激光誘變選育果膠酶高產菌株

1、,,激光誘變選育果膠酶高產菌株,,一、實驗目的1.了解果膠酶的應用領域。2.學習菌種的物理因素誘變育種基本技術。3.通過激光誘變技術篩選出高產果膠酶的菌株。二、實驗設計簡介 以腐爛的蘋果、橘子、柚子和山楂等水果為材料，分離篩選出一株產果膠酶的高產菌株，采用波長632.8 nm，功率為11.5 mw的He-Ne激光對其進行誘變，結果得到果膠酶產生時間早、活性強的優(yōu)良菌株。有望用于果膠酶的生產。,實驗設計背景介紹,一、背景

2、簡介果膠酶(Pectinase)是指分解果膠類物質的多種酶的總稱，在食品加工、飼料加工、造紙、環(huán)境保護和誘導植物抗病等方面都有很大的應用價值。果膠酶可源于動物、植物和微生物。但動植物來源的果膠酶產量低且提取困難，不能滿足生產的需要，而微生物則因其生長快速等特點成為果膠酶的主要來源。自然界產果膠酶的菌株很多，,據報道已有40多種，主要有曲霉屬(Aspergillus）、青霉屬(Penicillinum)、側孢酶屬(Sporotrichu

3、m)、克魯維酵母屬(Kluyveromyces)及某些兼性厭氧細菌等。這些微生物所產果膠酶的活力大小各不相同，篩選果膠酶高產菌株，仍是目前亟待研究的課題。本文應用選擇培養(yǎng)基分離、純化產果膠酶菌株，通過激光誘變，篩選出酶活力高而且穩(wěn)定的產果膠酶菌株，為今后的進一步研究應用奠定了基礎。,果膠酶的應用,一、食品行業(yè)的應用果膠酶與葡萄酒,法國干邑白蘭地,巴塞羅那玫瑰紅,南非席拉,主要內容,果膠酶的簡介影響果膠酶作用的主要因素果膠酶在葡萄酒

4、釀造中的運用葡萄酒的功能,果膠酶簡介,果膠酶是現代葡萄酒釀造中的重要輔料，大 多數是由黑曲酶 (Aspergillus 11增OT)經特殊工藝制成的液體果膠酶或固體果膠酶。葡萄釀酒中常用的果膠酶通常是復合果 膠酶，含有果膠裂解酶，果膠酯酶和聚半乳糖醛酸酯酶(Polygalacturonases，PG)等。,影響果膠酶作用的主要因素,一.葡萄狀態(tài)和處理手段對果膠酶作用的影響：(1)不同葡萄品種所含果膠種類和數量會有所差異，如玫瑰香葡萄

5、的果膠含量顯著高于霞多麗葡萄 ，因此前者比后者澄清難度更大 。 (2)即使是相同葡萄品種，因為成熟度和地理環(huán)境的不同，果膠 酶 的處 理 效果也會有所差異。例如同樣是赤霞珠，采用果膠酶處理后，產于炎熱智利美寶谷的酒樣，其色度較對照組提高比例高于相同處理的法國波爾多酒樣。(3)受灰綠葡萄孢霉菌侵染的葡萄，在侵染后所釋放出的大量葡聚糖會加大果 膠酶澄清難度。,(4)在萄前處理和發(fā)酵過程中，由于采摘方式 、果實運輸、除梗率、壓榨技術和浸漬

6、強度的不同,葡萄受到的損壞程度也有所不同。 二.處理介質環(huán)境對果膠酶作用效果的影響 :（1）溫度對果膠酶活性的影響很大，從圖中可以看出該果膠 酶活性的理想溫度為45℃，但對葡萄酒釀造而言，此溫度是不適宜的。通常葡萄酒釀造的理想溫度為 1 4～3 2℃之 間 ，而白葡萄酒的發(fā)酵 溫 度更 低 (1 4～20℃之間)，這對果膠酶的活性影響很大。通常在低溫條件下會產生兩個結果 ：一是 葡萄汁的粘度增加會降低固體物質的沉降速度；二是果膠

7、酶活性下降。,（2）對大部分果膠酶而言 ，最理想的pH值是4．5左右 (圖6)，而這個pH值在葡萄汁中基本不可能出現 。通常,果膠 酶作用葡萄汁或酒 的pH值 介于2.9～3.5之間.不同的pH值 ，對果膠酶活性的影 響很 大 (圖6)。如果pH值過低 (~HpH<3.2)， 果膠酶的活性會下降 ，應通過增加果膠酶用量 ,來達到最佳處理效果。特別提 示 ，針對pH高3.6～3.7的葡萄酒 ，果膠酶的活性顯著增強，但 在實踐中卻會由

8、于靜電現象而導致沉降困難。,,,,,,果膠酶的作用,澄清葡萄汁和葡萄酒，提高葡萄汁和葡萄酒的過濾通透性 浸提葡萄中的有益多酚物質,,通常，葡萄中含有的大量果膠會導致澄清困難、出汁率低、 過濾效率低下等 問題 。同時 ，在浸漬過程 中，這些存在于葡萄皮和果 肉中的大量果膠會阻礙色素和單寧的浸提、溶解和穩(wěn)定，從而增加了葡萄酒釀造的難度?；谏鲜鲈?因，采用果膠酶處理過量果膠是非常必要的 。當在適當工藝階段添加果膠酶 (如超濃縮果膠酶HC

