生化實驗實驗三-蛋白質顏色反應及沉淀反應

1、實驗三實驗三蛋白質顏色反應及沉淀反應蛋白質顏色反應及沉淀反應一、目的一、目的1、掌握鑒定蛋白質的原理及方法。2、熟悉蛋白質的沉淀反應。3、進一步掌握蛋白質的有關性質。二、原理二、原理蛋白質分子中的某種或某些基團與顯色劑作用，可產生特定的顏色反應，不同蛋白質所含氨基酸種類不同，顏色反應亦不同。顏色反應不是蛋白質的專一反應，一些非蛋白物質亦可產生相同的顏色反應，因此不能僅根據顏色反應的結果決定被測物質是否是蛋白質。顏色反應是一些常用的蛋白質

2、定量測定的依據。多數蛋白質是親水膠體，當其穩(wěn)定性被破壞或與某些試劑結合成不溶解的鹽后，即產生沉淀。三、實驗器材三、實驗器材1、雞蛋白2、試管3、吸管4、滴管5、水浴鍋等四、實驗試劑四、實驗試劑1、卵清蛋白液：將雞蛋白用蒸餾水稀釋2040倍，23層紗布過濾，濾液冷藏備用。2、0.1%茚三酮溶液：0.1g茚三酮溶于95%乙醇并稀釋至100ml。3、10%氫氧化鈉溶液：10g氫氧化鈉溶于蒸餾水并稀釋至100ml。4、濃硝酸：比重1.42。5、

3、1%硫酸銅溶液：硫酸銅1g溶于蒸餾水，稀釋至100ml。6、飽和硫酸銨溶液：蒸餾水100ml加硫酸銨至飽和。7、95%乙醇。8、結晶氯化鈉。9、1%醋酸鉛：1g醋酸鉛溶于蒸餾水并稀釋至100ml。10、飽和苦味酸溶液。11、1%醋酸溶液：冰醋酸1ml用蒸餾水稀釋至100ml。五、操作五、操作1、顏色反應：、顏色反應：A、雙縮脲反應：、雙縮脲反應：蛋白質分子中含有肽鍵，與兩分子尿素經過加熱形成的雙縮脲的結構相似，能與硫酸銅結合成紅紫色的絡

4、合物。取一支試管，加蛋白質溶液10滴，再加10%NaOH溶液10滴及1%CuSO4溶液2滴，混勻，觀察是否出現(xiàn)紫玫瑰色。B、黃色反應：、黃色反應：蛋白質分子中含有苯環(huán)結構的氨基酸。遇硝酸可硝化成黃色物質，此物質在堿性環(huán)境中變?yōu)殚冱S色的硝苯衍生物。2、沉淀反應結果項目結果（是否有沉淀產生）鹽析作用乙醇沉淀作用重金屬鹽沉淀作用生物堿試劑沉淀作用七、思考題1、簡述茚三酮與蛋白質進行顏色反應的原理。2、維持蛋白質膠體溶液穩(wěn)定性的因素有哪些？乙醇