簡介：第一部分吡喹酮（PZQ）衍生物P96及DW315對日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的生物學(xué)效應(yīng)觀察目的前期研究證明PZQ衍生物P96及DW315具有顯著的抗日本血吸蟲成蟲及童蟲效應(yīng)，本實驗體外觀察P96及DW315對日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的生物學(xué)效應(yīng)，探討P96及DW315作為抗日本血吸蟲候選新藥的潛在價值。方法單性日本血吸蟲尾蚴（70±5條）感染小鼠，21天后，用半數(shù)有效致死劑量（ED50，2598MGKG）PZQ對小鼠進(jìn)行灌胃給藥，每天一次，連續(xù)30天，停藥21天后，再給予小鼠治療劑量（200MGKG）PZQ，連續(xù)5天。停藥2周后肝門靜脈灌注收集蟲體，置DMEM培養(yǎng)液中培養(yǎng)，分別加入不同濃度PZQ、P96和DW315，作用16H（過夜）后換新鮮培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)72H，每24H體視顯微鏡下觀察、記錄一次蟲體活力和形態(tài)變化，評價誘導(dǎo)蟲體對藥物的敏感性。結(jié)果PZQ、P96和DW315體外抗未誘導(dǎo)日本血吸蟲成蟲的臨界致死濃度（蟲體經(jīng)藥物作用后72H活力降低率達(dá)90％的最低濃度）分別為14ΜMOLL、25ΜMOLL和45ΜMOLL。誘導(dǎo)蟲體對PZQ的敏感性顯著降低，臨界致死濃度是抗未誘導(dǎo)蟲體的8倍（112ΜMOLL）；而對P96的敏感性有一定的下降，臨界致死濃度是抗未誘導(dǎo)蟲體的4倍（100ΜMOLL）；對DW315的敏感性與未誘導(dǎo)蟲體相比則沒有明顯差異，臨界致死濃度仍為45ΜMOLL。結(jié)論經(jīng)PZQ持續(xù)壓力誘導(dǎo)的日本血吸蟲對PZQ具有明顯抗性，與P96及DW315相比存在顯著性差異（P第二部分鈣通道Β亞單位相關(guān)作用蛋白AHNAK在日本血吸蟲中的初步研究目的通過觀察AHNAK抗體拮抗PZQ體外抗日本血吸蟲成蟲生物學(xué)效應(yīng)，探討AHNAK蛋白是否是PZQ作用的重要靶分子。方法肝門靜脈灌注法收集感染小鼠體內(nèi)的日本血吸蟲成蟲，進(jìn)行體外培養(yǎng)，加入不同濃度（03、06、12、18、24ΜGML）AHNAK抗體，預(yù)孵育不同時間（0、1、2、4H）后，再加入PZQ，作用16H（過夜）后換液，繼續(xù)培養(yǎng)72H，每隔24H置體視顯微鏡下觀察、記錄一次蟲體存活數(shù)量和活力分值。結(jié)果AHNAK抗體預(yù)孵育1H，濃度為12ΜGML和18ΜGML時，對PZQ有明顯拮抗作用，蟲體72H存活率均高達(dá)80，活力降低率分別為711和644，與PZQ對照組相比，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P結(jié)論AHNAK抗體對PZQ的體外抗日本血吸蟲成蟲效應(yīng)有一定的拮抗作用，AHNAK抗體預(yù)孵育1H，濃度為12ΜGML是對PZQ的最佳拮抗方案，本研究結(jié)果為“鈣通道PZQ抗血吸蟲效應(yīng)靶點”假說提供了新的實驗依據(jù)，AHNAK蛋白在日本血吸蟲中的作用值得進(jìn)一步研究。第三部分日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的蛋白質(zhì)組學(xué)分析目的利用蛋白質(zhì)組學(xué)的方法和技術(shù)分離、鑒定PZQ抗性蟲體與未誘導(dǎo)蟲體之間的差異蛋白質(zhì)，探討PZQ抗血吸蟲效應(yīng)機制及潛在靶點。方法應(yīng)用PZQ抗日本血吸蟲ED50和治療劑量，使感染小鼠體內(nèi)的蟲體在持續(xù)藥物壓力下產(chǎn)生一定的抗藥性，收集抗性蟲體和未誘導(dǎo)蟲體，提取總蛋白，采用雙向凝膠電泳（2DPAGE）和液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（LCMSMS）技術(shù)篩選、鑒定兩種蟲體的差異表達(dá)蛋白質(zhì)。結(jié)果經(jīng)篩選、鑒定，PZQ抗性蟲體共有40種差異表達(dá)蛋白質(zhì)，其中有31種蛋白質(zhì)表達(dá)上調(diào)，6種蛋白質(zhì)表達(dá)下調(diào)，另有3種蛋白質(zhì)變化趨勢無法確定。表達(dá)上調(diào)的蛋白質(zhì)中有3種為兩種蟲體共有，有28種只在PZQ抗性蟲體蛋白質(zhì)雙向凝膠上篩選得到。這些蛋白分別歸類于細(xì)胞結(jié)構(gòu)及運動相關(guān)蛋白（9種）、應(yīng)激反應(yīng)相關(guān)蛋白（4種）、參與蟲體代謝的酶類（7種）、蛋白質(zhì)翻譯和結(jié)構(gòu)調(diào)節(jié)蛋白（5種）、離子調(diào)節(jié)蛋白（3種）和一些功能未知蛋白（12種）。