濃度組處理48h時達到最大值(P<0.01)。
(4)隨著苯酚濃
6、度的增加,游離脂肪酸和甘油三酯含量均呈現(xiàn)逐漸下降趨勢(P<0.05);脂蛋白脂酶活力分別在24h、0.75mg/L濃度組和48h、1.25mg/L濃度組達到最高值后逐漸降低。另外,還對低(0.25mg/L)、中(1.25mg/L)、高(2.25mg/L)濃度處理48h后體內(nèi)氨基酸組成進行了測定,其中有個別氨基酸與對照有顯著變化,但總含量與對照無顯著差異。
結(jié)論:
(1)多刺裸腹溞作為太原地區(qū)常見種,蛋白含量較高,在對
7、其進行營養(yǎng)強化后可完全滿足魚蝦蟹類生長需要,是優(yōu)良的生物活體餌料。
(2)中腸是多刺裸腹溞消化吸收的主要部位,苯酚暴露對腸道微絨毛造成不可逆的損傷,進而影響了裸腹溞消化功能,對生長造成不利影響。
(3)苯酚脅迫下,多刺裸腹溞同化作用受到抑制;裸腹溞通過加強消化體內(nèi)殘留食物的能力,以產(chǎn)出更多的能量維持正常代謝。消化酶活性可作為裸腹溞中毒的潛在的生化指標。
(4)脂肪代謝紊亂勢必影響裸腹溞能量代謝,使其生長繁殖
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