9、)后 ，果膠將被較為徹底地分解，使得葡萄汁澄清和過濾更為容易，同時大大提升了出汁率，從而提高 自流酒產量。,,在傳統浸漬工藝過程中，細胞內的有益多酚物質 (如色素、單寧等)在向外擴散的過程 中會被細胞壁所阻礙。在此情況下使用浸漬果膠酶，一方面可加速色素和單寧的浸漬溶解，例如1999—2003年對法國波爾多赤霞珠葡萄酒的研究發(fā)現，當葡萄成熟度不佳時 ，運用果膠酶EX-V可迅速提高葡萄酒色素和單寧的浸提效果 另一方面還可提

10、高色素和單寧的穩(wěn)定性 ，同樣在1999到2003年對法國波爾多赤霞珠葡萄酒的研究中，研究人員對比了浸漬階段使用果膠酶和未使用果膠酶酒樣連續(xù)5年內的顏色、花青素和單寧的變化情況 ，發(fā)現使用EX—V處理的酒樣 ，其顏色、花青素和單寧的穩(wěn)定性都得了很大提高。,葡萄酒的功能,保健作用：增進食欲，滋補、助消化、利尿、減肥、美容和殺菌預防疾病功能：心血管病、腦血栓、腎結石、感冒和提高記憶力。,2、果汁制造和果酒釀造其應用主要集中在如下幾個方面：

11、(1)提高果汁出汁率，加速果汁澄清(2)制備混濁果蔬汁；(3)單細胞食品的制備，原果膠酶能作用于植物組織產生松散的單細胞。酶處理的果蔬組織所獲得的單細胞，細胞完整，各種營養(yǎng)成分保存完好，表面及內部的張力較小而易與牛奶、酸奶、冰淇淋、混合，且易被胃蛋白酶以及胰凝乳蛋白酶消化，適宜用作老人、嬰兒以及病人的食品；(4)果酒釀造時果汁的預處理,3、作為天然的防腐劑 果膠酶降解果膠而得到的果膠分解物對食品有很強的抗菌作用，特別是對

12、大腸桿菌有顯著的抑制增殖作用。20世紀90年代中期，果膠分解物作為天然防腐劑開發(fā)成功。目前，國外以果膠分解物為主要成分，配合其它天然防腐劑，已廣泛應用于酸菜、成魚、牛肉餅等食物 4、果實的脫皮 將含有纖維素酶和半纖維素酶的粗果膠酶制劑作用于果實皮層，能使皮層細胞分離，結構破壞而脫落。如柑桔囊衣、一蓮子的肉衣和人蒜的膜層經過粗果膠酶處理后，可以很快地脫落。,5、榨油果膠酶是一種細胞壁降解酶，

13、它可以用于植物油的榨取過程，如在橄欖油榨制時加入果膠酶可破壞起乳化作用的果膠提高油的收率，而且榨出的油貯存時也非常穩(wěn)定，多酚類物質和維生素含量也有所增加。,果膠酶在其他方面的應用在紡織和造紙工業(yè)中的應用：紡織產品的脫膠造紙業(yè)的生物制漿在生物技術領域中的應用：純化植物病毒DNA的提取制備植物細胞原生質體在醫(yī)藥行業(yè)中的應用：植物藥的提取治療胃結石,生物081李春林,飼料添加劑：,洗滌劑：,食品污垢往往難于從被污染的底物上

14、有效地去除。由水果和／或蔬菜汁形成的“干涸”污漬特別難于除去。加入含堿性果膠酶的洗滌劑，對這些污漬具有良好的去污性能。,堿性果膠酶與纖維素酶、半纖維素酶等配合，可降解植物細胞壁中果膠和纖維，促使淀粉、脂類、維生素和蛋白質等釋放出來，從而提高了飼料的營養(yǎng)價值；堿性果膠酶添加到飼料中可降低飼料的黏度，促進飼料在動物消化道內的消化吸收舊。,誘變方法物理方法紫外誘變微波誘變激光誘變離子束誘變化學方法復合因子誘變基因工程方法,激光

15、誘變激光輻射對微生物影響的是光、熱、壓力和電磁場效應的綜合應用，能夠引起細胞DNA或RNA，質粒、染色體畸變效應，酶的激活或鈍化，以及細胞分裂和細胞代謝活動的改變。光量子對細胞內含物中的任何物質一旦發(fā)射功能作用都可能導致生物有機體在細胞學和遺傳學特性上發(fā)生變異，不同種類的激光輻射生物有機體，所表現出的細胞學和遺傳學變化也不同。激光以其高亮度、高方向性、高相干性以及單色性，在微生物育種領域已得到廣泛應用。而且，不同種類的激光輻照微生物，

16、所表現出的細胞學和遺傳學變化也不同，這也給微生物的誘變育種提供了便利條件。,果膠酶的分析方法進行果膠酶的研究需要有可靠的酶分析定量方法，常用的果膠酶定性定量分析辦法：(1)透明圈法 根據果膠降解物在高碘酸中的溶解性有差別來定性判斷果膠酶是否存在的一種方法。由于大分子聚合物不溶于酸，果膠酶降解的小分子溶于酸從而在瓊脂培養(yǎng)摹板上形成透明圈。基本方法是：用果膠酶底物、緩沖液、淀粉和瓊脂配成溶液鋪板，然后加入少量的酶液，注入

