藥用動物資源開發(fā)利用與保護

1、1,藥用動物學,主講人：邊高鵬,2,第一章藥用動物資源開發(fā)利用與保護,資源豐富：動物種類150萬種——動物藥2000種；昆蟲種類100萬種——動物藥500種；海洋生物1.5萬種,3,,藥用動物的活性成份有作用強、使用劑量小、療效顯著而專一等優(yōu)點，毒副作用低。蚯蚓中蚓激酶能降解纖維蛋白原，某些蛋白組分有抗腫瘤活性；毒蛇中提取的蛇毒蛋白酶、蛇毒酶等蛋白質(zhì)用于血栓治療；,4,,藥用動物既可供藥用，又可以食療。,5,,民間習用藥用魚類

2、主要有黃鱔、鯉魚、中華花鰍、泥鰍、蟲紋東方魨（河豚）、大馬哈魚、鯽魚及江鱈等。,6,,藥用昆蟲是功能性食品，其蛋白質(zhì)含量高且脂肪含量低，又含有多肽、苷等多種活性成分，因而國際上的廣泛關注。在墨西哥吃螞蟻是家常便飯，哥倫比亞的加拉曼市素有“吃蟻城”之稱.,7,,,8,,,9,,,10,,,11,,,12,,,13,,,14,,,15,一、藥用動物資源開發(fā)的層次,1、初級開發(fā)：將藥用動物的整體或部分，經(jīng)過簡單的加工和炮制，使其成為藥材。,

3、16,,（1）純凈處理：采用挑、揀、簸、篩、刮、刷等方法，去掉灰屑、雜質(zhì)及非藥用部分，藥物清潔純凈。,17,,（2）粉碎處理：采用搗、碾、鎊、銼等方法，使藥物粉碎，以符合制劑和其他炮制法的要求。,18,,,19,,炮制是藥物在應用前或制成各種劑型以前必要的加工過程，包括對原藥材進行一般修治整理和部分藥材的特殊處理，后者也稱為“炮炙”。由于中藥材大都是生藥，其中不少藥材必須經(jīng)過特定的炮炙處理，才能更符合治療需要，充分發(fā)揮藥效。因此，按照不

4、同的藥性和治療要求而有多種炮制方法。有些藥材的炮制還要加用適宜的輔料，并且注意操作技術和講究火候，正如前人所說：“不及則功效難求，太過則性味反失。”炮制是否得當，直接關系到藥效，而少數(shù)毒性藥和烈性藥的合理炮制，更是確保用藥安全的重要措施。藥物炮制法的應用與發(fā)展，已有很悠久的歷史，方法多樣，內(nèi)容豐富。,20,,,21,,（3）切制處理：采用切、鍘的方法，把藥物切制成一定的規(guī)格，使藥物有效成分易于浴出，并便于進行其他炮制，也利于干燥、貯藏和

5、調(diào)劑時稱量。,22,,,23,,2、二級開發(fā)：將一味或多味藥材和飲片，依據(jù)中醫(yī)傳統(tǒng)理論，加工成丸、散、膏、酒、曲、口服液、茶等多種劑型的中藥成品和保健品。,24,,,25,,"丸"指圓粒狀的藥丸;例如：六味地黃丸、安宮牛黃丸、 "散"指研末的藥粉;例如：錫類散 "膏"指外敷的膏藥，也指內(nèi)服煎熬成粘稠的成藥;例如益母草膏,26,,,27,,,28,,,29,,酒，素有&quo

6、t;百藥之長"之稱，將強身健體的中藥與酒"溶"于一體的藥酒，不僅配制方便、藥性穩(wěn)定、安全有效，而且因為酒精是一種良好的半極性有機溶劑，中藥的各種有效成分都易溶于其中，藥借酒力、酒助藥勢而充分發(fā)揮其效力，提高療效。,30,,,31,,曲:為面粉和其他藥物混合后經(jīng)發(fā)酵而成的加工品。,32,,,33,,霞天曲用黃牛肉熬成膠加入貝母粉加工制成。能健脾胃、消痰飲。對于脾胃虛弱、消化不良引起的濕痰過多和體肥痰多而大

7、便易溏者最為適宜。,,34,,口服液：吸收了中藥注射劑的工藝特點，是將湯劑進一步精制、濃縮、灌封、滅菌而得到的。,35,,,36,茶,中藥茶是指以各種中藥材當作茶飲，具有治療相關疾病的功效。有以一種中藥材浸泡作茶飲的中藥茶，也有多種中藥材一起浸泡的中藥茶。,37,,,38,,3、三級開發(fā)將某種藥材或生物細胞培養(yǎng)物中的有效化學成分提取分離。制成多劑型藥物，或者提取化學純品，進行化學修飾和轉化，制成藥效顯著的天然化學藥品。,39,,蟾酥中

8、分離出廿余種蟾毒配基，其中脂蟾毒配基兼有升壓、強心、興奮呼吸等作用；,40,,從膽汁中發(fā)現(xiàn)的鵝去氧膽酸、熊去氧膽酸有溶解膽結石的作用；,41,,從斑蝥等昆蟲中提取的斑蝥素有抑制癌細胞分裂的作用。斑蝥素0.14μg能誘發(fā)皮膚起泡，10mg可產(chǎn)生嚴重中毒或致死，給臨床應用帶來麻煩。人們經(jīng)過長期的研究和試驗，合成了部分斑蝥素的衍生物或類似物如去甲斑蝥素、斑蝥酸鈉和羥基斑蝥胺等抗癌藥物來替代斑蝥素，實驗表明，它們的藥理作用相似，但毒性較斑蝥素

