鼠傷寒沙門氏菌刺激對雞十二指腸上皮細胞增殖與凋亡的影響.pdf

1、小腸不僅是一個消化和吸收的場所，也是一個機體免疫的場所。小腸上皮細胞的增殖和凋亡的動態(tài)平衡，維持了腸黏膜屏障的完整性。臨床上沙門氏菌感染誘導腸炎，導致小腸上皮細胞的凋亡和增殖產生紊亂，小腸功能遭到破壞。哺乳動物中研究發(fā)現(xiàn)，沙門氏菌細胞壁的主要成分脂多糖(Lipopolysacride，LPS)可激活TLR4信號通路，促進小腸上皮細胞凋亡，同時抑制細胞增殖。然而，關于沙門氏菌感染時TLR4對雞小腸上皮細胞增殖與凋亡的影響還未見相關報道。因

2、此，本研究以1日齡科寶肉雞為研究對象，采用LPS或鼠傷寒沙門氏菌刺激誘導雞十二指腸上皮細胞的增殖與凋亡平衡紊亂，研究TLR4在雞十二指腸內的分布及表達變化規(guī)律，探索TLR4與鼠傷寒沙門氏菌感染破壞腸上皮細胞增殖與凋亡平衡間的關系。主要研究內容和結果如下:
　　1.LPS或鼠傷寒沙門氏菌刺激對雞十二指腸上皮細胞增殖的影響為了研究沙門氏菌刺激對雞十二指腸上皮細胞增殖的影響，本試驗采用LPS刺激模擬細菌感染，或采用鼠傷寒沙門氏菌感染，采

3、用免疫組織化學染色技術，分別研究了LPS刺激或鼠傷寒沙門氏菌刺激后PCNA在雞十二指腸內的分布及表達變化規(guī)律。研究結果顯示:PCNA主要分布于十二指腸的黏膜層，在黏膜下層、肌層和漿膜層也有分布，主要分布于細胞核中。黏膜層的上皮、固有層及腸腺附近分布有大量的陽性細胞。LPS或鼠傷寒沙門氏菌刺激后雞十二指腸內PCNA的表達量均降低。與對照組相比，LPS刺激后12h、72h和120h時，PCNA表達量顯著降低(p＜0.05);鼠傷寒沙門氏菌刺

4、激后6h、12h、24h、36h、72h和120h時，PCNA的表達量均顯著降低(p＜0.05)。以上研究結果表明，當鼠傷寒沙門氏菌侵入機體時，抑制腸上皮細胞增殖，損傷腸黏膜屏障功能。
　　2.LPS或鼠傷寒沙門氏菌刺激對雞十二指腸上皮細胞凋亡的影響為了研究沙門氏菌刺激對雞十二指腸上皮細胞凋亡的影響，本試驗采用LPS刺激模擬細菌感染，或采用鼠傷寒沙門氏菌感染，采用免疫組織化學染色技術，分別研究了LPS刺激或鼠傷寒沙門氏菌刺激后an

5、ti-DNA在雞十二指腸內的分布及表達變化規(guī)律。研究結果顯示:凋亡細胞主要分布于十二指腸的黏膜層，在黏膜下層、肌層和漿膜層也有分布。黏膜層的上皮、固有層及腸腺附近分布有大量的陽性細胞。LPS或鼠傷寒沙門氏菌刺激后雞十二指腸內anti-DNA的表達量均升高。與對照組相比，LPS刺激后12h和24h時，細胞凋亡顯著增強(p＜0.05);鼠傷寒沙門氏菌刺激后12h、24h和36h時，細胞凋亡顯著增強(p＜0.05)。以上研究結果表明，當鼠傷寒

6、沙門氏菌入侵機體時，促進腸上皮細胞凋亡，破壞腸黏膜屏障功能。
　　3.LPS或鼠傷寒沙門氏菌刺激對雞十二指腸內TLR4表達的影響為了研究沙門氏菌刺激對雞十二指腸上皮細胞內TLR4的影響，本試驗采用LPS刺激模擬細菌感染，或采用鼠傷寒沙門氏菌感染，采用免疫組織化學染色和Q-PCR技術，分別研究了LPS刺激或鼠傷寒沙門氏菌刺激后TLR4在雞十二指腸內的分布及表達變化規(guī)律。研究結果顯示:TLR4主要分布于十二指腸的黏膜層，在黏膜下層、肌

7、層和漿膜層較少分布。黏膜層的上皮、固有層及腸腺附近分布有大量的陽性細胞。LPS或鼠傷寒沙門氏菌刺激后雞十二指腸內TLR4的表達量均升高。與對照組相比，LPS刺激后2h、12h和72h時，TLR4的表達量顯著增多(p＜0.05);鼠傷寒沙門氏菌刺激后6h、12h、24h、36h和72h時，TLR4的表達量顯著增多(p＜0.05)。以上研究結果表明，當鼠傷寒沙門氏菌侵入機體時，可通過激活TLR4來破壞十二指腸上皮細胞增殖與凋亡平衡，影響腸黏