簡介：第一章傳染病和免疫,第二節(jié)免疫與計劃免疫,第一課時人體的三道防線和免疫的類型,1．抗原和抗體1抗原是一類能引起人體免疫器官和免疫細胞產(chǎn)生抗體的物質(zhì)?？乖峭鈦淼模皇亲陨淼?，如病菌、病毒和其他的病原微生物、異體血液和某些藥物都是抗原。2抗體是指受到抗原刺激后產(chǎn)生的能與抗原特異性結(jié)合且具有特殊抗病能力的蛋白質(zhì)免疫球蛋白。這種具有免疫功能的蛋白質(zhì)存在于血液、淋巴液和組織液中。3抗體和相應的抗原相結(jié)合，可以促進白細胞的吞噬作用將抗原消除，使抗原失去致病作用。4抗體是人體自身產(chǎn)生的，保護人體自身的蛋白質(zhì)，抗體產(chǎn)生后在體內(nèi)存留的時間不同，如天花病毒抗體會永久的存留，但感冒病毒抗體只能存留短暫的時間。5一種抗體只能抵抗一種抗原，而且一種抗體只能受相對應的抗原刺激后形成。,2．病原體和抗原的關(guān)系病原體屬于抗原，但抗原不一定是病原體，如進入人體能致病的異物、癌細胞以及異體移植的器官等，對于人體來說都屬于抗原。3．區(qū)分特異性免疫和非特異性免疫一是看其獲得途徑，是生來就有的還是后天形成的；二是看作用范圍；是對多種病原體起作用，還是針對特定的病原體或異物起作用。,1．能引起人體產(chǎn)生抗體的物質(zhì)都是抗原。如花粉、異型紅細胞等。2．免疫功能并不是越強越好。免疫過強，人體容易發(fā)生過敏反應、排斥反應。,知識點一人體的三道防線1．第一道防線,皮膚,黏膜,病原體,殺菌,清掃異物,2．第二道防線,殺菌物質(zhì),吞噬細胞,溶菌酶,吞噬細胞,病原體,3．第三道防線,1組成免疫器官和免疫細胞。免疫器官包括_______、________和________等；免疫細胞，如___________。2抗體病原體侵入人體后，刺激__________產(chǎn)生的一種抵抗該_______的____________。3抗原引起人體產(chǎn)生_______的物質(zhì)如病原體等異物。4功能產(chǎn)生_______，清除_______，使_________失去致病性。5原理特定的抗體能與特定的______結(jié)合，促進吞噬細胞的_________，從而清除_______，或使病原體失去致病性。,胸腺,淋巴結(jié),脾臟,淋巴細胞,淋巴細胞,病原體,特殊蛋白質(zhì),抗體,抗體,抗原,病原體,抗原,吞噬作用,抗原,知識點二免疫的類型4．非特異性免疫在人類進化過程中逐漸建立起來的__________功能，其特點是人________，不針對某一種特定的病原體，而是對_______病原體都有防御作用。包括第____道防線和第____道防線。5．特異性免疫人體在__________逐漸建立起來的___________功能，其特點是出生以后才產(chǎn)生，只針對某一特定的病原體或異物起作用，指第____道防線。,天然防御,生來就有,多種,一,二,出生以后,后天防御,三,1．在防御病原體時，保衛(wèi)人體的第一道防線是A．免疫器官B．免疫細胞C．體液中的殺菌物質(zhì)和吞噬細胞D．皮膚和黏膜2．體液中的吞噬細胞屬于A．保衛(wèi)人體的第一道防線B．保衛(wèi)人體的第二道防線C．保衛(wèi)人體的第三道防線D．保衛(wèi)人體的第四道防線,D,B,3．唾液中的溶菌酶具有殺菌作用，與此免疫屬于同種類型的是A．接種麻疹疫苗預防麻疹B．皮膚黏膜的某些附屬物阻擋和清除異物C．某些人吃魚、蝦后引起過敏D．器官移植引起的免疫排斥反應4．呼吸道黏膜上纖毛的作用是A．殺菌作用B．清掃異物C．吞噬病菌D．粘住病菌,B,B,5．皮膚角質(zhì)層的細胞排列緊密，細菌不易侵入，這屬于A．特異性免疫B．人體的第二道防線C．人體的第一道防線D．