9、小得多。,42,,,43,,4 、綜合開發(fā)：在進行藥物開發(fā)的同時，開發(fā)成保健品、化妝品、獸藥、食品添加劑等。,44,,（1）保健品免疫調(diào)節(jié)：如復方海龍口服液延緩衰老抗疲勞改善性功能保護心血管系統(tǒng),45,,,46,,,47,,,48,,,49,,采用天然動植物，包括天上飛的（蜻蜓等）、海里游的（海龍、海馬等）、地上跑的（鹿茸等），集東西南北中各種名貴藥材于一體。,50,,具有強身健腦、調(diào)整神經(jīng)、促進新陳代謝、增強機體活力等功能，

10、最終達到補而不膩，陰陽平衡，扶正驅(qū)邪的目的。龜齡集是傳統(tǒng)醫(yī)學中一種補腎填精、壯陽培本的長壽藥方，常用于陽痿、早泄、遺精等癥，素有男科“圣藥”美稱。,51,,明代嘉靖皇帝，廣集長生不老藥，方士邵之節(jié)和陶仲文制成了號稱可以長生不老的“仙藥”獻上，取名“龜齡集”——取靈龜長生不老之意。嘉靖服后，果然身體健康，連續(xù)生子。,52,,陶仲文有個義子，原籍山西太谷，他在邵、陶指導下，為皇帝煉制龜齡集，并兼任皇帝的醫(yī)藥總管。邵、陶死后，他告老還鄉(xiāng)，將

11、龜齡集處方帶回，自家升煉服用，并饋贈親友。后來，龜齡集處方輾轉傳入“廣盛藥店”。從此龜齡集便成了山西太谷獨特的方劑，作為商品流傳開了。,53,,,54,,溫腎益精。適用于腎陽不足之神疲乏力，腰膝酸軟，健忘耳鳴，夜寐多夢，畏寒肢冷，夜尿頻多。,55,,,56,,（2）化妝品敷面祛斑倒一些珍珠粉在容器里，再配以少量牛奶混合調(diào)勻。為了使敷在面上的珍珠粉不至于脫落，可在其中加一點蜂蜜，量不要太多。然后，用溫水清洗面部，將調(diào)好的珍珠粉混合物均

12、勻地敷在臉上，雀斑處多按摩一會兒。20分鐘之后用溫水洗掉。每晚臨睡前做最好。,57,(3)天然香料,動物香料多為動物體內(nèi)的的分泌物或排泄物。約有十幾種，常用的有麝香、靈貓香、海貍香和龍涎香4種,58,,,59,,,60,,,61,,,62,(4)食品添加劑,,63,,,64,,從蠶砂中提取的葉綠素銅鈉易溶于水和乙醇溶液，水溶液為透明的翠綠，隨濃度增高而加深，耐光、耐熱，穩(wěn)定性較好。葉綠素銅鈉鹽已被國際有關衛(wèi)生組織批準用于食品上，也是我

13、國批準允許使用的食用天然色素，,65,（5）其他,甲殼素甲殼質(zhì)存在于自然界中的低等植物菌類、藻類的細胞，甲殼動物蝦、蟹、昆蟲的外殼，高等植物的細胞壁等，是從蟹、蝦殼中應用遺傳基因工程提取的動物性高分子纖維素，被科學界譽之為"第六生命要素"！因此被歐美中日政府認定為機能性免疫物質(zhì)。,66,,山東華興:“蟹殼”里紡出“黃金甲”,67,,在工業(yè)上可做紡織品防霉殺菌除臭劑,可以通過后處理附著于紡織品纖維上,是紡織品提高附加價

14、值的方法之一,用于制造內(nèi)衣褲,襪子,家用特殊功能紡織品.醫(yī)用手術衣/布,傷口敷料,燒傷創(chuàng)面敷料或深加工為人造皮膚用于大面積燒傷的治療.,68,,由于殼聚糖是陽離子型天然聚合物,有良好的扼制微生物/細菌/霉菌的作用,可以應用于食品保鮮,食品內(nèi)包裝,無毒無污染.將殼聚糖制成溶液噴涂于經(jīng)清洗或剝除外皮的水果上,殼聚糖干后形成的薄膜無色無味通氣,食用時不必清除薄膜.,69,,,70,,也可應用于染料、紙張和水處理等。在農(nóng)業(yè)上可做殺蟲劑、植物抗病

15、毒劑。漁業(yè)上做養(yǎng)魚飼料?；瘖y品美容劑、毛發(fā)保護、保濕劑等。醫(yī)療用品上可做隱形眼鏡、人工皮膚、縫合線、人工透析膜和人工血管等。,71,,,72,二、藥用動物資源開發(fā)的途徑,1、從古代本草中發(fā)掘中國動物藥志收載動物藥1047種。但是目前常用動物藥僅100余種。,73,,如早在《神農(nóng)本草藥》中乙有蠐螬治療目疾的記載，但近年來蠐螬較少用于眼病的治療。四川大學華西醫(yī)學中心對蠐螬進行了研究，發(fā)現(xiàn)它用于治療白內(nèi)障、角膜翳等有很好的療效，目前蠐

16、螬滴眼液正在研制開發(fā)之中。,74,2、從民族藥和民間藥中開發(fā)新資源,藏藥,75,,雪蛙,76,3、以化學成分為線索尋找新資源,,77,4、擴大藥用部位,羚羊角：羚羊角塞：骨塞堅硬而重，橫截面四周呈齒狀而與外面的角質(zhì)層密合。全角除去骨塞外均半透明，對光透視角內(nèi)無骨塞部分中心有一條扁三角形的小孔，直通尖端，俗名"通天眼"(或沖天眼)，,78,,主治：高熱神昏、譫語發(fā)狂、驚癇抽搐、目赤腫痛等癥,79,,,80,,,81

