藥物分析hplc

1、2024/3/10,一、液相色譜儀器 high performance liquid chromatograph,2024/3/10,液相色譜儀（2）,2024/3/10,液相色譜儀（3）,2024/3/10,液相色譜儀（4）,2024/3/10,二、高效液相色譜法的特點(diǎn) feature of HPLC,特點(diǎn)：高壓、高效、高速 高沸點(diǎn)、熱不穩(wěn)定有機(jī)及生化試樣的高效分離分析方法。,2024/3/10,三、流程及主要部件

2、process and main assembly of HPLC,1.流程,2024/3/10,2.主要部件,(1) 高壓輸液泵主要部件之一，壓力：150～350×105 Pa。為了獲得高柱效而使用粒度很小的固定相（<10μm），液體的流動(dòng)相高速通過時(shí)，將產(chǎn)生很高的壓力，因此高壓、高速是高效液相色譜的特點(diǎn)之一。應(yīng)具有壓力平穩(wěn)、脈沖小、流量穩(wěn)定可調(diào)、耐腐蝕等特性,（動(dòng)畫）,2024/3/10,(2)梯度淋洗裝置,外

3、梯度: 利用兩臺(tái)高壓輸液泵，將兩種不同極性的溶劑按一定的比例送入梯度混合室，混合后進(jìn)入色譜柱。,內(nèi)梯度: 一臺(tái)高壓泵, 通過比例調(diào)節(jié)閥,將兩種或多種不同極性的溶劑按一定的比例抽入高壓泵中混合。,2024/3/10,(3) 進(jìn)樣裝置,流路中為高壓力工作狀態(tài)， 通常使用耐高壓的六通閥進(jìn)樣裝置， 其結(jié)構(gòu)如圖所示：,2024/3/10,(4) 高效分離柱,柱體為直型不銹鋼管，內(nèi)

4、徑1～6 mm，柱長(zhǎng)5～40 cm。發(fā)展趨勢(shì)是減小填料粒度和柱徑以提高柱效。,2024/3/10,(5) 液相色譜檢測(cè)器,a. 紫外檢測(cè)器 應(yīng)用最廣，對(duì)大部分有機(jī)化合物有響應(yīng)。 特點(diǎn)： 靈敏度高； 線形范圍高； 流通池可做的很小（1mm × 10mm ，容積 8μL）； 對(duì)流動(dòng)相的流速和溫度變化不敏感； 波長(zhǎng)可選，易于操作；

5、 可用于梯度洗脫。,2024/3/10,b. 光電二極管陣列檢測(cè)器,紫外檢測(cè)器的重要進(jìn)展； 光電二極管陣列檢測(cè)器：1024個(gè)二極管陣列，各檢測(cè)特定波長(zhǎng)，計(jì)算機(jī)快速處理，三維立體譜圖，如圖所示。,2024/3/10,2024/3/10,光電二極管陣列檢測(cè)器,2024/3/10,c. 示差折光檢測(cè)器（differential refractive index detector）,除紫外檢測(cè)器之外應(yīng)用最多的檢測(cè)器；

6、 可連續(xù)檢測(cè)參比池和樣品池中流動(dòng)相之間的折光指數(shù)差值。差值與濃度呈正比；,通用型檢測(cè)器（每種物質(zhì)具有不同的折光指數(shù)）； 靈敏度低、對(duì)溫度敏感、不能用于梯度洗脫； 偏轉(zhuǎn)式、反射式和干涉型三種；,2024/3/10,示差折光檢測(cè)器,2024/3/10,d. 熒光檢測(cè)器（fluorescence detector）,高靈敏度、高選擇性； 對(duì)多環(huán)芳烴，維生素B、黃曲霉素、卟啉類化合物