生物實(shí)驗(yàn)中試劑的作用及實(shí)驗(yàn)方法總結(jié)

1、生物實(shí)驗(yàn)中試劑的作用及實(shí)驗(yàn)方法總結(jié)生物實(shí)驗(yàn)中試劑的作用及實(shí)驗(yàn)方法總結(jié)一、化學(xué)物質(zhì)的檢測(cè)方法一、化學(xué)物質(zhì)的檢測(cè)方法①淀粉——碘液(藍(lán)色)②還原性糖——斐林試劑班氏試劑(磚紅色)③CO2——Ca(OH)2溶液(澄清石灰水變渾濁)④乳酸——pH試紙⑤O2——余燼復(fù)然⑥蛋白質(zhì)——被蛋白酶水解、雙縮脲試劑(紫紅色)⑦脂肪——蘇丹Ⅲ染液(橘黃色)、蘇丹Ⅳ染液(紅色)⑧DNA——二苯胺(藍(lán)色)⑨染色體——龍膽紫溶液，醋酸洋紅溶液二、實(shí)驗(yàn)條件的控制方法

2、二、實(shí)驗(yàn)條件的控制方法1、加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物2、減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開(kāi)水3、除去容器中CO2——NaOH溶液4、除去葉中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境5、除去葉中葉綠素——酒精水浴加熱6、除去光合對(duì)呼吸干擾——給植株遮光7、如何得到單色光——棱鏡色散或透明薄膜濾光8、血液抗疑——加入檸檬酸鈉9、線粒體提取——細(xì)胞勻漿離心10、骨無(wú)機(jī)鹽的除去——鹽酸溶液11、滅菌方法——培養(yǎng)基用高壓蒸汽滅菌接種環(huán)用火

3、焰灼燒滅菌雙手用肥皂冼凈，擦干后用75%酒精消毒實(shí)驗(yàn)室或接種箱用甲醛蒸汽或紫外燈滅菌整個(gè)過(guò)程都在實(shí)驗(yàn)室無(wú)菌區(qū)或酒精燈旁進(jìn)行。三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顯示方法三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的顯示方法①光合速度——O2釋放量或CO2吸收量或有機(jī)物生成量◆水生植物可依氣泡的產(chǎn)生量或產(chǎn)生速率◆離體葉片若事先沉入水底可依單位時(shí)間內(nèi)上浮的葉片數(shù)目◆植物體上的葉片可依指示劑(如碘液)處理后葉片顏色深淺。②呼吸速度——O2吸收量或CO2釋放量或有機(jī)物消耗量③原子或分子轉(zhuǎn)移途徑——

4、放射性同位素示蹤④細(xì)胞液濃度大小——質(zhì)壁分離⑤植物細(xì)胞是否死亡——質(zhì)壁分離⑥甲狀腺激素—?jiǎng)游锖难趿堪l(fā)育速度等⑦生長(zhǎng)激素—生長(zhǎng)速度(體重、體長(zhǎng)變化)⑧胰島素作用—?jiǎng)游锘顒?dòng)狀態(tài)⑨菌量—菌落數(shù)，亞甲基藍(lán)褪色程度四、實(shí)驗(yàn)中控制溫度的方法四、實(shí)驗(yàn)中控制溫度的方法1、還原糖，DNA鑒定——沸水浴加熱2、酶促反應(yīng)——水浴保溫3、用酒精溶解葉中的葉綠素——酒精要隔水加熱、4、細(xì)胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng)——恒溫箱培養(yǎng)五、實(shí)驗(yàn)中常用器材和藥品的使用五、實(shí)

5、驗(yàn)中常用器材和藥品的使用1、NaOH：用于吸收CO2或改變?nèi)芤旱膒H2、Ca(OH)2：鑒定CO23、CaCl2提高細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性4、HCl：解離或改變?nèi)芤旱膒H5、NaHCO3：提供CO26、NaCl：配制生理鹽水或用于提取DNA7、瓊脂：激素或其他物質(zhì)的載體或培養(yǎng)基的凝固劑8、亞甲基藍(lán)：用于檢測(cè)污水的細(xì)菌含量9、酒精：用于消毒、提純DNA、葉片脫色及配制解離液10、蔗糖：測(cè)定植物細(xì)胞液濃度或觀察質(zhì)壁分離和復(fù)原、作為碳源和能源物質(zhì)

6、11、濾紙：過(guò)濾或紙層析12、紗布、尼龍布：過(guò)濾，遮光13、龍膽紫溶液或醋酸洋紅：堿性染料，用于染色體染色14、檸檬酸鈉——血液抗凝劑六、一些常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)方法六、一些常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)方法⑴、根據(jù)顏色來(lái)確定某種物質(zhì)的存在：淀粉I2(藍(lán)色)還原性糖斐林試劑(磚紅色)脂肪蘇丹Ⅲ(橘黃)或蘇丹Ⅳ(紅色)蛋白質(zhì)雙縮脲試劑(紫色)大腸桿菌伊紅和美藍(lán)(菌落為深紫色，有金屬光澤)⑵、用顏色標(biāo)記法來(lái)確定原腸胚三個(gè)胚層的分化情況。⑶、用熒光標(biāo)記法來(lái)證明細(xì)胞膜具有一