17、,,,82,,,83,,,84,,5、應用分類學原理尋找新資源 ，,85,,,86,,同時在人工合成牛黃、合成麝香等都取得了不同程度的進展,87,,,88,亞洲黃羊,,89,,,90,,,91,,,92,,6、利用生物技術開發(fā)新藥和活性物質(zhì)重組水蛭素已經(jīng)在大腸桿菌和酵母菌中分別表達成功。,93,,,94,三、藥用動物的活性成分,,95,,1蛋白質(zhì)（酶）、多肽及氨基酸類 （1）蛋白質(zhì)（酶）蚯蚓中蚓激酶能降解纖維蛋白原;蛇毒蛋白酶

18、、蛇毒酶等用于血栓治療；動物尿液中的尿激酶、激肽釋放酶以及胰臟中提取的彈性蛋白酶等用于治療心血管疾?。徊溉轭悇游锖网B類的臟器及豚鼠血清中的天門冬酰胺酶、精氨酸酶等臨床用于治療腫瘤 ;,96,,五谷蟲(大頭金蠅Chrysomyis megacephala(Fab.))胰蛋白酶、腸肽酶有助消化作用； 蝮蛇毒中分出的以精氨酸酶用于治療腦血栓及血栓閉塞性動脈炎有效。,97,,糖蛋白，如圓蛤中蛤素具有抗腫瘤、抗病毒活性； 中華大蟾蜍的

19、糖蛋白具有強心利尿作用； 。,,98,,水蛭素具有抗凝血作用和溶解血栓的作用； 蚯蚓中分得一種分子量為510.8Da的短肽具有抗菌活性；海綿動物、軟體動物、昆蟲及兩棲動物皮膚中的抗生肽也用于抗細菌和病毒；,,99,（2）、多肽,毒肽：如眼鏡蛇毒主要用于晚期轉移癌痛、神經(jīng)痛、風濕性關節(jié)痛、偏頭痛等頑固性疼痛；動物骨類（豹骨、狗骨等）治療骨質(zhì)增生、風濕與類風濕關節(jié)炎的有效成分為多肽類。,100,,毒肽如眼鏡蛇毒主要用于晚期轉移癌痛、

20、神經(jīng)痛、風濕性關節(jié)痛、偏頭痛等頑固性疼痛；蜂毒肽有強溶血作用和表面活性，能阻礙肌肉神經(jīng)間的傳導；,,101,,水蛭素：具有抗凝血作用和溶解血栓的作用；蚯蚓中分得一種分子量為510.8Da的短肽具有抗菌活性；抗生肽：海綿動物、軟體動物、昆蟲及兩棲動物皮膚中的也用于抗細菌和病毒；還有細胞生長因子、神經(jīng)生長因子、表皮生長因子等都已應用于臨床。,102,（3）、氨基酸,肌酸：由精氨酸（arginine)、甘氨酸（glycine）及甲硫氨

21、酸（methionine）三種氨基酸所合成的物質(zhì)。磷酸肌酸：肌酸與磷酸組成的一種高能磷酸化合物,103,,?；撬幔号｜S的有刺激膽汁分泌和降低眼壓作用。,104,,紫河車的氨基酸提取物對白細胞減少癥有一定治療作用；,105,,,106,,氨基酸 :地龍的解熱作用與其氨基酸含量成正比； 紫河車(人胎盤)的氨基酸提取物對白細胞減少癥有一定治療作用； 牛黃(牛膽囊結石)的?；撬嵊写碳つ懼置诤徒档脱蹓鹤饔?.,,107,2 糖類,1）、單

22、糖2）、糖苷3）、雙糖,108,4）、多糖,肝素：由D-β-葡糖醛酸(或L-α-艾杜糖醛酸)和N-乙酰氨基葡糖形成重復二糖單位組成的多糖；甲殼素：N-乙?；?D-吡喃葡糖胺聚合而成的直鏈多糖 ；粘多糖：含氮的不均一多糖 ，重要的粘多糖有：硫酸皮膚素，硫酸類肝素，硫酸角質(zhì)素，硫酸軟骨素和透明質(zhì)酸等,109,肝素 是一種酸性黏多糖 廣泛分布于動物各種組織中的肝素用于抗凝；甲殼動物和昆蟲體壁外的甲殼素用于抗菌抗輻射；棘皮動物粘多

23、糖具抗癌和抗凝血酶活性；,,110,,鯊魚及深海軟骨魚骨骼所含雜多糖，具有顯著的腫瘤抑制作用；三角帆蚌等軟體動物中所含葡聚糖被證實具有較好的抗腫瘤活性。,111,3 脂類和脂肪酸,1）、脂肪2）、類脂（1）磷脂（2）膽固醇,112,,3）、脂肪酸：脂肪酸是由碳、氫、氧三種元素組成的一類化合物脂肪酸根據(jù)碳氫鏈飽和與不飽和的不同可分為三類，（1）飽和脂肪酸：碳氫上沒有不飽和鍵；（2）單不飽和脂肪酸：其碳氫鏈有一個不飽和鍵；（3

24、）多不飽和脂肪：其碳氫鏈有二個或二個以上不飽和鍵。,113,,富含單不飽和脂肪酸和多不飽和脂肪酸組成的脂肪在室溫下呈液態(tài)，大多為植物油，如花生油、玉米油、豆油、堅果油、菜子油等。以飽和脂肪酸為主組成的脂肪在室溫下呈固態(tài)，多為動物脂肪，如牛油、羊油、豬油等。,114,,,115,單不飽和脂肪酸,,116,多不飽和脂肪酸,亞油酸亞麻酸20碳5烯酸（EPA）22碳6烯酸（DHA）花生4烯酸,117,,深海魚油雖然是動物脂肪，但它富含

25、多不飽和脂肪酸，如20碳5烯酸（EPA）和22碳6烯酸（DHA），因而在室溫下呈液態(tài)。 地龍中的花生四烯酸有解熱作用；,118,飽和脂肪酸,棕櫚酸 硬脂酸,119,4 甾類（類固醇）,具有甾核（3個6碳環(huán)和1個與碳環(huán)稱為A，B，C及D環(huán) ）。,120,類固醇包括：,固醇：膽固醇、羊毛固醇、谷甾醇、豆甾醇、麥角甾醇，膽汁酸和膽汁醇；類固醇激素：腎上腺皮質(zhì)激素、性激素昆蟲的蛻皮激素，強心苷和皂角苷配基以及蟾蜍毒等。,121,,性

