雙組分蛋白質離子交換吸附行為研究.pdf

1、離子交換色譜是目前應用最廣泛的液相色譜技術，為了更好地指導離子交換色譜技術在蛋白質大分子分離純化中的實際應用，本文選取牛血清白蛋白(BSA)和牛血紅蛋白(Hb)作為雙組分模型蛋白，Q Sepharose FF作為離子交換介質，對其吸附行為進行了一系列的研究，主要包括以下幾個方面：
　　 1.通過不同pH值、離子強度、緩沖液體系和不同蛋白濃度比條件下的熱力學平衡研究，證明了雙組分吸附中的競爭行為的存在，BSA在吸附中占主導地位。B

2、SA的吸附主要受液相條件影響，而Hb的吸附主要由BSA的競爭吸附?jīng)Q定。雙組分蛋白離子交換次序吸附的研究證明吸附順序對蛋白質的競爭吸附有一定影響。
　　 2.用單組分空間質量作用模型(SMA模型)參數(shù)對不同條件下雙組分蛋白離子交換吸附等溫線進行擬合，其結果表明多組分SMA模型能夠用于雙組分蛋白競爭吸附平衡的描述，且對強吸附蛋白組分的擬合效果較好。對同一蛋白來說，多組分SMA模型在有利于其競爭吸附條件下的擬合精度提高，反之精度降低。

3、
　　 3.單雙組分動力學研究結果表明BSA的傳質擴散速率大于Hb。BSA在雙組分條件下的傳質擴散速率與單組分條件下相同，而Hb在雙組分中的傳質則進一步被BSA抑制，從而BSA先與吸附位點作用，Hb則只能與沒被BSA占據(jù)的位點作用。
　　 4.通過色譜穿透實驗實現(xiàn)了不同的雙組分蛋白濃度比的條件下蛋白混合溶液的高效分離，收集到的有高純度，高回收率的單組分Hb蛋白。
　　 本文通過對雙組分蛋白質離子交換吸附過程進行系