7、定的流動(dòng)性⑷、同位素示蹤法：光合作用產(chǎn)生氧氣的來(lái)源光合作用中二氧化碳的去向噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)證明DNA是遺傳物質(zhì)，蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)DNA的復(fù)制是半保留復(fù)制。⑸、確定某種元素為植物生長(zhǎng)必需的元素的方法:水培法(完全培養(yǎng)液與缺素完全培養(yǎng)液對(duì)照)⑹、獲得無(wú)籽果實(shí)的方法:用適宜濃度的生長(zhǎng)素處理花蕾期已去雄的子房，如無(wú)籽蕃茄、誘導(dǎo)染色體變異，如無(wú)籽西瓜。⑺、確定某種激素功能的方法：飼喂法，切除注射法，閹割移植法，切除口服法。⑻、確定傳入、傳出神

8、經(jīng)的功能：刺激觀察效應(yīng)器的反應(yīng)或測(cè)定神經(jīng)上的電位變化。⑼、植物雜交的方法雌雄同花：花蕾期去雄套袋開(kāi)花期人工授粉套袋雌雄異花：花蕾期雌花套袋開(kāi)花期人工授粉套袋⑽、確定某一顯性個(gè)體基因型的方法：固而失去功能，以達(dá)到消毒殺菌的目的。高于體積分?jǐn)?shù)為75%濃度的酒精與細(xì)菌接觸時(shí)，就可能使得菌體表面迅速凝固，形成一層薄膜，阻止了酒精繼續(xù)向菌體內(nèi)部滲透，待到適當(dāng)時(shí)機(jī)，薄膜內(nèi)的細(xì)胞可能將薄膜沖破而重新復(fù)活。在此高濃度下，酒精迅速凝固蛋白質(zhì)的作用往往隨著

9、其濃度升高而增強(qiáng)，因此，其消毒殺菌的效果也就越差。若酒精的濃度低于75％，也因不能順利地滲入到細(xì)菌體內(nèi)而徹底殺死細(xì)菌。如果使用體積分?jǐn)?shù)為75％的酒精，既能使組成細(xì)菌的蛋白質(zhì)凝固，又不能形成薄膜，這樣，酒精可繼續(xù)向內(nèi)部滲透，從而達(dá)到較好的消毒效果。值得注意的是，體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精溶液的殺菌能力不是絕對(duì)很強(qiáng)，它對(duì)芽孢就不起作用。3.3應(yīng)用學(xué)習(xí)微生物的培養(yǎng)技術(shù)。在接種開(kāi)始時(shí)，待用肥皂將雙手洗干凈后，再用體積分?jǐn)?shù)為75%的酒精棉球擦拭雙手，

10、然后在進(jìn)行接種操作。4無(wú)水酒精無(wú)水酒精4.1作用提取色素。4.2原理葉綠體中的各種色素均是有機(jī)物，能溶解在有機(jī)溶劑中，各色素在無(wú)水酒精中的溶解度較大，且酒精無(wú)毒，方便操作。4.3應(yīng)用葉綠體中色素的提取與分離。5工業(yè)酒精工業(yè)酒精（一般是體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精）5.1作用燃燒加熱。5.2原理酒精是富含能量的有機(jī)物，燃燒能產(chǎn)生大量的熱量。5.3應(yīng)用此處包括各類(lèi)必須加熱的實(shí)驗(yàn)，如生物組織中還原糖的鑒定、比較過(guò)氧化氫酶和Fe3的催化效率、探索淀粉

11、酶對(duì)淀粉和蔗糖的作用、DNA的粗提取與鑒定、溫度對(duì)酶活性的影響、學(xué)習(xí)微生物培養(yǎng)的基本技術(shù)、自身固氮菌的分離等實(shí)驗(yàn)。在觀察根尖分生組織細(xì)胞的有絲分裂中，與酒精1:1混合，起解離作用在觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布中，改變細(xì)胞膜的通透性，加速染色劑進(jìn)入細(xì)胞，同時(shí)使染色質(zhì)中的DNA與蛋白質(zhì)分離，有利于DNA與染色劑結(jié)合。酒精在生物實(shí)驗(yàn)中的作用有以下四個(gè)方面酒精在生物實(shí)驗(yàn)中的作用有以下四個(gè)方面1.有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑酒精是能與水和大多數(shù)有機(jī)溶劑混