17、一點，反應一段時間后，,加入高碘酸，如果該酶有活性，注入酶的點將出現透明圈。下一步，可以傾出高碘酸溶液，加入砷酸鈉溶液，根據淀粉與碘的顏色反應，更易清楚的判明透明圈的存在。該方法對于果膠酶產生菌的篩選是方便的，而且可以變換底物及pH等區(qū)別不同種類的果膠酶。本研究所用的剛果紅染色法是透明圈法的一種改良方法，主要原理是剛果紅染料可與多糖水解物形成有濃郁色澤的復合物，在果膠為唯一炭源的培養(yǎng)基中如果培養(yǎng)物具有產果膠的能力，就可以形成明顯的絳紅色

18、水解圈。這一方法效果良好且果膠用量很少、成本低，是一種較好的篩選方法。,（2）次碘酸鈉法（滴定法）1.果膠酶的測定原理 果膠酶水解果膠，生成半乳糖醛酸，后者具有還原性醛基，可用次亞碘酸法進行定量測定，所生成半乳糖醛酸的量可用于表示果膠酶的活力。,酶解反應： 果膠,,半乳糖醛酸 (C6H10O7 ),,果膠酶,,含游離醛基的糖于堿性溶液中，在碘的作用下被氧化成相應的一元酸。,,過量的碘和氫氧根離子生成次碘酸根離子，當溶液呈

19、酸性時，碘析出。,用硫代硫酸鈉滴定剩余的碘量，計算出醛基氧化時所消耗的碘量。,材料： (1) 1%果膠溶液：稱量0.1 g果膠粉，加熱水溶解，煮沸，冷卻后過濾，定 容至10 ml (2) 配制0.1mol／L檸檬酸—檸檬酸鈉緩沖液(pH＝3.5) 甲液 稱取檸檬酸1.05g,用水溶解并定容至50mL；乙液稱取檸檬酸三鈉1.47g ,用水溶解并定容至50mL ；甲乙兩液以7：3的比例混勻, 調pH至3. 5 (3)

20、0.1 mol/L碘溶液：稱量碘化鉀1 g，溶于0.8 ml水中，另取碘0.508 g 溶于碘化鉀溶液中，待全部溶化后定容至40ml (4) 果膠酶溶液：取0.1g果膠酶用10 ml檸檬酸—檸檬酸鈉緩沖液溶解 (5) 0.025 mol/L硫代硫酸鈉溶液：0.62g固體定容至100ml ，稀釋20倍 (6) 1 mol/L碳酸鈉溶液，0.53g Na2CO3固體定容至5ml (7) 2 mol/L 硫酸，取5.6ml

21、硫酸溶液緩慢加到94.4ml水中,步驟1.果膠酶活力測定實驗步驟（1）量取1%果膠溶液10 ml，實驗組加入10 ml酶液，對照組加入10 ml檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液。（2）在50℃水浴2 h，取出加熱煮沸1-2 min。（3）冷卻后，取5 ml反應液移入碘量瓶中，加1 mol/L碳酸鈉1ml，0.1 mol/L碘液5ml，搖勻，暗處放置20分鐘，加2 mol/L硫酸2ml，用

22、 0.025 mol／L硫代硫酸鈉滴定至淡黃色。（4）接著加0.5%淀粉指示劑1 ml，硫代硫酸鈉繼續(xù)滴定至藍色消失 為止，記下所消耗的硫代硫酸鈉ml數（A）。（5）空白對照取混合液 5 ml同樣進行滴定，記錄所消耗硫代酸鈉的 ml數（B）。,（6）計算 滿足上述條件下，每小時酶促催化果膠分解生成1 mg當量游離半乳糖醛酸定為一個酶活力單位，其中半乳糖醛酸的

23、分子質量為194.14 。,？,本實驗中果膠酶的酶活為,,酶的活力= U/g(ml) 式中： 　A：樣品滴定所消耗硫代硫酸鈉的毫升數。 B：空白滴定所消耗硫代硫酸鈉的毫升數。 　N：硫代硫酸鈉摩爾濃度。 　0.5：1當量硫代硫酸鈉相當于0.5當量半乳糖醛酸。 　20：反應液總體積 　51：酶液體積以1ml計 52

24、：吸取反應液 　n：稀釋倍數 　W：酶粉重量g或酶液體積ml,（3）果膠酯酶測定方法（4）電泳轉移膠膜法（5）蘋果汁脫膠分析（6）黏度下降法（7）還原糖測定法（8）果膠裂解酶活性分析,毛霉與根霉最明顯的區(qū)別是根霉有假根，孢囊梗與假根相對長出，單根或成簇，毛霉沒有假根。曲霉孢囊梗末端膨大，青霉不膨大,果膠酶高產菌株的激光誘變選育原理,果膠酶的制取激光誘變育種的原理1.激光輻照生物效應的機理2.農業(yè)中激光誘變育種實例

25、出發(fā)菌株篩選原理He-Ne激光器的工作原理W-CJ-1F型單人雙面凈化器凝膠成像系統DYY-11型電腦三恒多用電泳儀電泳槽,果膠酶,果膠酶(Pectinase)是指分解果膠類物質的多種酶的總稱，在食品加工、飼料加工、造紙、環(huán)境保護和誘導植物抗病等方面都有很大的應用價值。果膠酶可源于動物、植物和微生物。但動植物來源的果膠酶產量低且提取困難，不能滿足生產的需要，而微生物則因其生長快速等特點成為果膠酶的主要來源。自然界產果膠酶的

