幾種廣西特色中草藥的毛細(xì)管電泳指紋圖譜研究.pdf_第1頁(yè)
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1、毛細(xì)管電泳(CE)因具有高效、快速、易自動(dòng)化、操作模式多、樣品用量少以及毛細(xì)管不易被污染等優(yōu)點(diǎn),目前已發(fā)展成為一種重要的分離分析技術(shù),在生物、化學(xué)、醫(yī)藥、環(huán)保和食品等領(lǐng)域中得到了廣泛應(yīng)用。本論文的主要目的是利用高效毛細(xì)管電泳技術(shù)建立幾種廣西特色中草藥的指紋圖譜,以及對(duì)藥物活性成分與人血清白蛋白(HAS)的相互作用進(jìn)行研究。 主要研究工作分為兩個(gè)部分,第一部分采用CE技術(shù),對(duì)羅漢果、兩面針、黃柏、山豆根四種中草藥的指紋圖譜進(jìn)行了詳

2、細(xì)的研究,包括第二章、第三章、第四章和第五章;第二部分即第六章,采用毛細(xì)管區(qū)帶電泳法(CZE)對(duì)鹽酸小檗堿、鹽酸巴馬汀、鹽酸藥根堿三種生物堿與HAS的相互作用進(jìn)行研究,測(cè)定了結(jié)合常數(shù)。論文的主要內(nèi)容如下: 1. 采用毛細(xì)管膠束電動(dòng)色譜法(MEKC),以含有13 mmol/L 十二烷基硫酸鈉(SDS)、15%乙腈的硼酸鹽溶液(pH 10.5)為電泳緩沖溶液,采用20 kV的運(yùn)行電壓,20 ℃的柱溫,203 nm的檢測(cè)波長(zhǎng),建立了羅

3、漢果的毛細(xì)管電泳指紋圖譜(CEFP)。以槲皮素為內(nèi)標(biāo),確定羅漢果的共有指紋峰為26個(gè)。該方法操作簡(jiǎn)單、精密度好,且所建立的CEFP具有較好的重現(xiàn)性,可用于羅漢果藥材的質(zhì)量控制。 2.采用非水毛細(xì)管電泳(NACE)技術(shù),以100 mmol/L NaAc的甲醇-水溶液(4+1, pH 5.0)為電泳緩沖溶液,20 kV的運(yùn)行電壓,18 ℃的柱溫,228 nm的檢測(cè)波長(zhǎng),建立了兩面針?biāo)幉牡姆撬?xì)管電泳指紋圖譜(NACEFP)。以氯化

4、白屈菜紅堿為內(nèi)標(biāo),確定兩面針NACE的共有指紋峰為14個(gè),并考察了方法的精密度和藥物提取液的穩(wěn)定性。評(píng)價(jià)了不同產(chǎn)地藥材的相似度,并比較其與變種毛兩面針之間的區(qū)別。 3. 采用NACE技術(shù),以pH 5.8的醋酸鹽-甲醇溶液為電泳緩沖溶液,25 kV的運(yùn)行電壓,20 ℃的柱溫,210 nm的檢測(cè)波長(zhǎng),建立了黃柏藥材的NACEFP。以氯化兩面針堿為內(nèi)標(biāo),確定黃柏的NACE共有指紋峰為13個(gè)。測(cè)定了10個(gè)產(chǎn)地黃柏的NACEFP,與對(duì)照黃

5、柏藥材NACEFP的相似度在0.718-0.982之間。該方法具有較好的精密度,各指紋峰相對(duì)遷移時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSDs)≤1.26%,相對(duì)峰面積的RSDs≤3.82%,為黃柏藥材的質(zhì)量控制提供可靠的依據(jù)。 4. 以100 mmol/L NaAc的甲醇-水(4+1)溶液(pH 4.8)為電泳緩沖溶液,25 kV的運(yùn)行電壓,20 ℃的柱溫,210 nm的檢測(cè)波長(zhǎng),建立了山豆根藥材的NACEFP。以鹽酸小檗堿為內(nèi)標(biāo),確定山豆根的

6、NACE共有指紋峰為11個(gè)。測(cè)定了10個(gè)產(chǎn)地山豆根的NACEFP,與對(duì)照NACEFP的相似度在0.870-0.984之間。該方法具有較好的精密度和重復(fù)性,各指紋峰相對(duì)遷移時(shí)間的RSDs小于0.80%,相對(duì)峰面積的RSDs不大于4.12%,為山豆根藥材的質(zhì)量控制提供可借鑒的依據(jù)。 5. 采用CZE技術(shù),以pH 7.4 濃度為10 mmol/L的磷酸鹽為電泳緩沖溶液,20 kV的運(yùn)行電壓,36.5 ℃的柱溫,210 nm的檢測(cè)波長(zhǎng),

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