結(jié)論PZQ持續(xù)壓力下可使日本血吸蟲蛋白質(zhì)水平發(fā)生明顯改變，提示PZQ持續(xù)壓力可能促進(jìn)或抑制了蟲體特定基因的表達(dá)，差異表達(dá)蛋白可能與藥物作用靶點有關(guān)。第四部分日本血吸蟲PZQ抗性蟲體的轉(zhuǎn)錄水平分析目的通過測定日本血吸蟲PZQ抗性蟲體與未誘導(dǎo)蟲體MRNA相對表達(dá)量，分析兩者在轉(zhuǎn)錄水平的差異，并結(jié)合蛋白質(zhì)水平的差異進(jìn)行綜合分析，為探索PZQ抗蟲機理、蟲體抗藥機制，研發(fā)新藥和疫苗，建立實驗基礎(chǔ)。方法收集PZQ抗性蟲體和未誘導(dǎo)蟲體，使用TRIZOL法分別抽提兩種蟲體的總MRNA，逆轉(zhuǎn)錄得到CDNA。根據(jù)差異蛋白質(zhì)登錄號在NCBI上搜索對應(yīng)基因序列，設(shè)計引物，采用實時熒光定量PCR技術(shù)對CDNA進(jìn)行相對定量，進(jìn)而分析兩種蟲體的轉(zhuǎn)錄水平差異。結(jié)果PZQ抗性蟲體中核糖體蛋白大亞基和鈣調(diào)節(jié)蛋白基因的MRNA相對表達(dá)量較未誘導(dǎo)蟲體均下降，組蛋白H2A和熱休克蛋白70基因的MRNA相對表達(dá)量升高，差異均具有顯著性統(tǒng)計學(xué)意義（P005）。所檢測的8種基因中有7種在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白質(zhì)水平的差異變化存在不一致性，只有組蛋白H2A基因的轉(zhuǎn)錄水平和蛋白質(zhì)水平的差異變化一致，均表達(dá)上調(diào)。結(jié)論經(jīng)PZQ壓力誘導(dǎo)的日本血吸蟲抗藥性蟲體可發(fā)生轉(zhuǎn)錄水平的改變，且在轉(zhuǎn)錄水平和蛋白質(zhì)水平發(fā)生的變化不完全一致。

簡介：四君子湯及其拆方對胃癌四君子湯及其拆方對胃癌SGC7901、BGC823細(xì)胞株側(cè)群細(xì)胞體外生物學(xué)特性的影響細(xì)胞株側(cè)群細(xì)胞體外生物學(xué)特性的影響（THEINFLUENCEOFSIJUNZITANGANDITSDEMOLITIONPARTYTOTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSINVITROOFGASTRICCANCERSGC7901,BGC823CELLLINESIDEPOPULATIONCELLS）論文類別學(xué)術(shù)研究型論文類別學(xué)術(shù)研究型作者姓名作者姓名朱超朱超指導(dǎo)教師姓名指導(dǎo)教師姓名錢軍錢軍申請學(xué)位級別申請學(xué)位級別碩士碩士學(xué)位授予單位學(xué)位授予單位蚌埠醫(yī)學(xué)院蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)科專業(yè)學(xué)科專業(yè)腫瘤學(xué)腫瘤學(xué)研究方向研究方向消化系統(tǒng)腫瘤消化系統(tǒng)腫瘤論文答辯時間論文答辯時間2015年05月學(xué)位授予日期學(xué)位授予日期2015年06月答辯委員會主席答辯委員會主席論文評閱人論文評閱人2015年05月分類號R7379密級學(xué)校代碼10367UDC616992編號學(xué)號20127431192學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明本人所呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下獨立進(jìn)行實驗研究工作所取得的成果，本論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或已經(jīng)獲取得的研究成果。在本論文撰寫中所引用其他研究者的研究內(nèi)容和成果時已在論文中給予特別標(biāo)注和明確說明。對本論文的實驗研究以及論文撰寫過程中給予幫助和建議等貢獻(xiàn)的其他人士，也已作了致謝說明。本人完全理解本聲明的法律責(zé)任，以及所涉及的結(jié)果將由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名日期年月日關(guān)于學(xué)位論文著作權(quán)的共享聲明根據(jù)中華人民共和國著作權(quán)法和高等院校知識產(chǎn)權(quán)管理條例，本學(xué)位論文，題目四君子湯及其拆方對胃癌SGC7901、BGC823細(xì)胞株側(cè)群細(xì)胞體外生物學(xué)特性的影響，四君子湯及其拆方對胃癌SGC7901、BGC823細(xì)胞株側(cè)群細(xì)胞體外生物學(xué)特性的影響，是研究生在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的職務(wù)作品，得到蚌埠醫(yī)學(xué)院相關(guān)部門科室的物質(zhì)技術(shù)和經(jīng)費支持，因此，本學(xué)位論文的著作權(quán)由研究生，導(dǎo)師和蚌埠醫(yī)學(xué)院三方共同享有，均享有署名權(quán)和使用權(quán)等權(quán)益；本學(xué)位論文成果歸屬蚌埠醫(yī)學(xué)院。