26、菌株很多，據報道已有40多種，主要有曲霉屬(Aspergillus)、青霉(Penicillinum)、側孢酶屬(Sporotrichum)、克魯維酵母屬(Kluyveromyces)及某些兼性厭氧細菌等[2-4]。,,這些微生物所產果膠酶的活力大小各不相同，篩選果膠酶高產菌株，仍是目前亟待研究的課題。本文應用選擇培養(yǎng)基分離、純化產果膠酶菌株，通過激光誘變，篩選出1株酶活力高而且穩(wěn)定的產果膠酶菌株，為今后的進一步研究應用奠定了基礎。,激

27、光誘變育種原理,激光具有很高的功率密度，因而可以被應用于生物誘變育種研究和農業(yè)生產中。隨著現代科技的發(fā)展，許多物理技術已經應用到農業(yè)研究。自激光進入生物學研究領域，由此產生了一門新興科學——激光生物學，發(fā)展至今日，激光在生物學中的應用已經廣泛和深入，激光誘變育種已經滲透到農業(yè)相關研究的多個領域。,激光誘變育種原理,激光育種是激光生物學研究的一個重要分支，它是利用激光輻照生物體誘導其發(fā)生遺傳性變異，再根據育種目標進行選擇和培育新品種的誘

28、變育種技術。激光是一種由激光器發(fā)出的以受激輻射占主導地位的高亮度相干光束，發(fā)射的方向和頻率完全相同，能量也高度集中。激光在20世紀60年代之后被廣泛應用于人類生活的各個領域。盡管在農業(yè)領域的應用還處在探索階段，但是許多人都相信，這項技術在農業(yè)領域的應用前景是十分廣闊的。,一、激光輻照生物效應的機理,激光是一種高亮度的定向能束，是由原子或者分子受到激發(fā)而產生的被放大的一種相干光輻射。激光具有單色性、相干性、方向性以及高亮度的特性，即激光的

29、四大特性。激光單色性好，衡量光的單色性能是看光譜輻射能量集中的頻譜區(qū)間的寬窄。譜線寬度越窄，它的單色性就越好。在普通光源中，單色性最好的也不及激光的單色性。例如，特制發(fā)紅光（632.8nm)的He-Ne激光器，它的譜線寬度只有2×10-9nm。[1] 激光的相干性好，一束光的相干性好壞，一般用相干時間或者相干長度來衡量。,,一束光的相干時間或者相干長度越長，則它的相干性就越好。激光由于它的單色性好，所以它的相干長度很長。He-

30、Ne激光器輸出的光束（632.8nm)相干長度達200km。激光的方向性好，只有在光學諧振腔軸方向往返的光才能被放大，所以能夠得到沿軸方向傳播的、發(fā)散角很小的光束。（由于激光束口徑有一定大小，衍射效應會使得光束稍微發(fā)散）。激光具有很高的亮度。在激光發(fā)明前，人工光源中高壓脈沖氙燈的亮度最高，與太陽的亮度不相上下，而紅寶石激光器的激光亮度，能超過氙燈的幾百億倍。,,因為激光的亮度極高，所以能夠照亮遠距離的物體。由于激光方向性好，若與相同功率

31、的普通光源相比，激光的亮度遠遠要高出約107倍。 激光亮度極高的主要原因是定向發(fā)光。大量光子集中在一個極小的空間范圍內射出，能量密度自然極高。 激光四大特性的本質是激光具有很高的光子簡并度，也就是說激光可以在很大的相干體積內具有很高的相干光強。充分利用激光所具有的這些特性，可獲得極高的功率密度。這正是激光被應用于誘變育種研究的物理學基礎。,,激光輻照的生物效應機理是多類型的, 具體的生物效應由特定生物組織的性質以及激光參數決定。生物組織

32、的性質主要指光學特性(如反射、吸收及散射系數)和熱力學性質(如熱傳導和熱容量)。激光參數則主要有波長、輻照時間、能量劑量、輻照面積、能量密度和功率密度等。目前, 學術上比較一致的觀點認為, 激光輻照生物效應的機理大致有五種, 即激光加熱作用、光化學作用、機械壓力作用、激光電磁場作用以及激光生物刺激作用。,,[ 2]激光加熱作用引起酶失活、蛋白質變性, 導致生物的生理遺傳變異; 光致壓力作用使組織變形、破裂, 引起生理及遺傳變異; 光化作

33、用是通過一定波長的光子被吸收, 躍遷到一定能級, 引起生物分子的變異; 電磁場作用產生自由基導致DNA 損傷, 改變微觀結構, 引起遺傳突變。,二、農業(yè)中激光誘變育種實例,利用激光輻射可以選擇和培育農作物的優(yōu)良品種。激光誘變育種是以其他相關高科技成果為基礎逐步發(fā)展起來的，在微波育種、X射線育種、放射性同位素育種、中子育種等背景下出現的。早在20世紀60年代，科學家就發(fā)現，利用紅寶石激光照射胡蘿卜、蠶蟲等種子，可以有效提高其發(fā)芽率和出苗率

34、。,,20世紀90年代，俄羅斯科學家用波長441.6nm的藍色氦——鎘激光束照射種子兩個小時，3個小時后再用波長632.8nm、同等強度的紅色氦——氖激光束照射兩小時，使用這種小麥種子的小麥分蘗抽穗多，穗頭飽滿結實，平均每畝小麥可以提高產量60千克，蛋白質含量增加5％。,,我國試驗激光育種的植物品種包括水稻、小麥、大豆、玉米、谷子、蠶豆、油菜等200多種植物種子。激光輻照在林木和園藝育種研究方面也在不斷取得新的進展。小劑量激光輻照對生物

