內生真菌降解多環(huán)芳烴菲研究.pdf

1、菲具有典型的PAHs結構，是構成多種致癌、致畸、致突變PAHs的基本結構單元，常作為微生物降解PAHs的研究模型。本研究嘗試從能夠降解木質素的內生真菌中篩選菲降解菌株，并將篩選的內生真菌與其共生植物聯(lián)合培養(yǎng)進行菲降解實驗，且對內生真菌降解菲的機理進行研究。 本實驗室前期研究分離出多株能夠降解木質素的內生真菌，在此研究工作的基礎上，本研究從中篩選菲降解菌株，篩選結果表明內生真菌B3(Phomopsissp.)、Y17(Cerato

2、basidumi sp．)能夠降解菲，降解效率分別達到2.95mg/d和8.23mg/d，目前無該屬真菌降解PAHs的報道。與最近十年文獻報道的菲降解真菌比較，菌株B3和Y17顯示出較強的競爭力，有望用于PAHs污染土壤的微生物修復。實驗結果同時也證明了我們起初的推測，即內生真菌中的確存在著可降解PAHs的菌株。 對植物內生真菌B3降解菲的條件進行研究。結果表明乳糖為碳源、蛋白胨為氮源、二者濃度均為10g/L、愈創(chuàng)木酚作為誘導物

3、時，B3菌株10天內對初始濃度為100mg/L菲的降解率達52.54％。菌株B3無LiP和MnP活力，只有Lac活力，但其--與B3降解菲無明顯關系。在菲濃度為500mg/L的情況下，B3生長未受太大影響，顯示出較高的菲耐受能力。進一步利用內生真菌B3與水稻的共生關系，將菌株B3與宿主植物水稻聯(lián)合培養(yǎng)，進行菲降解實驗，結果顯示B3和水稻對菲的降解起協(xié)同促進作用。實驗過程中還發(fā)現(xiàn)水稻感染內生真菌B3后，對菲脅迫的反應不同。水稻生長狀況、根

4、長抑制實驗、水稻幼根SOD酶活力變化等實驗結果說明菲對水稻有毒害作用，而當水稻感染內生真菌B3后，對菲脅迫起一定的緩解作用。 為了進一步探討內生真菌降解菲的機理，對菲高效降解菌株—Y17 (Ceratob-asidumi sp．)降解菲的機理進行研究。實驗結果表明菌株Y17具有較高的MnP酶活力和極低的LiP酶活力，但無Lac酶活力，MnP是菌株Y17主要的木質素降解酶。污染物菲的添加，極大的促進了 Y17分泌LiP和MnP。M

5、n<'2+>顯著的促進Y17分泌MnP，而NaN3抑制了Y17分泌MnP，但在MnP促進和抑制這兩種情況下，Y17對菲的降解未受太大影響，說明MnP并不是Y17降解菲的關鍵因素。研究還表明菌絲和新鮮培養(yǎng)基是Y17降解菲的關鍵因素，利用Y17進行生物修復必須滿足這兩個前提條件。借助于Gc-MS，對Y17降解菲的中間代謝產物進行了初步的鑒定，結果認為Y17降解菲產生多種中間代謝產物，推測Y17降解菲的過程復雜，Y17可能具有多種菲代謝途徑。