根據(jù)國家學(xué)位授予條例，學(xué)校對本學(xué)位論文有使用權(quán)，包括保存本學(xué)位論文；因教學(xué)和科研的目的，保留在圖書館被查閱或借閱；學(xué)?？筛鶕?jù)國家規(guī)定將本學(xué)位論文送交國家有部門保留和使用。學(xué)校在公布本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容時，應(yīng)保障研究生和導(dǎo)師的署名權(quán)等權(quán)益。研究生和導(dǎo)師在公開發(fā)表本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容時必須保障學(xué)校的署名權(quán)等權(quán)益，即在發(fā)表論文時蚌埠醫(yī)學(xué)院及相關(guān)部門科室應(yīng)署名為作者單位。聲明人完全理解本聲明的法律責(zé)任。研究生簽名導(dǎo)師簽名日期年月日

簡介：授予單位代碼10089學(xué)號或申請?zhí)?5339中國圖書分類號R7342學(xué)術(shù)學(xué)位學(xué)術(shù)學(xué)位GLI對食管腺癌對食管腺癌OE19細(xì)胞生物學(xué)作用的體外實驗研究細(xì)胞生物學(xué)作用的體外實驗研究研究生高明敏高明敏導(dǎo)師王雷主任醫(yī)師主任醫(yī)師專業(yè)外科學(xué)外科學(xué)二級學(xué)院二級學(xué)院河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院2017年3月碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文HEBEIMEDICALUNIVERSITY目錄中文摘要1英文摘要4研究論文GLI對食管腺癌OE19細(xì)胞生物學(xué)作用的體外實驗研究前言8材料與方法10結(jié)果17附圖20附表22討論23結(jié)論25參考文獻(xiàn)25綜述GLI基因在HH信號通路中作用機制及與腫瘤的相關(guān)研究30致謝42個人簡歷44

簡介：碩士學(xué)位論文論文題目HNRNPD在食管癌中表達(dá)及生物學(xué)功能研究研究生姓名耿楊楊指導(dǎo)教師姓名曹建平張舒羽專業(yè)名稱放射醫(yī)學(xué)研究方向腫瘤放射生物學(xué)論文提交日期2015年5月

簡介：學(xué)校代碼學(xué)號或申請?zhí)柮芗壗饋喞笳фΥ箧軐I(yè)博士學(xué)位論文造血祖細(xì)胞激酶HPKL對非特殊型浸潤性乳腺癌生物學(xué)特征影響及其分子機制研究作者姓名王嬌嬌導(dǎo)師姓名王留興教授專業(yè)學(xué)位名稱腫瘤學(xué)培養(yǎng)院系鄭州1大學(xué)第一附屬醫(yī)院完成時間2017年12月原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者姍魄如1年2月』日學(xué)位論文使用授權(quán)聲明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的論文及相關(guān)的職務(wù)作品，知識產(chǎn)權(quán)歸屬鄭州大學(xué)。根據(jù)鄭州大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)鄭州大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或者其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。本人離校后發(fā)表、使用學(xué)位論文或與該學(xué)位論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時，第一署名單位仍然為鄭州大學(xué)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。學(xué)位論文作者王肼日期≥口一年J工月5日

簡介：分類號分類號R4577密級一般ＵＤＣＵＤＣ61615編號2013213960廣州醫(yī)科大學(xué)廣州醫(yī)科大學(xué)2013級碩士學(xué)位論文級碩士學(xué)位論文CD45RA陽性細(xì)胞去除后的外周血干細(xì)胞產(chǎn)物體外生物學(xué)活性研究陽性細(xì)胞去除后的外周血干細(xì)胞產(chǎn)物體外生物學(xué)活性研究研究生張璐導(dǎo)師王順清主任醫(yī)師申請學(xué)位級別研究生張璐導(dǎo)師王順清主任醫(yī)師申請學(xué)位級別醫(yī)學(xué)碩士年級年級二零一三級學(xué)科專業(yè)學(xué)科專業(yè)內(nèi)科學(xué)研究方向研究方向細(xì)胞免疫治療論文提交日期論文提交日期2016年5月論文答辯日期論文答辯日期2016年5月學(xué)位類型學(xué)位類型醫(yī)學(xué)科學(xué)學(xué)位學(xué)位授予單位學(xué)位授予單位廣州科大學(xué)導(dǎo)師單位導(dǎo)師單位廣州醫(yī)科大學