35、有刺激效應。由于激光輻照種子簡單易行, 效果明顯, 激光用于林木和園藝植物種子催芽研究的報道也比較多。研究已表明,激光輻照可以打破種子休眠狀態(tài), 提高種子活力, 改善形態(tài)結構, 激活生理代謝過程, 促進植株生長發(fā)育。,,吳俊林等用He- Ne激光(輸出功率為3. 8mW )輻射油松種子后再進行萌發(fā)試驗, 經低劑量He- Ne激光處理后, 比對照種子提前2􀀂 3天發(fā)芽, 發(fā)芽率提高39%, 活力指數提高67% , 生物

36、量提高20% [ 4 ] 。,,吳俊林等還在聚乙二醇( PEG6000 )模擬干旱脅迫條件下用He- Ne激光 (輸出功率10.2mW )以不同時間輻照油松種子, 萌發(fā)試驗表明, 在模擬干旱條件下, 激光輻照后油松種子的發(fā)芽率、活力指數、生物量分別提高32. 23% , 81. 19% 和46. 58%,萌發(fā)期油松種子幼苗保護酶系統的超氧化物酶( SOD )和過氧化氫酶( CAT)的活性顯著提高, 比對照提高28. 7% 和46

37、. 52% [ 5] 。,綜上,在農業(yè)生產中激光可被應用于誘變育種和基因改良，并有很大的發(fā)展空間。激光輻照育種的生物學誘變效應是由激光加熱作用、光致壓力作用、光化作用和光致電磁場作用等綜合作用的結果。從生物個體、細胞、亞細胞及分子等多個層面的基礎研究, 證實了激光輻照能引起生物遺傳性變異, 可以作為植物等育種的新誘變源。同時通過科學家研究的實例，從實踐層面證實了激光技術應用于誘變育種的有效性。激光為誘變育種和基因改良提供了一種實施性較強

38、的技術手段。,出發(fā)菌株篩選原理,自能夠產生胞外蛋白酶的菌株在牛奶平板上生長后，其菌落周圍可形成明顯的蛋白 水解圈。 ? 水解圈與菌落直徑的比值常被作為判斷該菌株蛋白酶產生能力的初篩依據。,,不同類型的蛋白酶都能在牛奶平板上形成蛋白水解圈，細菌在平板上的生長條件和液體環(huán)境中生長的情況相差很大，因此在平板上產圈能力強的菌株不一定就是堿性蛋白酶的高產菌株。,He-Ne激光器,氦氖激光器是研制成功的第一種氣體激光器，也

39、是最常用的一種，通常在可見光頻段（6328A）工作，其他還有1.1523μm及3.3913μm但不常用功率一般約為數毫瓦，連續(xù)發(fā)光。因為制造方便、便宜、可靠，所以使用較多。由于單色性好，相干長度可達數十米以至數百米。,原理,除自由電子激光器外，各種激光器的基本工作原理均相同，產生激光的必不可少的條件是粒子數反轉和增益大過損耗，所以裝置中必不可少的組成部分有激勵（或抽運）源、具有亞穩(wěn)態(tài)能級的工作介質兩個部分。激勵是工作介質吸收外來能量后激

40、發(fā)到激發(fā)態(tài)，為實現并維持粒子數反轉創(chuàng)造條件。激勵方式有光學激勵、電激勵、化學激勵和核能激勵等。工作介質具有亞穩(wěn)能級是使受激輻射占主導地位，從而實現光放大。激光器中常見的組成部分還有諧振腔，但諧振腔（ 見光學諧振腔）并非必不可少的組成部分，諧振腔可使腔內的光子有一致的頻率、相位和運行方向，從而使激光具有良好的方向性和相干性。而且，它可以很好地縮短工作物質的長度，還能通過改變諧振腔長度來調節(jié)所產生激光的模式（即選模），所以一般激光器都具有

41、諧振腔。,W-CJ-1F型單人雙面凈化器,一、工作原理 空氣經頂/后部的初效空氣過濾器和低噪音離心式通風機壓入靜壓箱，經高效空氣過濾器在上側部均勻吹出，形成高潔凈度的水平/垂直空氣幕，去除工作區(qū)域內的原自然空氣，開機后五分鐘即達到理想的高潔凈度空間。采用可調風機雙速調節(jié)風量大小，輕觸型開關調節(jié)電壓，保證工作區(qū)內的風速始終處于理想狀態(tài)。,,二、結構特點  箱體殼采用進口中纖板材緊密結合，保

42、證長期無銹蝕發(fā)生，面層電噴涂表面處理，表面光滑無塵，臺板敷設不銹鋼板，方便耐用。,,三、安裝使用 本工作臺就位地點應在環(huán)境較為清潔的工作室內（最好置于十萬等級或三十萬等級的初級凈化間），插上電源，按控制面板上的所示功能開啟即可，在開機前應對凈化臺的工作區(qū)面及外殼進行認真清潔處理，去除表面積塵，開機后十分鐘即可進行實施正常操作使用。,,四、維護 1、根據實際情況，定期將初效過濾器拆下清洗，清洗周期一般為3~6個月