26、激素或性信息素：紫河車中的黃體酮、鹿茸中的雌酮、海狗腎中的雄甾酮等。,122,,動物膽汁中發(fā)現(xiàn)的膽汁酸有近百種，常見的有膽酸、去氧膽酸、豬去氧膽酸、鵝去氧膽酸等。去氧膽酸解痙作用明顯；熊去氧膽酸、鵝去氧膽酸能溶解膽結石，已用于臨床。,123,,屬于性激素或性信息素的有紫河車中的黃體酮、鹿茸中的雌酮、海狗腎中的雄甾酮等。,124,,昆蟲蛻皮激素以促蛻皮激素為代表，甲殼蛻皮激素以蛻皮甾酮為代表，這些昆蟲蛻皮激素有促進人體蛋白質(zhì)合成，排除體內(nèi)

27、膽甾醇，降低血脂和抑制血糖上升等作用。,125,,蟾毒甾體有強心作用。棘皮動物的海參綱及海星綱幾乎均含皂苷，這些皂苷一般能抑制癌細胞的生長，并有抗真菌、抗輻射、增強白細胞吞噬的功能。,126,5 萜類,萜類化合物就是指存在自然界中、分子式為異戊二烯單位的倍數(shù)的烴類及其含氧衍生物。這些含氧衍生物可以是醇、醛、酮、羧酸、酯等。,127,,單萜：斑蝥素；三萜：角鯊烯；四萜：蝦青素,128,6 雜環(huán)化合物,在環(huán)狀化合物中，組成環(huán)的原子除碳

28、原子外，還有其他元素的原子。1）、雜環(huán)：嘌呤、嘧啶、蝶啶、吲哚,129,,2）、雜環(huán)衍生物核酸:煙酸:維生素PP，又名尼克酸、水溶性維生素，屬于維生素B族。,130,3）、生物堿類,生物堿是存在于自然界中的一類含氮的堿性有機化合物，有似堿的性質(zhì)。大多數(shù)有復雜的環(huán)狀結構，氮素多包含在環(huán)內(nèi)。,131,按照生物堿的主要類型：,胍:河豚體內(nèi)的河豚毒素；肉毒堿：蛤蚧及全蝎，為氨基酸衍生物；膽汁中的膽紅素；蟾蜍的色胺 麥角胺,132,

29、,河豚卵巢中的河豚毒素，毒性極強，阻斷軸突傳導作用比可卡因強16萬倍，并有松弛肌肉痙攣、減輕晚期癌痛的作用；,133,,,134,,食得一口河豚肉，從此不聞天下魚,135,,動物膽汁中得到的膽紅素屬吡咯衍生物，有促進紅細胞新生、血清抗炎、治療肝硬變作用；,136,,蟾蜍色胺屬吲哚類生物堿；箭毒蛙所含的哌啶類生物堿能麻痹骨骼??；烏賊墨主要成分黑色素有止血作用；地龍的次黃嘌呤有抗組胺、平喘、降壓作用。,137,7 酮和酸類,酮是羰基與

30、兩個烴基相連的化合物。麝香中的麝香酮有強心、抗炎、興奮呼吸和中樞神經(jīng)的作用；,138,,酸是指一些具有酸性的有機化合物。蜂王漿中的王漿酸有抗菌、抗腫瘤作用。蟻酸,139,（二） 動物藥有效成分的提取,（一）、溶劑提取法 原理： 1相似相溶 2擴散作用,140,溶劑的選擇,選擇溶劑要注意以下三點：①溶劑對有效成分溶解度大，對雜質(zhì)溶解度??；②溶劑不能與中藥的成分起化學變化；③溶劑要經(jīng)濟、易得、使用安全等。

31、,141,常見的提取溶劑,1）水： 水是一種強的極性溶劑。 中草藥中親水性的成分，如無機鹽、糖類、分子不太大的多糖類、鞣質(zhì)、氨基酸、蛋白質(zhì)、有機酸鹽、生物堿鹽及甙類等都能被水溶出。 為了增加某些成分的溶解度，也常采用酸水及堿水作為提取溶劑。酸水提取，可使生物堿與酸生成鹽類而溶出，堿水提取可使有機酸、黃酮、蒽醌、內(nèi)酯、香豆素以及酚類成分溶出。,142,,問題:易霉壞變質(zhì) ; 沸水

32、提取時，中草藥中的淀粉可被糊化，而增加過濾的困難 ; 提取液中含有皂甙及粘液質(zhì)類成分，在減壓濃縮時，還會產(chǎn)生大量泡沫，造成濃縮的困難。,143,,2)親水性的有機溶劑： 如乙醇、甲醇、丙酮等， 以乙醇最常用。 對中草藥細胞的穿透能力較強。親水性的成分除蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、果膠、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。 甲醇的性質(zhì)和乙醇相似，沸點較低（64℃），但有毒性，使用時應注意。

33、,144,親脂溶劑,石油醚、苯、氯仿、乙醚、乙酸乙酯、二氯乙烷等。 這些溶劑的選擇性能強，不能或不容易提取親水性雜質(zhì)。但這類溶劑揮發(fā)性大，多易燃（氯仿除外），一般有毒，價格較貴，設備要求較高，且它們透入植物組織的能力較弱，往往需要長時間反復提取才能提取完全。如果藥材中含有較多的水分，用這類溶劑就很難浸出其有效成分.,145,提取方法,常用浸漬法、滲漉法、煎煮法、回流提取法及連續(xù)回流提取法等,146,,1）浸漬法：