(xué)附屬廣州市第一人民醫(yī)院答辯委員會主席評議人答辯委員會主席評議人二零一六年五月目錄目錄英文縮略詞表英文縮略詞表1中文摘要中文摘要3英文摘要英文摘要6前言前言9試劑與材料試劑與材料11研究方法及步驟研究方法及步驟14結(jié)果結(jié)果20討論討論29參考文獻(xiàn)參考文獻(xiàn)32全文結(jié)論全文結(jié)論35綜述綜述36研究生期間參與科研及發(fā)表論文研究生期間參與科研及發(fā)表論文45致謝致謝46學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明學(xué)位論文獨創(chuàng)性聲明47學(xué)位論文知識產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明學(xué)位論文知識產(chǎn)權(quán)權(quán)屬聲明47學(xué)位論文使用授權(quán)聲明學(xué)位論文使用授權(quán)聲明47

簡介：西南醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文中圖分類號中圖分類號R7342碩士學(xué)位論文姜黃素聯(lián)合紫杉醇對人肺腺癌姜黃素聯(lián)合紫杉醇對人肺腺癌A549細(xì)胞株細(xì)胞株生物學(xué)效應(yīng)的影響生物學(xué)效應(yīng)的影響院（系）、所院（系）、所臨床醫(yī)學(xué)院研究生姓名研究生姓名衛(wèi)佳麗學(xué)科、專學(xué)科、專業(yè)內(nèi)科學(xué)導(dǎo)師姓導(dǎo)師姓名鄧述愷教授學(xué)位類型學(xué)位類型專業(yè)學(xué)位二〇一七年四月〇一七年四月西南醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文1姜黃素聯(lián)合紫杉醇對人肺姜黃素聯(lián)合紫杉醇對人肺腺癌A549細(xì)胞株生物學(xué)效應(yīng)的影響細(xì)胞株生物學(xué)效應(yīng)的影響摘要目的通過體外研究姜黃素（CURCUMIN）聯(lián)合紫杉醇（PACLITAXEL，PTX）對人肺腺癌A549細(xì)胞的作用，探討兩藥聯(lián)合對A549細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)的影響，并探討其可能的機制。方法（1）人肺腺癌A549細(xì)胞的培養(yǎng)以含10胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基，置于飽和濕度、CO2濃度為5、溫度為37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。（2）分組及處理設(shè)置對照組（不加入任何藥物）、DMSO組、姜黃素組、紫杉醇組、姜黃素聯(lián)合紫杉醇組，當(dāng)細(xì)胞培養(yǎng)至對數(shù)期處理后，DMSO組給予與姜黃素組同濃度的DMSO溶液，姜黃素組給予姜黃素濃度為20ΜMOLL，紫杉醇組給予紫杉醇濃度為4NMOLL，聯(lián)合組姜黃素濃度為20ΜMOLL，紫杉醇濃度為4NMOLL分別處理。（3）MTT法分別計算紫杉醇及姜黃素的IC50取對數(shù)期A549細(xì)胞接種于96孔板，貼壁生長24小時后分別加入濃度為05NMOLL、1NMOLL、2NMOLL、4NMOLL、8NMOLL的紫杉醇，濃度為5UMOLL、10UMOLL、20UMOLL、40UMOLL、80UMOLL的姜黃素后繼續(xù)培養(yǎng)48小時，檢測各濃度的IOD值，并計算紫杉醇及姜黃素IC50（半數(shù)抑制濃度）。（4）MTT實驗取對數(shù)期A549細(xì)胞接種于96孔板，貼壁生長24小時后按分組條件處理后繼續(xù)培養(yǎng)48小時，檢測各組IOD值，計算增殖抑制率及兩藥聯(lián)合的Q值。（5）細(xì)胞周期及凋亡檢測將A549細(xì)胞培養(yǎng)至對數(shù)期，按分組條件處理后繼續(xù)培養(yǎng)48H，采用流式細(xì)胞儀分別檢測各組細(xì)胞周期分布及細(xì)胞凋亡率。（6）將A549細(xì)胞接種于6孔板，待細(xì)胞單層鋪滿板底時進(jìn)行劃痕后，按分組條件處理，繼續(xù)培養(yǎng)48小時觀察細(xì)胞遷移情況，并計算各組細(xì)胞遷移距離。（7）制好MATRIGEL膜后，取對數(shù)期A549細(xì)胞制成無血清細(xì)胞懸液加入TRANSWELL小室上室，按分組條件加入對應(yīng)藥物處理后48小時，取出小室

