甲烷利用菌的研究及熒光法表征.pdf

1、第一章:概述了甲烷利用菌的概念及其分類，闡明了單加氧酶的作用機理，較為詳細地綜述了國內外甲烷利用菌的研究進展，并對其發(fā)展趨勢進行了展望。
　　第二章:以假單胞菌ME16和克雷伯氏菌ME17為模型菌株，為增強這兩種菌株利用甲烷的能力，采用比濁法考察了影響其生長的主要因素，包括:培養(yǎng)溫度、接種量、甲烷含量和培養(yǎng)基pH值。實驗過程中發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)溫度、接種量和甲烷含量三因素對以上兩菌株生長能力的影響比較顯著，在此基礎上，利用響應曲面實驗設計(

2、Response Surface Methodology，RSM)確定了兩菌株的最佳培養(yǎng)條件。結果表明，假單胞菌ME16的最佳培養(yǎng)條件為:溫度25.0℃，接種量2.00％，甲烷含量為10.0％;克雷伯氏菌ME17:溫度22.5℃，接種量9.85％，甲烷含量24.5％。第三章:針對微生物學鑒別和表征細菌的復雜性，提出了基于內源熒光法鑒別和表征細菌的新方法。本文用二維熒光法考察了甲基桿菌，假單胞菌和克雷伯氏菌中氨基酸的峰位和強度。由于細菌是

3、復雜的微生物體系，用二維熒光法考察細菌的內源物質有可能會有譜峰的重疊，在此基礎上采用三維熒光指紋圖譜全面地考察了三種菌內部的物質組成，并利用熒光法與化學計量學主成分分析(PCA)法相結合更深入地探討了三種菌的鑒別和表征。結果表明，在250nm激發(fā)下，氨基酸在340和450nm處有不同的熒光強度;甲基桿菌和克雷伯氏菌在ex:335nm，em:410nm處顯示出相同的指紋，但兩處指紋的熒光強度有較大差異，而假單胞菌在ex:335nm，em:

4、412nm和ex:400nm，em:465nm兩處顯示出指紋圖譜，據此可將三種菌進行初步的鑒定。
　　第四章:微生物生長繁殖和產物合成中需要無機鹽和微量元素作為其生理物質的組成或生理活性的調節(jié)物。隨著金屬離子的增加，菌體自身的內源熒光物質會發(fā)生相應的變化?；诖吮疚目疾炝藘煞N堿金屬離子Ca2+和Mg2+、一種堿土金屬離子Al3+和六種過渡金屬離子Fe3+，F(xiàn)e2+，Mn2+，Ni2+，Zn2+，Cu2+對甲基桿菌菌株ME25生長代

5、謝及合成色氨酸的影響，在此基礎上進一步考察了影響顯著的Fe3+，Ca2+，Ni2+對ME25的具體作用，并用正交實驗設計探索了這三種離子對ME25的復合作用。結果表明:9種金屬離子對甲基桿菌菌株ME25的促進作用為:Ni2+＞Fe2+＞Fe3+≈Ca2+＞Al3+＞Cu2+＞Mg2+≈Mn2+≈Zn2+。當Fe3+濃度為6mmol/L和5mmol/L時可分別促進ME25的生長和合成內源熒光物質色氨酸;當Ca2+濃度為1mmol/L和2m