乳制品中非蛋白氮類物質的質譜分析方法研究.pdf

1、非法添加物會嚴重影響食品安全、危及人體健康。目前乳制品中危害最大、波及面最廣的非法添加物是非蛋白氮。因此，非蛋白氮的篩查技術手段的建立對乳制品監(jiān)管具有重要意義。
　　本研究利用液相色譜-三重四極桿質譜（LC-MS/MS）儀器，以QuEChERS方法為凈化手段，開展尿素、縮二脲、甲基脲、羥甲基脲、二羥甲基脲、異丁基二脲、六次甲基四胺、尿酸、馬尿酸、二氰二胺和三聚氰胺的檢測方法研究。
　　（1）研究過程
　　1）前處理

2、r>　　研究乙腈-水作為混合溶劑溶解提取乳制品中非蛋白氮，利用漩渦混合和超聲波輔助提取待測物，以QuEChERS方法凈化提取液的效果。
　　2）色譜分離
　　根據非蛋白氮類物質的結構特點，研究色譜分離條件，確定色譜柱和流動相組成。
　　3）質譜定性定量檢測
　　利用質譜多反應監(jiān)測對待測物進行檢測。首先通過分子結構特征研究11種非蛋白氮的母離子，然后根據母離子在一定碎裂電壓下的子離子組成確定定性定量離子對組成及多反

3、應監(jiān)測條件。
　　4）乳制品中非蛋白但類物質的監(jiān)測
　　采集市售生乳、酸牛乳、嬰兒配方乳粉以及乳粉，利用建立的方法研究不同乳制品中非蛋白類物質的含量，并與國家標準GB/T21704-2008進行比較以評價方法的可靠性。
　?。?）研究結論
　　1）前處理
　　實驗結果表明利用乙腈-水混合溶劑能夠有效提取非蛋白氮，再利用漩渦混合和超聲波輔助方法，最后以QuEChERS凈化提取液的方法能夠獲取良好的回收效果，方

4、法的回收率為75~93％。
　　2）色譜分離
　　利用乙腈-水（95+5，V/V，20 mmol/L乙酸銨，以乙酸調節(jié)pH=4）為流動相，利用HILIC親水色譜柱進行分離，11種物質能夠實現良好分離。
　　3）非蛋白氮類物質的定性定量離子
　　利用實驗獲得了11種非蛋白氮類物質的母離子，然后通過多反應監(jiān)測確定了11種非蛋白氮類物質的定性檢測離子對和監(jiān)測條件，以此作為定性定量檢測依據。
　　4）方法的技術指標

5、
　　方法在0.10～5.0 mg/L范圍呈現良好線性關系（相關系數R2：0.9964~0.9996）。非蛋白氮類物質檢測限范圍為0.2~0.8 mg/kg，利用QuEChERS凈化管凈化的方法進行凈化，不僅前處理時間大大縮短，同時具有良好的重復性和回收率，回收率為75~93%，精密度（n=6）為3.5~8.7%。
　　5）乳制品中非蛋白氮類物質的含量監(jiān)測
　　對乳粉、嬰幼兒配方乳粉、酸牛乳和生乳各15份進行了檢測。除

6、尿素、馬尿酸在乳粉、嬰幼兒配方乳粉和生乳中有不同程度的檢出外，其他非蛋白氮類物質均未檢出。乳粉中尿素含量為384~829 mg/kg；馬尿酸含量為23.4~46.9 mg/kg；嬰幼兒配方乳粉中尿素含量為298~885 mg/kg，馬尿酸含量為16.2~44.9 mg/kg；生乳中尿素含量為168~360 mg/kg，馬尿酸含量為6.7~26.8 mg/kg。
　　6）比對驗證
　　利用國家標準GB/T21704-2008進