43、。（若長期不清洗，積塵將導致進風量不足而降低潔凈效果）。2、當正常調換或清洗初效空氣過濾器后，仍不能達到理想的截面風速時，則應調節(jié)風機的工作電壓，從而達到理想的均勻風速。3、一般在使用十八個月后當風機工作電壓調整至最高點時，仍不能達到理想風速時，則說明高效空氣過濾器積塵過多（濾料上濾孔已基本被堵，要及時更新），一般高效空氣過濾器的使用期限為十八個月。4、更換高效空氣過濾器時，應注意型號規(guī)格尺寸的正確（原生產廠家配置），按箭頭風向裝

44、置，并注意過濾器的周邊密封，絕對無滲漏現象發(fā)生。,凝膠成像系統,定義：凝膠成像即對DNA/RNA/蛋白質等凝膠電泳不同染色（如eb、考馬氏亮藍、銀染、sybr green）及微孔板、平皿等非化學發(fā)光成像檢測分析。凝膠成像系統可以應用于分子量計算，密度掃描，密度定量， PCR定量等生物工程常規(guī)研究。,（一） 原理,樣品在電泳凝膠或者其他載體上的遷移率不一樣，以標準品或者其他的替代標準品相比較就會對未知樣品作一個定性分析。這個就是圖像分析系

45、統定性的基礎。根據未知樣品在圖譜中的位置可以對其作定性分析，就可以確定它的成份和性質。,,樣品對投射或者反射光有部分的吸收，從而照相所得到的圖像上面的樣品條帶的光密度就會有差異。光密度于樣品的濃度或者質量成線性關系。根據未知樣品的光密度，通過于已知濃度的樣品條帶的光密度指相比較就可以得到未知樣品的濃度或者質量。這就是圖像分析系統定量的基礎。采用最新技術的紫外透射光源和白光透射光源使光的分布更加均勻，最大限度的消除了光密度不均造成的對結果

46、的影響。,,（二） 應用總體上來說凝膠成像可應用于：凝膠成像系統可以用于：蛋白質、核酸、多肽、氨基酸、多聚氨基酸等其他生物分子的分離純化結果作定性分析。（1）分子量定量對于一般常用的DNA膠片,利用分子量定量功能,通過對膠上DNA Marker條帶的已知分子量注釋,自動生成擬合曲線,并以它衡量得到未知條帶的分子量。通過這種方法所得到的結果較肉眼觀察估計要準確很多。（2）密度定量一般常用的測定DNA(脫氧核糖核酸)和RNA(核糖

47、核酸)濃度的方法是紫外吸收法,但它只能測定樣品中的總核苷酸濃度,而不能區(qū)分各個長度片段的濃度。利用凝膠成像系統和軟件,先將DNA膠片上某,,一已知其DNA含量的標準條帶進行密度標定以后,可以方便的單擊其他未知條帶，根據與已知條帶的密度做比較，可以得到未知DNA的含量。此方法也適用于對PA GE蛋白膠條帶的濃度測定。（3）密度掃描在分子生物學和生物工程研究中,最常用到的是對蛋白表達產物占整個菌體蛋白的百分含量的計算。傳統的方法是利用專

48、用的密度掃描,但利用生物分析軟件結合現在實驗室常規(guī)配備的掃描儀或者直接用白光照射的凝膠成像就能完成此項工作。,,（4）PCR定量PCR定量主要是指，如果PCR實驗擴增出來的條帶不是一條，那么可以利用軟件計算出各個條帶占總體條帶的相對百分數。就此功能而言，與密度掃描類似，但實際在原理上并不相同。PCR定量是對選定的幾條帶進行相對密度定量并計算其占總和的百分數，密度掃描時并對選擇區(qū)域生成縱向掃描曲線圖并積分。,（三）種類,（1）普通凝膠

49、成像分析系統：可以對蛋白電泳凝膠，DNA凝膠樣品進行圖象采集并進行定性和定量分析，樣品包括：EB、SYBR Green、SYBR Gold、Texas Red、GelStar、Fluoroscecin、 Radiant Red等染色的核酸監(jiān)測；以及Coomassie Blue、SYPRO Orange、各種染色的蛋白質凝膠如考染等。（或UV,EB和有色及可見樣品成像）；（2）化學發(fā)光成像分析系統：成像范圍涵蓋UV,EB,化學發(fā)光、紫

50、外-熒光、有色及可見樣品成像；,,（3）多色熒光成像分析系統：成像范圍涵蓋UV,EB,化學發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像；（4）多功能活體成像分析系統：UV,EB,化學發(fā)光、多色熒光熒光、有色及可見樣品成像和離體組織和小型動物，及大型型動物。,DYY-11型電腦三恒多用電泳儀,DYY-11型電腦三恒多用電泳儀，電壓范圍：4-1000；電流范圍：4-500mA；功率范圍：4-300W。可同時運行4 個電泳槽，在工作狀態(tài)中，可以

51、實時微調；微電腦智能控制；超大液晶屏幕，同時顯示全部操作提示、設置參數、輸出狀態(tài)等；具備標準、定時、伏時和分步等多種編程工作方式。,電泳槽,電泳槽是凝膠電泳系統的核心部分，其系統的迅猛發(fā)展主要也是體現在電泳槽上。根據電泳的原理，凝膠都是放在兩個緩沖腔之間，電場通過凝膠連接兩個緩沖腔。緩沖液和凝膠之問的接觸可以是直接的液體接觸，也可以間接通過凝膠條或濾紙條。管狀凝膠電泳和垂直板狀電泳大多采取直接液體接觸方式。這種方式可以有效地使用電場，