人體的第三道防線6．2015廣東人體的某種免疫過程如圖，下列相關(guān)敘述正確的是A．該過程屬于特異性免疫B．該過程能抵御多種病原體C．圖中細胞①表示淋巴細胞D．該過程不是人體先天就有的,C,B,7．關(guān)于人體第三道防線的說法中，錯誤的是A．它是人體在出生之后逐漸形成的B．免疫器官有扁桃體、胸腺和脾臟等C．一種抗體能針對所有病原體等異物D．抗原被清除后，機體還將保持產(chǎn)生相應抗體的能力8．下列人體的免疫作用中，屬于特異性免疫的是A．皮膚的保護作用B．接種天花疫苗C．溶菌酶的作用D．吞噬細胞的作用,C,B,9．如圖是人體免疫的三道防線，請分析圖片回答下列問題。,1圖中屬于第一道防線的是____；圖中屬于第二道防線的是____；圖中屬于第三道防線的是____。2圖中屬于非特異性免疫的有________________；圖中屬于特異性免疫的有____。,D,AB,C,A，B，D,C,10．2015宜賓根據(jù)世界衛(wèi)生組織公布的數(shù)據(jù)，截止2014年10月18日，全球因埃博拉病毒死亡人數(shù)已超過4500人，累計確診、疑似和可能感染病例可能超過9000例，更加令人不安的是，埃博拉病毒已經(jīng)越過大洋，從非洲擴散至歐洲和美國，下列敘述中不正確的是A．引起傳染病的病原體只有細菌和病毒B．病人在傳染病流行的三個環(huán)節(jié)中屬于傳染源C．健康人加強鍛煉，是預防傳染病的措施之一D．病人痊愈后對該病毒有免疫力屬于特異性免疫11．2015永州造血干細胞移植可以幫助白血病患者重建血組織和受到摧毀的免疫系統(tǒng)，從免疫的角度分析，移植的物質(zhì)和所屬免疫類型分別是A．抗體，特異性免疫B．抗原，特異性免疫C．抗體，非特異性免疫D．抗原，非特異性免疫,A,B,12．2015淄博5月份，某市出現(xiàn)首例輸入性中東呼吸綜合征確診病例，中東呼吸綜合征是一種新型冠狀病毒引起的呼吸道傳染病，下列相關(guān)敘述錯誤的是A．該病毒由蛋白質(zhì)和內(nèi)部的遺傳物質(zhì)組成B．該病毒只能寄生在活細胞里C．從免疫學角度來說，該病毒屬于抗體D．對該病人采取隔離措施屬于控制傳染源,C,13．“阿嚏”人打噴嚏時，人們深吸一口氣后，肺里的氣體被急速有力地從氣管噴射出來。流感病人鼻腔里有大量病毒和細菌，鼻腔黏膜受到它們的刺激，機體就會接二連三地打噴嚏。一個噴嚏最遠可噴至4米開外，飛沫中攜帶著病原體。有些對花粉過敏的人在賞花時也會連續(xù)不斷地打噴嚏。1打噴嚏時，肺里的氣體噴射出來依次經(jīng)過了肺→支氣管→____→喉→咽→鼻。2打噴嚏是鼻黏膜受刺激后人體的反應，這屬于__________________免疫。3作為外來物質(zhì)的花粉可誘發(fā)噴嚏，它屬于_______填“抗原”或“抗體”。4關(guān)于流感，資料中提到的傳染源是______________。5從預防傳染病的角度考慮，當你想打噴嚏時，應該____________。,氣管,非特異性先天性,抗原,流感病人,捂住口鼻等,14．近年來，越來越多的家庭喜歡養(yǎng)犬，這為狂犬病傳播帶來隱患，全國狂犬病發(fā)病率有上升趨勢?？袢“l(fā)病后的死亡率極高，如果被狗咬后，要在24小時內(nèi)注射狂犬疫苗。1狂犬病是由狂犬病病毒引起的傳染性疾病，從傳染病的角度來看，狂犬病病毒屬于________；從傳染病流行的三個基本環(huán)節(jié)看，攜帶狂犬病病毒的狗屬于___________。2狂犬病病毒結(jié)構(gòu)簡單，它沒有_______結(jié)構(gòu)。3從免疫的角度看，注射到人體內(nèi)的狂犬疫苗屬于_______，通過注射狂犬疫苗獲得的免疫屬于___________免疫。,病原體,傳染源,細胞,抗原,特異性,