簡介：點擊查看更多板栗花黃酮的提取、純化及其生物學(xué)功能研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文學(xué)術(shù)學(xué)術(shù)學(xué)位學(xué)位2017年3月LNCNCRNARNACARLOCARLO5對食管對食管癌生物學(xué)特性的影響生物學(xué)特性的影響及其作用機制其作用機制研究研究研究生生崔雯萱崔雯萱導(dǎo)師師單保恩單保恩教授趙連梅連梅副研究員副研究員專業(yè)業(yè)臨床檢驗診斷學(xué)臨床檢驗診斷學(xué)二級學(xué)院二級學(xué)院河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院學(xué)號或申請?zhí)枌W(xué)號或申請?zhí)?0142426中國圖書中國圖書分類分類號R7351HEBEIMEDICALUNIVERSITY目錄中文摘要1英文摘要5英文縮寫11研究論文LNCRNACARLO5對食管癌細(xì)胞生物學(xué)特性的影響及其作用機制研究引言12第一部分CARLO5在食管癌組織和細(xì)胞中的表達(dá)及對其生物學(xué)特性的影響前言14材料與方法15結(jié)果25附圖32附表48討論49小結(jié)50參考文獻(xiàn)50第二部分CARLO5對食管癌細(xì)胞作用機制研究前言54材料與方法55結(jié)果68附圖81附表113討論114小結(jié)117參考文獻(xiàn)118第三部分CARLO5對食管癌細(xì)胞裸鼠種植瘤的影響前言122材料與方法122學(xué)號或申請?zhí)枌W(xué)號或申請?zhí)?0132433中國圖書分類號中國圖書分類號R75823

簡介：點擊查看更多華南地區(qū)艱難梭菌流行病學(xué)研究與新型分子生物學(xué)檢測技術(shù)評估.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：授予單位代碼10089學(xué)號或申請?zhí)?0142428中國圖書分類號R7351學(xué)術(shù)學(xué)位學(xué)術(shù)學(xué)位SNA42在食管癌組織中的表達(dá)在食管癌組織中的表達(dá)和生物學(xué)和生物學(xué)功能及其功能及其作用作用機制研究機制研究研究生生單亞楠單亞楠導(dǎo)師師單保恩單保恩教授教授趙連梅趙連梅副研究員副研究員專業(yè)業(yè)臨床檢驗診斷學(xué)臨床檢驗診斷學(xué)二級學(xué)院二級學(xué)院河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院2017年3月碩士學(xué)位論文HEBEIMEDICALUNIVERSITY目錄中文摘要1英文摘要5英文縮寫11研究論文SNA42在食管癌組織中的表達(dá)和生物學(xué)功能及其作用機制研究引言12第一部分SNA42在食管癌組織、外周血和細(xì)胞系中的表達(dá)前言14材料與方法14結(jié)果20附圖22附表24討論26小結(jié)27參考文獻(xiàn)27第二部分SNA42對食管癌細(xì)胞生物學(xué)行為的影響及其作用機制研究前言29材料與方法29結(jié)果38附圖53附表73討論78小結(jié)82參考文獻(xiàn)82第三部分敲低SNA42基因表達(dá)對裸鼠體內(nèi)食管癌細(xì)胞成瘤能力作用研究前言85材料與方法85

簡介：目的探究2013年～2015年粵東地區(qū)兒童重癥監(jiān)護(hù)病房中鼻病毒感染的流行情況及分子生物學(xué)特征。方法⑴應(yīng)用巢式RTPCR技術(shù)，對咽拭子標(biāo)本行鼻病毒5’UTR及VP4VP2基因核苷酸序列擴增，并對陽性產(chǎn)物進(jìn)行核苷酸序列測定。⑵對核苷酸序列測定明確為鼻病毒的咽拭子標(biāo)本，采用多重PCR方法行呼吸道合胞病毒、腺病毒、甲型流感病毒、乙型流感病毒、副流感病毒、人偏肺病毒、冠狀病毒、甲型流感病毒H1N1、季節(jié)性H3N2病毒、人博卡病毒、肺炎支原體和肺炎衣原體檢測。⑶對鼻病毒檢測陽性病例的臨床資料進(jìn)行統(tǒng)計分析。結(jié)果①743例咽拭子標(biāo)本中鼻病毒陽性186例，總陽性率為2503％，其中A型鼻病毒97例（5215），B型鼻病毒16例（860），C型鼻病毒42例（2258），未分型31例（1667）。②97例A型鼻病毒陽性標(biāo)本中，合并其他病毒檢出26例（2680）其中二重檢出24例，三重1例（HRV、PIV、BOV），四重1例（HRV、RSV、PIV、INFB）。16例B型鼻病毒陽性標(biāo)本中，合并其他病毒檢出4例（2500），均為二重檢出。42例C型鼻病毒陽性標(biāo)本中，二重檢出7例（2467），未見三、四重檢出。③A型鼻病毒在2013年檢出高峰為春夏季（1636、1463）、2014年為秋冬季（1522、1266）、2015年為春秋季（1512、1695）；C型鼻病毒在2013年（638、735）、2014年（1087、759）、2015年（847、714）檢出高峰均為秋冬季。④97例A型鼻病毒陽性患兒年齡介于1個月～11歲（中位年齡為8個月），在結(jié)論⑴鼻病毒檢測率高，可能是重癥感染的病原體之一。⑵C型鼻病毒季節(jié)流行性可能較A型鼻病毒明顯。⑶鼻病毒在粵東地區(qū)存在多個基因型和血清型共同流行，A型鼻病毒為優(yōu)勢流行基因型。⑷不同基因型鼻病毒間具有較高的遺傳性變異性。