52、但在裝置設計上有一些困難，如液體泄漏，電安全和操作麻煩等問題。水平板狀電泳槽大多通過間接方式，用濾紙橋搭接。以及最近使用緩沖液制作的凝膠條和濾紙條搭接，即半干技術，后種方式使裝置簡化，操作也大大方便。,材料:儀器和設備,1、He-Ne激光器,He-Ne激光器模式分析實驗裝置,,主要特點：特點：通過氦氖激光器的裝調、腔長的變換、激光的模式變化，培養(yǎng)學生實驗的動手能力；用最簡潔的方法測氦氖激光器的發(fā)散角，使用共焦球面掃描干涉儀，讓學生較直

53、觀的觀察縱模和橫模的頻譜分布，加深對物理概念的理解。注意1、He-Ne激光管陽極是針形電極一端，陰極是帶金屬套的一端，切不可接錯，否則管子由于陰極濺射會在短時間內毀壞。2、測量電壓、電流時，萬用表的檔位與接法必須保證無誤才能測量。3、眼睛不要直視激光。4、He-Ne激光器的陽帶有幾千伏的高壓，要注意安全。5、激光管為玻璃結構，易碎，特別是布氏窗結構，由多種玻璃構成，應避免受力和碰撞。,,氦氖激光器及電源：He-Ne氦氖激光器采用激

54、光管和激光電源分離的結構，輸出功率0.5-15mw，單模輸出，光束質量高。氦氖激光管可靠性高，工作壽命長，可廣泛用于生產和科研。主要特點：激光管和激光電源分離輸出功率多種可選隨機偏振或線偏振可選TEMoo單模輸出可靠性高，工作壽命上萬小時,另外也可以選擇543nm綠光和594nm黃光氦氖激光器,543nm綠光氦氖激光器,594nm黃光氦氖激光器,2、蘇州凈化單人雙面凈化工作臺SW-CJ-1F,產品性能：這是一種廣泛運用于生物

55、、制藥、化學實驗等領域，并提供無菌無塵環(huán)境的單人凈化工作臺。產品特點垂直流形，準閉合式臺面，可有效防止外部氣流透入及操作異味對人體的刺激。采用可調風量風機系統，接角型開關及無級調節(jié)電壓大小，保證工作區(qū)風速始終處于理想狀態(tài)。,,型號SW-CJ-1F單人雙面凈化工作潔凈度100級@≥0.5um(美聯邦209E)菌落數≤0.5個/皿.時(Φ90mm 培養(yǎng)平皿)平均風速0．25--0．45m/s(快．慢雙速)振動/半峰值

56、≤5μm(X.Y.Z方向)噪聲62dB(A)照度≥300Lx電源AC/50HZ/220V功耗0.4KW重量<150kg高效過濾器規(guī)格及數量860×550×38×①熒光燈/紫外燈規(guī)格及數量16×② 15W×②適用人數單人雙面外形尺寸(mm)1050×680×1600工作區(qū)尺寸 (mm)870×650×52

57、0,3、JD-801凝膠成像系統,捷達801系統凝膠電泳圖像分析系統是由圖像采集、圖像處理、數據分析、數據庫管理、報告生成、報告打印等組成。系統可通過紫外線分析設備，直接獲得各種核酸、蛋白電泳、點雜交、膜雜交圖像。具有操作快捷方便，易于掌握， 圖像與數據處理功能強大，自動化程度高的特點。有助于研究人員正確、迅速地得到凝膠電泳結果照片和數據分析結果。,4、DYY-11型電腦三恒多用電泳儀,DYY-11型電腦三恒多用電泳儀，電壓范圍：4-1

58、000；電流范圍：4-500mA；功率范圍：4-300W?？赏瑫r運行4 個電泳槽，在工作狀態(tài)中，可以實時微調；微電腦智能控制；超大液晶屏幕，同時顯示全部操作提示、設置參數、輸出狀態(tài)等；具備標準、定時、伏時和分步等多種編程工作方式。應用：用于DNA、RNA、蛋白質等物質的瓊脂糖凝膠、聚丙酰胺凝膠電泳。,5、Hoefermini VE電泳槽,miniVE它采用聚丙烯酰胺凝膠分離生物大分子，如蛋白、核酸等；進一步簡化灌膠、跑膠和印跡步驟，

59、卻不失優(yōu)質的實驗效果。miniVE功能全面、方便實用，是實驗室常規(guī)蛋白電泳和轉印操作的理想選擇！,,特點：1. 單元式設計，無瑣碎零件整個儀器沒有瑣碎的零件，僅包括4 個部分：凝膠模具、印跡模具、下層緩沖液槽和安全電源蓋。單元式設計，操作更簡便。2. 灌膠、跑膠同一模具，操作簡便獨特的凝膠模具，既是灌膠平臺，又是最終的跑膠裝置和電泳上槽。不需任何小部件，灌膠只需3 步便可完成，帶給您最方便快捷的實驗感受。3. 緩沖液用量少，經

60、濟實用革新的印跡模具，緩沖液量大大減少！即使同時進行。4塊凝膠轉印也只需300 ml緩沖液，最大程度地節(jié)約您的試劑消耗。,,4. 功能強大，亦可用于2-D 電泳miniVE能同時容納2個凝膠模具或2個印跡模具，即一次可以跑2塊凝膠或進行4塊凝膠的轉印。配合10×10.5 cm或10×8 cm的玻璃板，可跑8×9.5 cm或8×7的凝膠，9.5 cm膠的分離長度比傳統的7 cm膠長30%。兼容2