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簡介：第三章介紹生物轉(zhuǎn)化的常見反應類型,以甾體化合物的生物轉(zhuǎn)化為例進行闡述甾體化合物和甾體藥物簡介甾體化合物結(jié)構(gòu)甾類化合物常見種類,甾體化合物和甾體藥物簡介,1952年，美國普強藥廠的MORRAY和PEREROON首次利用黑根霉將黃體同轉(zhuǎn)化為11?黃體酮，人們開始認識到甾體微生物轉(zhuǎn)化在甾體藥物生產(chǎn)中的重要性。微生物幾乎對甾體的每個位置都能進行轉(zhuǎn)化。幾種重要的甾體微生物轉(zhuǎn)化發(fā)應如羥化，脫氫成為工業(yè)上生產(chǎn)甾體激素及其類似物的重要手段,甾體化合物,一類含有環(huán)戊烷多菲核的化合物在甾核的第10，13位常常含有角甲基；在3，11,17位，可能有羥基、酮基；A，B環(huán)有部分雙鍵；17位有不同的測鏈。,目前甾體微生物轉(zhuǎn)化中受到人們廣泛關(guān)注的領(lǐng)域,將微生物基因工程的新技術(shù)應用于甾體微生物轉(zhuǎn)化提高水不容性底物的溶解度細胞和酶的固定化以利于酶的重復經(jīng)濟利用發(fā)展經(jīng)濟有效的產(chǎn)物連續(xù)回收方式將環(huán)糊精等應用于培養(yǎng)基以提高產(chǎn)量,甾體化合物結(jié)構(gòu),甾體化合物編號,甾類化合物常見種類,動物組織中膽固醇、膽酸、皮脂素、皮脂醇（氫化可的松）、皮脂酮等睪酮、雄酮、孕酮、雌二醇等生殖腺激素。植物中薯芋皂豆甾醇酵母細胞麥角固醇,甾體化合物編號,甾類化合物常見種類,動物組織中膽固醇、膽酸、皮脂素、皮脂醇（氫化可的松）、皮脂酮等睪酮、雄酮、孕酮、雌二醇等生殖腺激素。植物中薯芋皂豆甾醇酵母細胞麥角固醇,甾體類激素藥,腎上腺皮脂激素類可的松、強的松、氫化可的松功能抗炎、抗毒、抗過敏對風濕、類風濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡等有治療作用。生殖腺激素孕酮、雌酮功能調(diào)節(jié)內(nèi)分泌人工合成避孕藥長效孕酮等,微生物在甾體藥物生產(chǎn)中的應用,主要分為兩大類將天然原料轉(zhuǎn)化為生產(chǎn)甾體化合物的普通中間體。如植物皂角苷羥化生成皂角苷配基降解甾醇邊鏈生成有用的甾體化合物中間體，雄甾－4－烯－3，17－二酮；雄甾－1，4－二烯－3，17－二酮。轉(zhuǎn)化成特殊的甾體化合物的中間體，以生產(chǎn)我們所需要的產(chǎn)物。如甾體11?，11?及16?羥化，?1脫氫甾體邊鏈降解,微生物對甾體化合物的轉(zhuǎn)化,微生物對甾體化合物的轉(zhuǎn)化多種多樣它們對甾體的每一位置上的原子或基團都有可能進行生物轉(zhuǎn)化。其反應類型主要有氧化、還原、水解、酯化等等。包括甾體母核上和測鏈上的某個位置的羥基化、酮基化、環(huán)氧化、脫氫形成雙鏈、芳香化、開環(huán)、形成內(nèi)酯、側(cè)鏈斷裂、降解。,羥基化反應,是甾體微生物轉(zhuǎn)化中最重要的反應?；瘜W法除了較容易在C17引入羥基外，在其他位置都很難引入羥基。,微生物對甾體的羥基化作用,微生物能在甾體的任何位置進行羥基化發(fā)應，也可在非甾類有機分子上羥基化。簡單的羥基化作用是在甾體的某個位置上引入O原子。在甾核上至少有21個位置可以發(fā)生。11位羥基化作用最重要，11位C的氧化對可的松藥物療效是不可缺少的，11?，11?。除11位C進行羥基化反應外，9?，14?，16?的羥基化，在制備甾體藥物時，生產(chǎn)皮質(zhì)甾類化合物及其類似物。