人參皂苷Rg1通過激活PI3K-Akt與ERK信號通路對抗6-OHDA的毒性作用.pdf

1、植物雌激素作為一類天然產(chǎn)品，具有類雌激素樣作用，可清除自由基和抗氧化。人參皂苷Rg1是人參的主要活性成分，近年來的研究顯示人參皂苷Rg1具有多種生理活性，特別是在中樞神經(jīng)中，Rg1具有神經(jīng)營養(yǎng)和神經(jīng)保護作用。在前期工作中，本實驗室已證實Rg1是一種新的植物雌激素，可以激活胰島素樣生長因子I受體信號途徑，能夠?qū)?-OHDA對多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞系MES23.5細(xì)胞的毒性作用，為進一步探討Rg1神經(jīng)保護作用的信號途徑，本研究應(yīng)用6-羥基多巴

2、(6-hydroxydopamine，6-OHDA)誘導(dǎo)MES23.5細(xì)胞損傷，采用MTT、實時RT-PCR及免疫印跡等多種評價方法，觀察Rg1對MES23.5細(xì)胞的保護作用及磷脂酰肌醇3激酶( phosphatidylinositol3 kinase，P13K)抑制劑LY294002或絲裂原活化蛋白激酶激酶(mitogen-activated protein kinase kinase，MEK)抑制劑PD98059的阻斷效應(yīng)。實驗結(jié)果

3、如下： 1.Rg1可對抗6-OHDA的毒性作用(P<0.05)，在10-8M濃度保護作用最明顯。 2.6-OHDA可明顯降低酪氨酸羥化酶(TH)基因和蛋白表達(dá)(P<0.05)，Rg1預(yù)保護可逆轉(zhuǎn)上述改變。 3.6-OHDA可明顯降低Bcl-2基因和蛋白表達(dá)(P<0.05)，Rg1預(yù)保護可逆轉(zhuǎn)上述改變。 4.6-OHDA可時間依賴式地降低MES23.5細(xì)胞磷酸化蛋白激酶B(Akt)的表達(dá)(P<0.01)，人

4、參皂苷Rg1預(yù)保護可明顯增強磷酸化Akt的表達(dá)(P<0.05)。 5.6-OHDA可時間依賴式地增強MES23.5細(xì)胞磷酸化細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)的表達(dá)(P<0.05)，人參皂苷Rg1預(yù)保護可明顯減弱磷酸化ERK的表達(dá)。 6.Rg1對抗6-OHDA的毒性作用可以被P13K抑制劑LY294002或MEK抑制劑PD98059所阻斷(P<0.01)。 以上結(jié)果表明人參皂苷Rg1可明顯對抗6-OHDA對MES23.