34、 將中草藥粉末或碎塊裝人適當?shù)娜萜髦?，加入適宜的溶劑（如乙醇、稀醇或水），浸漬藥材以溶出其中成分的方法。,147,2）滲漉法：,將中草藥粉末裝在滲漉器中，不斷添加新溶劑，使其滲透過藥材，自上而下從滲漉器下部流出浸出液的一種浸出方法，當溶劑滲進藥粉溶出成分比重加大而向下移動時，上層的溶液或稀浸液便置換其位置，造成良好的濃度差，使擴散能較好地進行，故浸出效果優(yōu)于浸漬法。,148,滲漉器,,149,注意事項,但應控制流速，在滲渡過程中隨時

35、自藥面上補充新溶劑，使藥材中有效成分充分浸出為止。或當滲滴液顏色極淺或滲液的體積相當于原藥材重的10倍時，便可認為基本上已提取完全。在大量生產(chǎn)中常將收集的稀滲液作為另一批新原料的溶劑之用。,150,3）煎煮法,是我國最早使用的傳統(tǒng)的浸出方法。所用容器一般為陶器、砂罐或銅制、搪瓷器皿，不宜用鐵鍋，以免藥液變色。直火加熱時最好時常攪拌，以免局部藥材受熱太高，容易焦糊。,151,煎煮器,,152,4）回流提取法：,應用有機溶劑加熱提取，需采用

36、回流加熱裝置，以免溶劑揮發(fā)損失。小量操作時，可在圓底燒瓶上連接回流冷凝器。瓶內(nèi)裝藥材約為容量，溶劑浸過藥材表面約1～2cm。在水浴中加熱回流，一般保持沸騰一定的時間，放冷過濾，再在藥渣中加溶劑，作第二、三次加熱回流分別約半小時，或至基本提盡有效成分為止。此法提取效率較冷浸法高，大量生產(chǎn)中多采用連續(xù)提取法。,153,回流提取裝置,,154,5）連續(xù)提取法,應用揮發(fā)性有機溶劑提取中草藥有效成分，不論小型實驗或大型生產(chǎn)，均以連續(xù)提取法為好，而

37、且需用溶劑量較少，提取成分也較完全。實驗室常用脂肪提取器或稱索氏提取器。連續(xù)提取法，一般需數(shù)小時才能提取完全。提取成分受熱時間較長，遇熱不穩(wěn)定易變化的成分不宜采用此法。,155,156,（二）、 水蒸氣蒸餾法,適用于能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞的中藥成分的提取。此類成分的沸點多在100℃以上，與水不相混溶或僅微溶，且在約100℃時存一定的蒸氣壓。當與水在一起加熱時，其蒸氣壓和水的蒸氣壓總和為一個大氣壓時，液體就開始沸騰，水蒸氣將揮發(fā)性物質(zhì)一

38、并帶出。,157,水蒸氣蒸餾裝置,,158,,中草藥中的揮發(fā)油，某些小分子生物堿一麻黃堿、蕭堿、檳榔堿，以及某些小分子的酚性物質(zhì)。牡丹酚等，都可應用本法提取。有些揮發(fā)性成分在水中的溶解度稍大些，常將蒸餾液重新蒸餾，在最先蒸餾出的部分，分出揮發(fā)油層，或在蒸餾液水層經(jīng)鹽析法并用低沸點溶劑將成分提取出來。例如玫瑰油、原白頭翁素等的制備多采用此法。,159,（三）、升華法,固體物質(zhì)受熱直接氣化，遇冷后又凝固為固體化合物，稱為升華。 中草

39、藥中有一些成分具有升華的性質(zhì)，故可利用升華法直接自中草藥中提取出來。 例如樟木中升華的樟腦（camphor）。,160,（四）、分離和純化,可采用的方法:溶劑分離法 兩相溶劑萃取法 沉淀法鹽析法透析法結晶、重結晶和分步結晶法層析法超臨界CO2流體萃取技術,161,1溶劑分離法(萃取),原理: 總提取物中各組成成分，依其在不同極性溶劑中溶解度的差異而得到分離 要求: 選用三、四種不同極

40、性的溶劑，由低極性到高極性分步進行提取分離 .,162,,例如: 防己乙醇浸膏，堿化后可利用乙醚溶出脂溶性生物堿，再以冷苯處理溶出防己堿，與其結構類似的防己諾林堿比前者少一甲基而有一酚羥基，不溶于冷苯而得以分離.,163,,水浸膏或乙醇浸膏常常為膠狀物，難以均勻分散在低極性溶劑中，故不能提取完全，可拌于適量惰性填充劑，如硅藻土或纖維粉等，然后低溫或自然干燥，粉碎后，再以選用溶劑依次提取 .,164,,水提液中常含有樹膠、粘

41、液質(zhì)、蛋白質(zhì)、糊化淀粉等，可以加入一定量的乙醇，使這些不溶于乙醇的成分自溶液中沉淀析出，而達到與其它成分分離的目的 .水提取液中獲得白及膠，可采用加乙醇沉淀法；括樓根汁中制取天花粉素，可滴入丙酮使分次沉淀析出;提取多糖及多肽類化合物，多采用水溶解、濃縮、加乙醇或丙酮析出的辦法。,165,,利用某些成分能在酸或堿中溶解，又在加堿或加酸變更溶液的pH后，成不溶物而析出以達到分離目的.內(nèi)酯類化合物不溶于水，但遇堿開環(huán)生成羧酸鹽溶于水，

42、再加酸酸化，又重新形成內(nèi)酯環(huán)從溶液中析出，從而與其它雜質(zhì)分離 .,166,,中草藥總提取物用酸水、堿水先后處理，可以分為三部分：溶于酸水的為堿性成分（如生物堿），溶于堿水的為酸性成分（如有機酸），酸、堿均不溶的為中性成分（如甾醇）。例如: 長春花生物堿、石蒜生物堿的分離; 紫董定堿（corydine）; 蝙蝠葛堿（dauricins）; 四氫掌葉防己堿,167,2 兩相溶劑萃取法,原理: 利用