簡介：單位代碼單位代碼10475學(xué)號學(xué)號104753121106分類號分類號R966碩士學(xué)位論文PTBP1在結(jié)腸癌中的表達(dá)及生物學(xué)作用在結(jié)腸癌中的表達(dá)及生物學(xué)作用學(xué)科、專業(yè)微生物與生化藥學(xué)研究方向腫瘤表觀遺傳學(xué)分子機制的研究申請學(xué)位類別醫(yī)學(xué)碩士學(xué)位申請人李小娜指導(dǎo)教師時小燕副教授劉晉祎教授二〇一五年五月THEEXPRESSIONBIOLOGICALFUNCTIONOFPTBP1INCOLONCANCERADISSERTATIONSUBMITTEDTOTHEGRADUATESCHOOLOFHENANUNIVERSITYINPARTIALFULFILLMENTOFTHEREQUIREMENTSFTHEDEGREEOFMASTEROFMEDICINEGRADUATEXIAONALISUPERVISPROFXIAOYANSHIJINYILIUDATEMAY2015

簡介：第一部分血清MIRNAS作為肺結(jié)核病新分子標(biāo)志物的篩選與鑒定研究背景結(jié)核病TUBERCULOSIS，TB是由結(jié)核分枝桿菌（MYCOBACTERIUMTUBERCULOSIS，MTB）引起的慢性感染性疾病，可侵及許多臟器，以肺部結(jié)核PULMONARYTUBERCULOSIS，PTB感染最為常見，占各器官結(jié)核病總數(shù)的8090％，發(fā)展成為肺結(jié)核病。肺結(jié)核病是一種嚴(yán)重威脅人類健康的疾病之一。肺結(jié)核病防治最突出的難點是缺乏疾病特異性的早期診斷標(biāo)志物，無法獲得早期診斷，導(dǎo)致肺結(jié)核病高發(fā)和死亡率的上升。為此，迫切需要研究肺結(jié)核病特異生物學(xué)標(biāo)志物，建立一種快速、敏感、高效的肺結(jié)核病診斷和鑒別的新方法，防止肺結(jié)核病蔓延。本研究從血清MIRNAS的表達(dá)譜中，篩選能作為肺結(jié)核病生物標(biāo)志物，建立血清MIRNA組合物，作為臨床診斷的潛在新分子標(biāo)志物。研究方法本研究收集血清樣本326例，其中健康對照者108例，肺結(jié)核病患者128例，鑒別診斷組疾病患者90例，包括肺癌、肺炎和慢性阻塞性病患者各30例。應(yīng)用SOLEXA測序技術(shù)進(jìn)行初步篩查，檢測20例肺結(jié)核病患者和20例健康對照者中血清MIRNAS應(yīng)用熒光定量PCR方法，在108例肺結(jié)核病患者、88例健康對照者，以及90例鑒別診斷組疾病患者血清樣本中驗證差異表達(dá)的血清MIRNAS通過ROC曲線和LOGISTIC回歸模型分析，對單個血清MIRNAS和MIRNAS組合對肺結(jié)核病診斷的靈敏度和特異性進(jìn)行比較和分析最后應(yīng)用預(yù)測MIRNAS調(diào)控的靶基因和全基因組轉(zhuǎn)錄概況，構(gòu)建與肺結(jié)核病相關(guān)的靶基因和MIRNAS的網(wǎng)絡(luò)圖。研究結(jié)果應(yīng)用SOLEXA測序技術(shù)檢測肺結(jié)核病患者和健康對照者的血清MIRNAS，在肺結(jié)核病患者中，選擇具有顯著性差異的15個血清MIRNAS，其中10個血清MIRNAS表達(dá)量上調(diào)，5個血清MIRNAS表達(dá)量下調(diào)通過熒光定量PCR方法發(fā)現(xiàn)，在肺結(jié)核病患者和健康對照者中，有6個血清MIRNAS（HSAMIR378、HSAMIR4835P、HSAMIR22、HSAMIR29C、HSAMIR101和HSAMIR320B）具有顯著性差異（P＜0001）。并且在肺結(jié)核患者和鑒別診斷組之間進(jìn)行比較均具有顯著性差異P＜005通過對這6個血清MIRNAS單個的ROC曲線進(jìn)行分析，顯示單個血清MIRNAS的AUC在0702到0880之間通過LOGISTIC回歸模型方法計算6個血清MIRNAS組合物的AUC為098295％CI，09290998，靈敏度為950％和特異性為918％。MIRNASGENE網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)圖顯示MIRNAS可能是調(diào)控機體的免疫通路相關(guān)基因，參與肺結(jié)核病的發(fā)生過程。結(jié)論1建立SOLEXA測序技術(shù)結(jié)合QRTPCR檢測技術(shù)，可快速穩(wěn)定靈敏地構(gòu)建肺結(jié)核血清MIRNAS指紋圖譜檢測技術(shù)2篩選了肺結(jié)核病相關(guān)特異的6個血清MIRNAS，為建立肺結(jié)核病臨床早期快速特異診斷的標(biāo)準(zhǔn)，提高肺結(jié)核病的防治水平奠定基礎(chǔ)3鑒定和構(gòu)建血清MIRNAS組合可能是肺結(jié)核病的診斷潛在的新分子標(biāo)志物，為進(jìn)一步研究MIRNAS在肺結(jié)核病中的致病機制奠定基礎(chǔ)。第二部分MIR146A，MIR149，MIR196A2和MIR499SNPS與中國維吾爾族、哈薩克族和南方漢族人群肺結(jié)核病易感性的研究研究目的MIRNAS是一類非編碼RNA，以MRNA為靶標(biāo)并抑制MRNA表達(dá)蛋白。