,進行甾體羥基化作用的微生物,羥基化反應機理,羥基化反應,由于這些酶能將一摩爾分子氧引入底物，因此被定義位單氧化酶。這種細胞色素P450依賴的單氧化酶存在于幾乎所有形式的生命體中，以游離或膜結(jié)合的形式存在。,同位素實驗證明,甾體羥基化中存在的問題,環(huán)糊精的生理作用,HESSELINK等研究應用環(huán)糊于分枝桿菌甾體邊鏈的降解。環(huán)糊精是一種環(huán)狀寡聚糖，一般由6－8個葡萄糖分子通過?－1，4糖苷鍵連接而成。易溶于水。含有疏水性空腔，可與疏水性分子結(jié)合?？勺鳛閹追N甾體類藥物的穩(wěn)定劑和增溶劑。,環(huán)糊精的應用實例1,CHINCHOLKAR等研究了在?環(huán)糊精存在時，CURRULARIAVKMF644對11－脫氫皮甾醇（REICHSTEINS化合物，簡稱化合物S）的11?羥基化。在底物濃度為4G/L時化合物S?－CD＝1006氫化可的松的產(chǎn)率為70％－75％無?－CD氫化可的松的產(chǎn)率為40％－50％,環(huán)糊精的應用實例2,GD19－去甲基－13－乙基雄甾－4－烯－3，17－雙酮經(jīng)PENICILLIUMRAISTRICKII進行15?羥基化口服避孕藥?5－D－十八甲基炔諾酮（GESTODENE）的重要中間體。SCHLOSSER等研究表明在?－環(huán)糊精存在時，菌株或其固定化細胞對CD的15?羥基化作用，與以甲醇做溶劑比較，其轉(zhuǎn)化率都能明顯提高。,?環(huán)糊精作用,?環(huán)糊精有利于提高甾體底物溶解度真菌能以?環(huán)糊精作為C源,其他重要的羥基化反應,地索高諾酮（DESTOGESTREL）新型避孕藥（荷蘭ORGANON公司推出）作用月經(jīng)周期控制好，副作用少，避孕可靠我國研究上海醫(yī)科大學史紀平19－去甲基－13－乙基雄甾－4－烯－3，17－雙酮11?羥基化（金龜子綠僵菌）形成關(guān)鍵中間體簡化合成路線，降低副反應。底物02轉(zhuǎn)化率36％,甾體的邊鏈降解,側(cè)鏈降解,微生物對甾體側(cè)鏈的降解，解決了天然甾體化合物作原料合成甾體激素的問題，為利用原價的原料開辟了新的途徑。常見微生物有簡單節(jié)桿菌球形芽孢桿菌玫瑰芽孢桿菌淡紫青霉藤黃諾卡氏菌,甾體邊鏈降解甾體母核降解,3?－羥基－?5甾醇,9?羥基化，?1，2脫氫,甾體邊鏈降解,采用類似脂肪酸?氧化的氧化過程，最后形成C17酮甾體。,選擇性邊鏈降解問題,選擇性邊鏈降解策略（3）輔助基因工程提高邊鏈降解的產(chǎn)率策略,選擇性甾體邊鏈降解措施1,對甾醇進行結(jié)構(gòu)改造，從而阻止酶對母核的降解例如1965SIH等將膽固醇先行改造為19羥基衍生物再經(jīng)一步微生物轉(zhuǎn)化為A環(huán)芳香化的雌酚酮。,選擇性甾體邊鏈降解措施2,加入酶抑制劑，抑制母核降解關(guān)鍵酶如C1，2脫氫酶和9?羥化酶。如NICOPBSE8－羥基喹啉應用于多種分枝桿菌對膽固醇的選性邊鏈降解金屬鰲合劑2，2－雙聯(lián)吡啶抑制母核降解,選擇性甾體邊鏈降解措施3,對菌株進行誘變，產(chǎn)生僅降解甾醇側(cè)鏈的突變株例如原始菌株經(jīng)誘變?yōu)檎T變菌株MYCOBACTERIUMSP，NRRLB3683不加抑制劑，便產(chǎn)生雄甾－1，4－二烯－3，17－二酮（ADD）再誘變得MYCOBACTERIUMSP，NRRLB3805，無C1，2脫氫酶能產(chǎn)生雄甾－4－烯－3，17－二酮（AD）,基因工程新技術(shù)的應用,專利PSEUDOMONAS菌株無降解甾體的能力將MYCOBACTERIUMSPNRRL3683的DNA導入PSEUDOMONAS菌株中獲得重組菌。