61、-D 電泳：可用于雙向電泳中第二向垂直電泳分離，一次可跑2根7 cm 的IPG干膠條，1.5小時即可完成。5. 電泳模具兼容轉印，“一物多用”電泳和轉印是同一個模具，無需額外購買轉印裝置，只需購買轉印三明治夾和海綿即可進行Western blot。轉印過程只需45 分鐘即可完成，方便快捷。6. 實現高通量灌膠選用Mighty Small 4-Gel灌膠模具一次最多灌制4塊凝膠，大大提高您的實驗效率。7. 零配件可單獨購買，維修

62、成本低灌膠模具的小配件均可單獨購買，極大地降低您的維修成本。,6、pH211意大利哈納HANNA pH211臺式酸度計,pH211和pH213可測pH值、溫度、離子濃度（ISE）和氧化還原電位（ORP）。 ＊微電腦處理器，測量精度高，重復性好。 ＊自動校準，自動溫度補償，操作簡單。 ＊大型液晶顯示、懸臂式電極支架、應用軟件使儀器使用非常方便。 ＊配制通用電極，滿足常規(guī)pH的測量。 ＊與哈納系列電極相配、應用更加廣泛。,7、霉

63、菌培養(yǎng)箱 MJ-160B,產品介紹 適用范圍 :該產品適用于醫(yī)藥,化工,環(huán)保,農業(yè)等行業(yè)生產,檢測和科研工作中用于各種微生物培養(yǎng)及孵化的專用設備,結構特點,該產品溫度控制采用集成運放線路,附LED顯示,并設有限溫裝置.控溫精度高,設范圍廣,溫度調節(jié)方便,示值準確直觀,性能優(yōu)越可靠.工作室作用優(yōu)質冷軋鋼板或不銹鋼制成,可供用戶選用,工作室內裝有殺菌燈,便于箱內滅菌.外箱表面施以噴塑處理,整機造型美觀大方,使用維修方便. ◎具有冷熱自

64、動控制功能. ◎外門采用磁性門封,密封性好,關閉方便,外門 開有觀察窗,可直接觀察工作室內的培養(yǎng)物情況 ◎工作室采用優(yōu)質冷軋鋼板或不銹鋼板的制成 ◎工作室內裝有風機形成強制對流,便工作室內平均溫度更好 ◎工作室內裝有殺菌燈,便于工作室內滅菌 ◎箱體表面噴塑處理,整機造型美觀大方,使用維修方便 ◎溫度控制采用集成運放線路,LED數字顯示,控溫精確可靠 MJ-Ⅱ型還有加濕功能,加濕范圍50-90RH(以溫度而定),溫 度自

65、動控制,LED數字顯示,,公稱容積：150L控溫范圍：4℃-60℃溫度分辨率：0.1℃ 溫度波動：±0.5℃溫度均勻度：±1℃額定功率（KW）：0.40電壓/電源：220V±10%/50HZ+2%工作室尺寸（cm）：42×41×88外形尺寸（cm）：51×59×135包裝尺寸（cm）：61×70×149凈重/毛重（Kg）： 60

66、/75,8、722S型可見分光光度計,,722S型可見分光光度計是繼721、722型分光光度計之后又一代最新設計的產品，曾獲得BCEIA金獎的通用分光，被國內外專家盛贊為“高科技與經濟高度結合的產品”。,特點：,◆具有更寬廣的光譜范圍，包含了現代比色分析與生化及酶分析常用的340nm～400nm近紫外段和800nm～1000nm的近紅外段，特別適合分析化學工作者應用?！袅骶€型外形，玲巧的體積、美觀及耐化學溶劑的國際流行漆，分外適合現代

67、實驗室環(huán)境?！敉ㄟ^RS232C接口，可聯接計算機、打印機等外圍設備，使用可選的軟件包作進一步擴展?！翩I盤操作簡單明了，可方便實現自動調0%（τ），自動調100%（τ）及無誤差τ/A變換，有因子設定和濃度設定式濃度直讀功能?！纛A調整光源、模塊單元化設計，為用戶維修和模快式維修提供最大方便?！粽w鋁合金壓力鑄造基座、鏡座和全息光柵、C-T式單色器、非球面鏡光學系統，將為你帶來穩(wěn)定的性能、經久可靠的質量?！暨M口的一體化先進固體硅接收

68、器，V/F變換和微處理器件，使儀器能長期保持精確線性測定和最佳線性。,,主要技術指標：◆波長范圍；340nm～1000nm◆波長最大允許誤差：±2nm◆波長重復性；≤1nm◆光譜帶寬：6nm◆透射比范圍：0.0（T）～199.9%（T）◆吸光度范圍：-0.3（A）～2.999（A）◆濃度顯示范圍: 0～9999（C）◆透射比最大允許誤差：±0.5%（T）◆透射比重復性；±0.3%（T）◆

69、雜散光：≤0.5%（T）(在360nm處，以NaNO2測定),培養(yǎng)基:1、PDA培養(yǎng)基,PDA培養(yǎng)基是人們對馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基的簡稱。宜于微生物生長發(fā)育、節(jié)省原料等特點及用途一種常用的培養(yǎng)基，宜培養(yǎng)酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌。,按物理性狀劃分：固體培養(yǎng)基 按培養(yǎng)基成分劃分：半合成培養(yǎng)基配方馬鈴薯 200克 葡萄糖 20克瓊脂 15~20克 自來水 1000毫升自然PH,,配制步驟:做法是先洗凈去皮,再稱取200g馬鈴薯