喹諾酮類藥物的熒光分析及黃酮化合物與蛋白質相互作用的研究.pdf

1、熒光分析法具有靈敏度高、選擇性好等優(yōu)點，本文采用熒光光譜法建立了喹諾酮類藥物的熒光分析新方法，并研究了中草藥中黃酮類化合物染料木素、木犀草素與人血清白蛋白的相互作用。在系統(tǒng)查閱有關文獻資料的基礎上，進行了以下研究工作：
　　 （1）以稀土離子鋱為熒光探針，建立了簡單、靈敏的測定痕量諾氟沙星的熒光分析新方法。對測定條件進行了優(yōu)化：在pH=6.0的六次甲基四胺-鹽酸緩沖液中能量轉移最好；[Tb3+]/[Norfloxacin]達到4

2、0000:1時，Tb3+在488 nm處的相對熒光強度達到最大。這種方法檢出限低于直接熒光法十多倍；并測定了膠囊中諾氟沙星的含量，回收率為90.6％，并對反應機理進行了探討。
　　 （2）以稀土離子鋱為熒光探針，對左氧氟沙星-Tb3+體系的反應條件進行了優(yōu)化，建立了左氧氟沙星-Tb3+體系測定左氧氟沙星的新方法。方法線性范圍為1.0×10-8-5.0×10-6 mol·L-1，檢出限為4.5×10-9 mol·L-1。測定了膠囊

3、和注射液中藥物含量，回收率較高。對反應機理進行了探討，左氧氟沙星-Tb3+絡合物可使稀土離子Tb3+的L-M型特征熒光增敏，將左氧氟沙星寬帶、短波長熒光峰轉化為Tb3+銳線、長波長熒光峰，從而可能避免蛋白質等物質的干擾而對復雜生物樣品中的藥物進行測定。
　　 （3）用熒光光譜、同步熒光光譜和紫外吸收光譜方法，研究了木犀草素與人血清白蛋白（HAS）的相互作用。研究表明木犀草素對HAS有較強的熒光猝滅作用，根據(jù)不同溫度下木犀草素對H

4、AS的熒光猝滅作用，利用Stern-Volmer方程處理實驗數(shù)據(jù)，結果表明木犀草素對HAS的熒光猝滅作用屬于靜態(tài)猝滅。根據(jù)F?rster非輻射能量轉移理論計算了木犀草素與HAS間的結合常數(shù)和結合位點數(shù)，確定了木犀草素與HAS之間主要靠疏水作用力結合；求得了木犀草素與HAS間的結合距離r，熱力學數(shù)據(jù)表明二者主要靠疏水作用力結合，同時用同步熒光光譜探討了木犀草素對HAS構象的影響。
　　 （4）用熒光猝滅光譜、同步熒光光譜和紫外-可

5、見吸收光譜，研究了染料木素與人血清白蛋白（HAS）的相互作用。結果表明染料木素對HAS的熒光猝滅作用屬于二者形成復合物所引起的靜態(tài)猝滅；利用Stern-Volmer方程處理實驗數(shù)據(jù)，得到染料木素與HAS之間的結合常數(shù)KA為1.00×106（27 ℃）、1.66×106（37 ℃）和5.25×106（47 ℃）。根據(jù)F?rster非輻射能量轉移理論，求出了染料木素與HAS之間的結合距離為2.59 nm（27 ℃）、2.65 nm（37 ℃