單核苷酸多態(tài)性發(fā)生在MIRNAS的前體中，通過影響MIRNAS的表達(dá)或者成熟導(dǎo)致其正常功能的發(fā)揮，并且可能通過修飾MIRNAS調(diào)控影響表型類型和疾病易感性。人類MIRNAS基因中的數(shù)個SNP可能影響MIRNAS的生物合成和功能，可能參與肺結(jié)核病的發(fā)生機制。本實驗首次研究MIR146AC＞G、MIR149T＞C、MIR196A2T＞C和MIR499A＞GSNPS位點與中國維吾爾族、哈薩克族和南方漢族人群肺結(jié)核病易感性，揭示這4個MIRNASSNPS位點基因可能是肺結(jié)核病的候選易感基因。研究方法應(yīng)用PCRPFLR方法分析SNPS的分布頻率。本研究共收集654例南方漢族人群血樣（健康對照組300例，肺結(jié)核病組354例）、662例維吾爾族人群血樣（健康對照組361例，肺結(jié)核病組301例）和612例哈薩克族人群血樣（健康對照組361例，肺結(jié)核病組251例）。對基因型及基因頻率分布進(jìn)行檢測，并對遺傳模式和連鎖不平衡進(jìn)行分析。研究結(jié)果在維吾爾族人群中MIR499A＞GSNP位點的等位基因AP0003156395％CI，11622103和基因型GG型P0001534495％CI，18031583在肺結(jié)核病組和健康對照組之間存在顯著性差異在年齡和性別校正后，發(fā)現(xiàn)MIR499A＞GSNP位點在共顯性P0001453795％CI，1811592、顯性（P002914795％CI，104209）、隱性（P7E0449595％CI，1681455）和加性模式（P0002715795％CI，116211）下與肺結(jié)核病存在顯著相關(guān)性連鎖不平衡分析，發(fā)現(xiàn)構(gòu)建的單體型CTCC與肺結(jié)核病的發(fā)生具有顯著相關(guān)性（P004471995％CI，1015114）MIR146AC＞G、MIR149T＞C和MIR196A2T＞CSNPS位點的等位基因頻率和基因型在肺結(jié)核病組和健康對照組之間的分布均無顯著性差異P＞005。在哈薩克族人群中，MIR146AC＞G位點的等位基因GP002313395％CI，104169和CC型（P001318495％CI，114298）在兩組之間存在顯著性差異同時MIR196A2T＞CSNP位點的等位基因CP000807395％CI，058092和基因型TT型（P001305495％CI，033088）在兩組之間存在顯著性差異經(jīng)年齡和性別校正后，發(fā)現(xiàn)MIR146AC＞GSNP位點在共顯性P001918795％CI，115303、隱性P000518495％CI，120281和加性模式P002213395％CI，104169下與肺結(jié)核病存在顯著相關(guān)性MIR196A2T＞CSNP位點在共顯性P002905495％CI，033088、顯性（P001406595％CI，046092）和加性模式P0008307395％CI，058092下與肺結(jié)核病存在顯著相關(guān)性MIR149T＞C和MIR499A＞GSNPS位點的基因型頻率在健康對照組與肺結(jié)核病組之間的分布均無顯著性差異P＞005。在南方漢族人群中，構(gòu)建的單體型TCCCP004402395％CI005096和CCCTP002400395％CI001063與肺結(jié)核病的保護(hù)效應(yīng)具有顯著相關(guān)性。結(jié)論1利用病例對照方法，結(jié)合統(tǒng)計學(xué)分析，首次對MIR499A＞G、MIR146AC＞G、MIR149T＞C和MIR196A2T＞CSNPS位點與中國維吾爾族、哈薩克族和南方漢族人群結(jié)核病的易感性進(jìn)行關(guān)聯(lián)研究2MIR499A＞GSNP位點與維吾爾族人群肺結(jié)核病的易感性相關(guān)，可能增加肺結(jié)核病的發(fā)生風(fēng)險MIR146AC＞G、MIR149T＞C和MIR196A2T＞CSNPS與維吾爾族人群肺結(jié)核病的不存在相關(guān)性3MIR146AC＞G和MIR196A2T＞CSNPS位點與哈薩克族人群肺結(jié)核病發(fā)生的相關(guān)MIR149T＞C和MIR499A＞GSNPS與哈薩克族人群肺結(jié)核病的不存在相關(guān)性4MIR146AC＞G、MIR149T＞C、MIR196A2T＞C和MIR499A＞GSNPS位點與中國南方漢族肺結(jié)核病易感不存在相關(guān)性。提示MIRNASNPS與肺結(jié)核易感具有種族差異性。第三部分在中國維吾爾族、哈薩克族和南方漢族人群中的MRC1基因多態(tài)性與肺結(jié)核病易感性的研究研究背景機體識別結(jié)核分枝桿菌并介導(dǎo)免疫應(yīng)答主要依賴T淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞等固有免疫細(xì)胞表面的模式識別受體PATTERNRECOGNITIONRECEPTS，PRRS。MRC1基因編碼的PRRS家族的甘露糖受體，屬于C型凝集素超家族成員，可通過胞外區(qū)識別和結(jié)合結(jié)核分枝桿菌、遞呈抗原和保持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定中發(fā)揮作用。