12、溶的親水性和脂溶性有機(jī)溶劑，是實(shí)驗(yàn)室常用的溶劑。其特點(diǎn)是在常溫常壓下呈液態(tài)，具有較大的揮發(fā)性，在溶解過(guò)程中，溶質(zhì)與溶劑的性質(zhì)均無(wú)改變。親水性的成分除蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、果膠、淀粉和部分多糖等外，大多能在乙醇中溶解。難溶于水的親脂性成分，在乙醇中的溶解度也較大。因此，利用酒精的這種特性在生物實(shí)驗(yàn)中常有下面幾種用途。1.1脫色劑酒精是一種常用的脫色試劑。在一些以顏色變化為觀察對(duì)象的實(shí)驗(yàn)中，必須將材料中會(huì)引起干擾作用的色素除去，即要進(jìn)行脫色處理以

13、免干擾對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的觀察。如在“探究葉綠體在光照下合成淀粉實(shí)驗(yàn)”中，將處理過(guò)的天竺葵葉片放入盛有酒精的小燒杯里，隔水加熱，使葉片褪色（破壞和溶解葉片中所含的色素）。這樣就可在滴加碘液后避免對(duì)觀察葉片顏色變化的干擾。1.2漂洗劑酒精是良好的有機(jī)漂洗劑。材料經(jīng)染色或相應(yīng)處理后會(huì)有一些染料或物質(zhì)附著在其表面，必須將材料表面的浮色等清洗掉才能避免對(duì)后續(xù)實(shí)驗(yàn)步驟以及實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察的干擾。對(duì)于不溶于水的物質(zhì)需用酒精漂洗。如在“脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)”中，用蘇丹

14、Ⅲ染液對(duì)脂肪組織進(jìn)行染色后，可用體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精來(lái)沖洗浮色，以免干擾對(duì)細(xì)胞內(nèi)脂肪顆粒的觀察。因?yàn)?0%酒精對(duì)脂肪組織沒(méi)有破壞作用并且容易揮發(fā)，且蘇丹Ⅲ染料在酒精溶解度較高，所以用50%的酒精作為洗去浮色的漂洗劑。1.3提取劑和層析劑酒精的溶解性能比較好，對(duì)細(xì)胞的穿透能力較強(qiáng)。能夠溶解各種色素和蛋白質(zhì)等物質(zhì)，且酒精無(wú)毒，方便操作，可用酒精作為提取和分離物質(zhì)的試劑。在“綠葉中色素的提取和分離實(shí)驗(yàn)”中，可以用酒精作為提取色素的試劑。利用

15、各種色素在層析液中溶解度的不同使色素隨層析液在濾紙上因擴(kuò)散速度差異而分離。用醫(yī)用酒精(體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精)作為層析液分離各種色素。在“DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)”中，采用酒精沉淀法，利用DNA不溶于酒精，而蛋白質(zhì)、脂肪及磷脂等能溶解其中，可以進(jìn)一步提出含雜質(zhì)較少的DNA絲狀物。2.固定劑固定劑酒精的脫水能力比較強(qiáng)，又能使蛋白質(zhì)變性硬化組織。是一般固定液中不可缺少的成分。用其作為簡(jiǎn)單固定劑使用時(shí)，常用于組織制片固定劑或組織保存劑。如在“

16、觀察植物細(xì)胞有絲分裂實(shí)驗(yàn)”中一般采用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸和體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精按體積比1：1混合而成的藥液作為解離試劑。鹽酸能夠使洋蔥細(xì)胞的細(xì)胞壁軟化，并使細(xì)胞間的中膠層物質(zhì)溶解，從而達(dá)到分離細(xì)胞的目的。酒精的作用是固定蛋白質(zhì)，使細(xì)胞的原生質(zhì)凝固，不發(fā)生變化，固定細(xì)胞的分裂相，以盡可能保持原來(lái)的結(jié)構(gòu)供觀察。酒精也可與其它試劑混合成復(fù)合固定劑，如卡諾固定液就是由無(wú)水酒精3份：冰醋酸1份配制而成，適用于一般植物組織和細(xì)胞的固定，常用于根

17、尖、花藥壓片及子房石蠟切片等。3.消毒劑消毒劑酒精是常用的外用消毒藥，具有消毒殺菌作用，常用于皮膚創(chuàng)傷清洗、注射、輸血、抽血以及手術(shù)前皮膚的消毒等。不同濃度的酒精其用途和作用也不同。70％～75％濃度殺菌作用最強(qiáng)，此濃度的酒精與細(xì)菌的滲透壓近似，在細(xì)菌表面蛋白未變性前能不斷地向菌體內(nèi)部滲入，使細(xì)菌所有蛋白脫水、變性凝固，最終殺死細(xì)菌，以達(dá)到消毒殺菌的目的。濃度低于70％，則滲透性降低，達(dá)不到滅菌消毒目的。高于體積分?jǐn)?shù)為75%濃度的酒精與