重組菌可在水相，一種或幾種有機相中進行轉(zhuǎn)化反應。PSEUDOMONAS菌株比MYCOBACTERIUMSPNRRL3683的生長輸率快結(jié)果加快轉(zhuǎn)化進程，降低成本。,方法,分離純化MYCOBACTERIUMSPNRRL3683的DNA整合到特定質(zhì)粒載體中導入?噬菌體中用入?噬菌體感染ECOLIHB101，得ECOLI重組子三親雜交實現(xiàn)MYCOBACTERIUMSPNRRL3683的DNA到PSEUDOMONAS菌株得轉(zhuǎn)移。,如何提高甾體邊鏈降解的產(chǎn)率,接觸,提高甾體邊鏈降解速率,HESSELINK等研究表明環(huán)糊精能明顯增強MYCOBACTERIUMSPNRRL3683降解膽固醇、谷甾醇等邊鏈生成AD的產(chǎn)率，不影響細胞生長速度和細胞密度。當環(huán)糊精底物濃度21時，微生物降解邊鏈的活性可增加1730倍。環(huán)糊精能阻止母核的降解及產(chǎn)物的反饋抑制。,環(huán)糊精在甾體邊鏈降解中的作用總結(jié),在甾體邊鏈降解過程中，環(huán)糊精充當惰性甾體增溶劑反應載體保護劑,甾體邊鏈降的成功應用,ARHNA和SIH等研究報道以膽甾醇和?－谷甾醇為原料微生物轉(zhuǎn)化法合成甾體藥物中間體的方法。采用酶抑制劑生化阻斷變株改變細胞膜通透性等生物技術(shù)改造甾醇的結(jié)構(gòu)，從而選擇性控制甾醇的邊鏈降解成功合成中間體雄甾－4－烯－3，17－二酮（4－AD）雄甾－1，4－二烯－3，17－二酮（ADD）9?羥基－4－AD目的工業(yè)生產(chǎn)性激素，利尿劑等甾體藥物,其他的甾體生物轉(zhuǎn)化反應類型,脫氫作用A環(huán)芳香,脫氫作用－使甾體核形成雙鍵,強的松（去氫可的松）是可的松經(jīng)脫氫而形成的。其抗炎功效比可的松高幾倍。一般制備該種藥物時，常常是將可的松或氫化可的松脫氫變?yōu)槿淇傻乃苫蛉錃浠傻乃伞?脫氫反應的常見微生物為,簡單節(jié)桿菌各種芽孢桿菌（蠟狀芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌）鐮刀霉長蠕孢菌屬。,A環(huán)芳香化,所謂A環(huán)芳香化是指甾體A環(huán)核上的每個C原子都脫氫形成雙鍵，而變?yōu)榉枷慊Y(jié)構(gòu)。雌性激素的生產(chǎn)（雌二醇），可通過此方法獲得,研究生物轉(zhuǎn)化的幾種常用方法,第四章研究生物轉(zhuǎn)化的幾種常用方法,間歇培養(yǎng)法整體細胞轉(zhuǎn)化法洗滌均絲懸浮法（靜息細胞法）孢子轉(zhuǎn)化法原生質(zhì)體實驗法遺傳特性誘變法同位素示蹤法,間歇培養(yǎng)法（BATCHCULTURE,這種方法能夠比較直接而簡單地篩選能否具有轉(zhuǎn)化某種化合物的活性菌株。,游離的整體細胞,游離的整體細胞直接作為催化劑來制造產(chǎn)品的報道已經(jīng)不少在某種程度優(yōu)于固定化細胞在生物轉(zhuǎn)化酶工程中越來越受到重視游離整體細胞的基礎(chǔ)研究更為重要,游離整體細胞的基礎(chǔ)研究內(nèi)容,細胞的滲透化酶的胞內(nèi)固定化酶細胞在反應前后的形態(tài)變化和結(jié)構(gòu)變化,整體細胞轉(zhuǎn)化應用舉例,底物富馬酸產(chǎn)物L－天冬氨酸生物轉(zhuǎn)化酶天冬氨酸酶（EC4311）轉(zhuǎn)化菌株ECOLI,整體細胞轉(zhuǎn)化研究,培養(yǎng)基,培養(yǎng)方法,不同底物濃度的反應速率,底物質(zhì)量濃度較高時，在某一時間（8H）前，轉(zhuǎn)化速率較低，而后，反應速度加快。對底物富馬酸鹽的轉(zhuǎn)化徹底。