目前尚沒有MRC1基因SNPS與結(jié)核病易感性報道。本實驗研究中國新疆地區(qū)維吾爾族、哈薩克族和南方漢族人群MRC1基因第7號外顯子基因多態(tài)性與肺結(jié)核病易感性，揭示MRC1基因可能是肺結(jié)核病的候選易感基因。研究方法應(yīng)用PCR和DNA測序技術(shù)，對中國新疆地區(qū)595例維吾爾族人群血樣（健康對照組345例，肺結(jié)核病組250例）、513例哈薩克族人群血樣（健康對照組325例，肺結(jié)核病組188例）和454例南方漢族人群血樣（健康對照組226例，肺結(jié)核病組230例）MRC1基因第7號外顯子的6個單核苷酸多態(tài)性（G1186A、G1195A、T1212C、C1221G、C1303T和C1323T）基因型及基因頻率分布進(jìn)行檢測，并對6個位點進(jìn)行連鎖不平衡分析。研究結(jié)果研究發(fā)現(xiàn)在維吾爾族人群中MRC1基因的G1186A位點的等位基因G的分布頻率在肺結(jié)核病組0464中低于健康對照組0536，并且在維吾爾族肺結(jié)核病組和健康對照組之間的分布具有顯著性差異P002912995％CI，102163基因型分析發(fā)現(xiàn)MRC1基因的G1186A位點基因型AA型在肺結(jié)核病組的頻率低于健康組，在兩組之間也存在顯著性差異P003716695％CI，105261在年齡和性別校正后，MRC1基因的G1186A位點在加性模式下與肺結(jié)核病存在相關(guān)性P003912795％CI，101160。從MRC1基因SNPS位點的連鎖不平衡分析，發(fā)現(xiàn)構(gòu)建的GGTCCT單體型P003407595％CI，057098和GGTCCC單體型P004305795％CI，033098與肺結(jié)核病存在顯著的相關(guān)性，其余5個SNP位點G1195A、T1212C、C1221G、C1303T和C1323T與肺結(jié)核病的易感性不存在顯著相關(guān)性P＞005。在哈薩克族人群中發(fā)現(xiàn)MRC1基因的6個SNPS位點的等位基因頻率和基因型頻率在肺結(jié)核病組和健康對照組之間的分布均無顯著性差異P＞005。在漢族人群中MRC1基因的G1186A等位基因G的分布頻率在肺結(jié)核病組中高于正常健康組，兩組間分布存在顯著差異（P002307695％CI，057095）?；蛐头治鲆脖砻髟撐稽c的AG型在漢族人群正常健康組與肺結(jié)核病存在顯著相關(guān)性P0007605595％CI，036085。在年齡和性別校正后，G1186A位點在顯性P0005705795％CI，038085、超顯性P003906895％CI，047098和加性模式（P00307595％CI，058097）下，與肺結(jié)核病存在顯著相關(guān)性。而其它5個SNP位點G1195A、T1212C、C1221G、C1303T和C1323T與肺結(jié)核病無相關(guān)性P＞005。結(jié)論1利用病例對照方法，結(jié)合統(tǒng)計學(xué)分析，首次對MRC1基因第7號外顯子區(qū)域的6個SNPS位點與中國維吾爾族、哈薩克族和南方漢族人群結(jié)核病的易感性進(jìn)行關(guān)聯(lián)研究2MRC1基因的G1186A位點與維吾爾族人群肺結(jié)核病的易感性相關(guān)，可能增加肺結(jié)核病發(fā)病率可能是南方漢族人群肺結(jié)核的保護(hù)因子，并且可能減少中國漢族人群感染肺結(jié)核病的風(fēng)險與哈薩克族肺結(jié)核病的易感性沒有關(guān)聯(lián)3MRC1基因的G1195A、T1212C、C1221G、C1303T和C1323TSNPS與中國維吾爾族、哈薩克族和南方漢族肺結(jié)核病均不存在顯著的相關(guān)性。結(jié)果表明，肺結(jié)核病的易感性可能與遺傳因素造成的個體差異密切相關(guān)，同時為闡明中國人群肺結(jié)核病的發(fā)病機制，提供了新的實驗依據(jù)。

簡介：分類號R774．1密級公開HESCS來源視杯樣組織中C．KIT／SSEA．4．祖細(xì)胞的細(xì)胞生物學(xué)特性研究THECELLULARBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFCKIT／SSEA4PROGENITORCELLSDERIVEDFROMTHEHESCSSELFORGANIZEDOPTICCUPS作者姓名付彩云學(xué)科專業(yè)眼科學(xué)導(dǎo)師黃厚賦副教授指導(dǎo)教師陰正勤、徐海偉教授答辯委員會主席彩／以乏／論文答辯日期一O一五年五月二十六日院校地址北京市復(fù)興路28號郵政編碼100853◆本研究獲以下項目資助國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃973計劃人胚胎干細(xì)胞分化為眼細(xì)胞治療的安全性、有效性及其機制項目編號2013CB967002◆本研究工作依托單位第三軍醫(yī)大學(xué)全軍眼科中心