43、混合物中各成分在兩種互不相溶的溶劑中分配系數(shù)的不同而達到分離的方法。 萃取時如果各成分在兩相溶劑中分配系數(shù)相差越大，則分離效率越高、如果在水提取液中的有效成分是親脂性的物質(zhì)，一般多用親脂性有機溶劑，如苯、氯仿或乙醚進行兩相萃取，如果有效成分是偏于親水性的物質(zhì)，在親脂性溶劑中難溶解，就需要改用弱親脂性的溶劑，例如乙酸乙酯、丁醇等。,168,分液漏斗,,169,,注意以下幾點和處理： (1)出現(xiàn)乳化 現(xiàn)象(2)水提取液的濃

44、度最好比重 (3)溶劑與水溶液應保持一定量的比例 (4)一般萃取多次.,170,逆流連續(xù)萃取法,是一種連續(xù)的兩相溶劑萃取法。其裝置可具有一根、數(shù)根或更多的萃取管。管內(nèi)用小瓷圈或小的不銹鋼絲圈填充，以增加兩相溶劑萃取時的接觸面。 例如:氯仿從川楝樹皮的水浸液中萃取川楝素: 將氯仿盛于萃取管內(nèi)，而比重小于氯仿的水提取濃縮液貯于高位容器內(nèi)，開啟活塞，則水浸液在高位壓力下流入萃取管，遇瓷圈撞擊而分散成細粒，使與氯仿

45、接觸面增大，萃取就比較完全。,171,逆流連續(xù)萃取裝置,,172,3 沉淀法,是在中藥提取液中加入某些試劑使產(chǎn)生沉淀，以獲得有效成分或除去雜質(zhì)的方法。,173,(1) 鉛鹽沉淀法,分離某些中草藥成分的經(jīng)典方法之一。由于醋酸鉛及堿式醋酸鉛在水及醇溶液中，能與多種中草藥成分生成難溶的鉛鹽或絡鹽沉淀，故可利用這種性質(zhì)使有效成分與雜質(zhì)分離。 常用以沉淀有機酸、氨基酸、蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、鞣質(zhì)、樹脂、酸性皂甙、部分黃酮等。,174,,脫鉛

46、方法 : 硫化氫脫鉛 用硫酸、磷酸、硫酸鈉、磷酸鈉等除鉛 例如: 在黃芩水煎液中加入明礬溶液，黃芩甙就與鋁鹽絡合生成難溶于水的絡化物而與雜質(zhì)分離，這種絡化物經(jīng)用水洗凈就可直接供藥用。,175,(2)試劑沉淀法,在生物堿鹽的溶液中，加入某些生物堿沉淀試劑，則生物堿生成不溶性復鹽而析出。水溶性生物堿難以用萃取法提取分出，常加入雷氏銨鹽使生成生物堿雷氏鹽沉淀析出。 橙皮甙、蘆丁、黃芩甙、甘草皂甙均易溶于堿性

47、溶液，當加入酸后可使之沉淀析出。 某些蛋白質(zhì)溶液，可以變更溶液的pH值利用其在等電點時溶解度最小的性質(zhì)而使之沉淀析出。,176,4 鹽析法,是在中草藥的水提液中、加入無機鹽至一定濃度，或達到飽和狀態(tài)，可使某些成分在水中的溶解度降低沉淀析出，而與水溶性大的雜質(zhì)分離. 鹽析的無機鹽: 氯化鈉、硫酸鈉、硫酸鎂、硫酸銨等。 例如: 三七的水提取液中加硫酸鎂至飽和狀態(tài)，三七皂甙乙即可沉淀析出

48、: 黃藤中提取掌葉防己堿，三顆針中提取小檗堿在生產(chǎn)上都是用氯化鈉或硫酸胺鹽析制備。,177,5 透析法,利用小分子物質(zhì)在溶液中可通過半透膜，而大分子物質(zhì)不能通過半透膜的性質(zhì)，達到分離的方法。透析膜: 動物性膜、火棉膠膜、羊皮紙膜（硫酸紙膜）、蛋白質(zhì)膠膜、玻璃紙膜等。常用市售的玻璃紙或動物性半透膜扎成袋狀，外面用尼龍網(wǎng)袋加以保護，小心加入欲透析的樣品溶液，懸掛在清水容器中。 例如:

49、分離和純化皂甙、蛋白質(zhì)、多肽、多糖等物質(zhì)時，可用透析法以除去無機鹽、單糖、雙糖等雜質(zhì) .,178,6結晶、重結晶和分步結晶法,結晶的意義: 鑒定中草藥化學成分，研究其化學結構，必須首先將中藥成分制備成單體純品。 一般來說，中草藥化學成分在常溫下多半是固體的物質(zhì)，都具有結晶的通性，可以根據(jù)溶解度的不同用結晶法來達到分離精制的目的。 一旦獲得結晶，就能有效地進一步精制成為單體純品。純化合物的結

50、晶有一定的熔點和結晶學的特征，有利于鑒定 .,179,,,180,制備結晶,1選擇合宜的溶劑和應用適量的溶劑 一般常用甲醇、丙酮、氯仿、乙醇、乙酸乙醋 作制備結晶 的溶劑 有些化合物在某些溶劑中則易于形成結晶。 例如: 葛根素、逆沒食子酸在冰醋酸中易形成結晶; 大黃素在吡啶中易于結晶; 萱草毒素在N，N一二甲基甲酰胺（DMF）中易得到結晶; 穿心蓮亞硫酸氫鈉加成物在

51、丙酮一水中較易得到結晶; 蝙蝠葛堿通常為無定形粉未，但能和氯仿或乙醚形成為加成物結晶。,181,結晶溶液的制備,制備結晶的溶液，需要成為過飽和的溶液。一般是應用適量的溶劑在加溫的情況下，將化合物溶解再放置冷處。如果在室溫中可以析出結晶，就不一定放置于冰箱中，以免伴隨結晶析出更多的雜質(zhì)。 如果溶液濃度適當，溫度慢慢降低，可析出結晶較大而純度較高的結晶。 有的化合物其結晶的形成需要較長的時間，例

52、如鈴蘭毒甙等，有時需放置數(shù)天或更長的時間。,182,制備結晶操作,1放置過程中，最好先塞緊瓶塞，避免液面先出現(xiàn)結晶，而致結晶純度較低。 2放置一段時間后沒有結晶析出，可以加入極微量的種晶，即同種化合物結晶的微小顆粒。加種晶是誘導晶核形成常用而有效的手段。3沒有種晶時，可用玻璃棒蘸過飽和溶液一滴，在空氣中任溶劑揮散，再用以磨擦容器內(nèi)壁溶液邊緣處，以誘導結晶的形成。4如仍無結晶析出，可打開瓶塞任溶液逐步揮散，慢慢析晶。5或另選適當溶

53、劑處理，或再精制一次，盡可能除盡雜質(zhì)后進行結晶操作。,183,重結晶及分步結晶,在制備結晶時，最好在形成一批結晶后，立即傾出上層溶液，然后再放置以得到第二批結晶。晶態(tài)物質(zhì)可以用溶劑溶解再次結晶精制。這種方法稱為重結晶法。 結晶經(jīng)重結晶后所得各部分母液，再經(jīng)處理又可分別得到第二批、第三批結晶。這種方法則稱為分步結晶法或分級結晶法。,184,結晶純度的判定,化合物的結晶都有一定的結晶形狀、色澤、熔點和熔距可以作為鑒定的初步依

54、據(jù). 高壓液譜、氣相層析、紫外光譜等，均有助于檢識結晶樣品的純度。,185,7層析法,基本原理： 層析過程是基于樣品組分在互不相溶的兩“相”溶劑之間的分配系數(shù)之差（分配層析），組分對吸附劑吸附能力不同（吸附層析），和離子交換，分子的大?。ㄅ抛鑼游觯┒蛛x。通常又將一般的以流動相為氣體的稱為氣相層析，流動相為液體的稱為液相層析。,186,柱層析裝置,,187,吸附層析法（AdsorptionChromatog

55、raphy）,特別適用于很多中等分子量的樣品（分子量小于1，000的低揮發(fā)性樣品）的分離，尤其是脂溶性成分，一般不適用于高分子量樣品如蛋白質(zhì)、多糖或離子型親水性化合物等的分離 . 吸附層析的分離效果，決定于吸附劑、溶劑和被分離化合物的性質(zhì).,188,,吸附劑： 常用的吸附劑有硅膠、氧化鋁、活性炭、硅酸鎂、聚酰胺、硅藻土等。溶劑： 在柱層析時所用的溶劑（單一劑或混合溶劑）習慣上稱洗脫劑，用于薄層或

56、紙層析時常稱展開劑。洗脫劑的選擇: 須根據(jù)被分離物質(zhì)與所選用的吸附劑性質(zhì)這兩者結合起來加以考慮.,189,,被分離物質(zhì)的性質(zhì)： 被分離的物質(zhì)與吸附劑，洗脫劑共同構成吸附層析中的三個要素，彼此緊密相連。,190,薄層層析,薄層層析是一種簡便、快速、微量的層析方法。一般將柱層析用的吸附劑撒布到平面如玻璃片上，形成一薄層進行層析時一即稱薄層層析。其原理與柱層析基本相似。 主要區(qū)別在于薄層層析要求吸附

57、劑（支持劑）的粒度更細，一般應小于250目，并要求粒度均勻 .,191,薄層層析,,192,特殊薄層,針對某些性質(zhì)特殊的化合物的分離與檢出，有時需采用一些特殊薄層。① 熒光薄層 ② 絡合薄層 ③ 酸堿薄層和pH緩沖薄層,193,8超臨界CO2流體萃取技術,利用壓力和溫度對超臨界流體溶解能力的影響而進行的萃取技術。 在超臨界狀態(tài)下，將超臨界流體與待分離的物質(zhì)接觸，使其有選擇性地把極性大小、沸點高低和分子量大小的成分依次萃取

58、出來。 超臨界CO2流體萃取過程是由萃取和分離過程組合而成的。 超臨界流體萃取是70年代末發(fā)展起來的一種新型物質(zhì)分離、精制技術。,194,超臨界CO2流體萃取儀,,195,超臨界流體定義,任何一種物質(zhì)都存在三種相態(tài)-氣相、液相、固相。三相成平衡態(tài)共存的點叫三相點。液、氣兩相成平衡狀態(tài)的點叫臨界點。在臨界點時的溫度和壓力稱為臨界壓力。不同的物質(zhì)其臨界點所要求的壓力和溫度各不相同。 超臨界流體(Supercriti

59、cal fluid，SCF)技術 指溫度和壓力均高于臨界點的流體,如二氧化碳臨界溫度Tc=31.26℃、臨界壓力Pc=7.2MPa 。 高于臨界溫度和臨界壓力而接近臨界點的狀態(tài)稱為超臨界狀態(tài)。處于超臨界狀態(tài)時，氣液兩相性質(zhì)非常相近，以至無法分別，所以稱之為SCF。,196,,處于臨界點以上溫度和壓力區(qū)域下的流體，在臨界點附近，會出現(xiàn)流體的密度、粘度、溶解度、熱容量、介電常數(shù)等所有流體的物性發(fā)生

60、急劇變化。,197,超臨界流體萃取分離原理,利用超臨界流體的溶解能力與其密度的關系，即利用壓力和溫度對超臨界流體溶解能力的影響而進行的。當氣體處于超臨界狀態(tài)時, 成為性質(zhì)介于液體和氣體之間的單一相態(tài), 具有和液體相近的密度, 粘度雖高于氣體但明顯低于液體, 擴散系數(shù)為液體的10～100倍; 因此對物料有較好的滲透性和較強的溶解能力, 能夠?qū)⑽锪现心承┏煞痔崛〕鰜怼?198,,在超臨界狀態(tài)下，將超臨界流體與待分離的物質(zhì)接觸，使

61、其有選擇性地依次把極性大小、沸點高低和分子量大小的成分萃取出來。并且超臨界流體的密度和介電常數(shù)隨著密閉體系壓力的增加而增加, 極性增大, 利用程序升壓可將不同極性的成分進行分步提取。當然，對應各壓力范圍所得到的萃取物不可能是單一的，但可以通過控制條件得到最佳比例的混合成分，然后借助減壓、升溫的方法使超臨界流體變成普通氣體，被萃取物質(zhì)則自動完全或基本 析出，從而達到分離提純的目的，并將萃取分離兩過程合為一體，這就是超臨界流體萃取分離的基

62、本原理。,199,二氧化碳超臨界流體萃取,二氧化碳在溫度高于臨界溫度Tc=31.26℃、壓力高于臨界壓力Pc=7.2MPa的狀態(tài)下，性質(zhì)會發(fā)生變化，其密度近于液體，粘度近于氣體，擴散系數(shù)為液體的100倍，因而具有驚人的溶解能力。用它可溶解多種物質(zhì)，然后提取其中的有效成分，具有廣泛的應用前景。,200,,特點： 1. 可以在接近室溫(35～40℃)及CO2氣體籠罩下進行提取，有效地防止了熱敏性物質(zhì)的氧化和逸散; 2由于全過程不用有機溶

63、劑，因此萃取物絕無殘留的溶劑物質(zhì)，從而防止了提取過程中對人體有害物的存在和對環(huán)境的污染，保證了100%的純天然性 ;,201,,3. 萃取和分離合二為一，當飽和的溶解物的CO2流體進入分離器時，由于壓力的下降或溫度的變化，使得CO2與萃取物迅速成為兩相（氣液分離）而立即分開，不僅萃取的效率高而且能耗較少，提高了生產(chǎn)效率也降低了費用成本； 4. CO2是一種不活潑的氣體，萃取過程中不發(fā)生化學反應，且屬于不燃性氣體，無味、無臭、無毒、安全

64、性非常好；,202,,5. CO2氣體價格便宜，純度高，容易制取，且在生產(chǎn)中可以重復循環(huán)使用，從而有效的降低了成本；6. 壓力和溫度都可以成為調(diào)節(jié)萃取過程的參數(shù)，通過改變溫度和壓力達到萃取的目的，壓力固定通過改變溫度也同樣可以將物質(zhì)分離開來。,203,第二節(jié) 藥用動物資源的保護,,204,,一、藥用動物保護的意義1、維持生態(tài)平衡，保護生物多樣性2、科學研究的需要3、人類文明的體現(xiàn)4、可持續(xù)發(fā)展的需要,205,二、藥用動物資源

65、保護的相關公約、法規(guī),1、國際公約CITES：因為該公約系于一九七三年六月廿一日在美國首府華盛頓所簽署，所以俗稱：華盛頓公約。一九七五年七月一日正式生效。,206,,中日候鳥保護協(xié)定保護候鳥日澳公約西半球保護野生動物和自然保護公約歐洲保護野生動物和自然棲所公約,207,,2、國內(nèi)的法規(guī)1987年，野生藥材資源保護管理條例1989年，中華人民共和國野生動物保護法,208,3、特種動物養(yǎng)殖的相關法規(guī) 需要申辦兩證：野生動物馴

66、養(yǎng)繁殖許可證野生動物及其產(chǎn)品經(jīng)營許可證。,209,1）、申辦條件：①有適宜的場地、籠舍、設備；②有與馴養(yǎng)、繁殖的種類、數(shù)量相適應的資金、飼養(yǎng)人員和技術人員；③種源和飼料來源有保障；④如是國家一級保護動物，還需要有種源來源證明和可行性研究報告。,210,2）、申報流程：①向所在地林業(yè)局提交申請報告，填寫申請表，提交相關資料；②經(jīng)所在地林業(yè)局考核報市林業(yè)局復核，由市林業(yè)局專辦人員送自治區(qū)林業(yè)廳野生動物保護處；③審查合格，由保護

67、處向申請人核發(fā)行政許可證。,211,,此外，參與運輸特種動物及其產(chǎn)品的車輛，還需申辦有“野生動物及其產(chǎn)品出縣境運輸證”，申辦流程和以上兩證一致。,212,,三 藥用動物資源保護方法1、發(fā)揚我國保護野生動物的優(yōu)良傳統(tǒng)2、完善藥用動物保護的法律、法規(guī)，開展公眾保護意識的宣教3、加強信息管理，建立保護體系4、發(fā)展自然保護區(qū)，保護種質(zhì)資源,213,,5、發(fā)展人工養(yǎng)殖6、實施再引進工程，發(fā)展壯大瀕危藥用動物動物種群,214,,,215,

68、,1900年，八國聯(lián)軍攻陷北京，麋鹿被搶劫一空。1901年，英國的貝福特公爵用重金從法、德、荷、比四國收買了世界上僅有的18頭麋鹿，以半野生的方式集中地放養(yǎng)在烏邦寺莊園內(nèi)，麋鹿這才免于絕滅。,216,,,217,,1985年5月，世界野生動物基金會會同國際自然和自然資源保護聯(lián)盟、英國倫敦動物學會的官員和專家來大豐市沿?？疾欤x定了川東港以南的一片黃海沖積平原沼澤地作為麋鹿最理想的放養(yǎng)地。,218,,7、新資源尋找8、加強人工合成品或人