（992％）底物濃度較低時，反應速度始終較慢對底物富馬酸鹽的轉(zhuǎn)化不徹底。（63％）特點高質(zhì)量底物濃度有較高的反應速率高質(zhì)量濃度底物有較高的轉(zhuǎn)化率催化反應一般有個遲滯期,酶細胞在生物轉(zhuǎn)化中的形態(tài)變化低底物濃度掃描觀察,,酶細胞在生物轉(zhuǎn)化中的形態(tài)變化高底物濃度掃描觀察,形態(tài)學變化,高質(zhì)量底物濃度下細胞發(fā)生明顯的形態(tài)學變化細胞表面發(fā)上皺褶，有明顯的凹陷細胞膜變薄，松弛、不明顯，內(nèi)部結(jié)構(gòu)變松，不致密。,高質(zhì)量濃度底物對含酶細胞的滲透化作用,靜息細胞法,為了排除原培養(yǎng)基中自身的代謝產(chǎn)物對不同生長階段轉(zhuǎn)化的影響，常常用洗滌的靜息細胞來代替發(fā)酵液中的生長的細胞，即將不同生長階段的細胞取出，洗去沾染的原培養(yǎng)液及其代謝產(chǎn)物，然后把細胞懸浮在人工轉(zhuǎn)化系統(tǒng)內(nèi)，在一定條件下進行生物轉(zhuǎn)化。,孢子轉(zhuǎn)化法,真菌的分生孢子和子囊孢子，往往含有的酶活力高，且常常用于生物轉(zhuǎn)化。細菌的內(nèi)生孢子（芽孢），一般無轉(zhuǎn)化活性。,轉(zhuǎn)化方法,相似于靜息細胞法。不采用完全培養(yǎng)基，只選用緩沖液或含有葡萄糖一類能源的物質(zhì)即可。通常轉(zhuǎn)化時使用的孢子濃度為108－109個/ML轉(zhuǎn)化PH一般為56,原生質(zhì)體試驗法,方法通過溶菌酶、纖維素酶、蝸牛酶等脫去細胞壁，獲得原生質(zhì)體。將原生質(zhì)體懸浮于高滲穩(wěn)定液中，添加前體物質(zhì)，進行喂養(yǎng)試驗，觀察結(jié)果。,原生質(zhì)體試驗法特點,排除了細胞壁通透性障礙。保全了整體細胞的內(nèi)酶系統(tǒng)。避免了無細胞抽提法中，用破碎細胞而損壞了酶體系，從而使某些需要偶聯(lián)的酶反應（氧化還原反應）不能進行的缺點。,遺傳特性誘變法,菌種誘變不僅是提高產(chǎn)量的重要手段，而且也是研究生物轉(zhuǎn)化過程中，產(chǎn)物形成的遺傳機制的一種有效方法。將轉(zhuǎn)化菌進行誘變，使其失去轉(zhuǎn)化底物或形成某個中間體的能力，從而就可分離到生物轉(zhuǎn)化中的各種不同的障礙突變株，即負突變株。這種負突變株能夠積累某種代謝產(chǎn)物或支路代謝產(chǎn)物。從分析轉(zhuǎn)化菌和突變株的代謝產(chǎn)物化學結(jié)構(gòu)上的差異，找出這些代謝產(chǎn)物在合成中的相互關(guān)系，從而可推斷生物轉(zhuǎn)化的反應步驟。,同位素示蹤法,同位素示蹤法是研究生物轉(zhuǎn)化的好方法。即應用同位素轉(zhuǎn)化的起始物和中間體進行喂養(yǎng)試驗，由于試驗菌沒有區(qū)別標記化合物及非標記化合物的能力，因此標記化合物和非標記化合物一樣，都能參與菌體的代謝變化，然后通過測定產(chǎn)物或中間體的同位素含量及分布情況，從而判斷試驗化合物是否參與生物轉(zhuǎn)化。缺點為了確定同位素的結(jié)合位置，必須將產(chǎn)物進行一系列的化學降解、分離和測定等大量工作。,近年研究概況,近年來，利用沒有放射性的穩(wěn)定同位素13C、2H、15N、18O等來作示蹤研究，特別是13C，可應用碳核磁共振儀來直接測定該生物轉(zhuǎn)化產(chǎn)物中間體的碳核磁共振譜，從核磁共振譜的解析中，便可知道該示蹤原子被結(jié)合到產(chǎn)物或中間體的分子結(jié)構(gòu)中的位置和分布情況。由于這項工作可在實驗室完成，不僅簡化了大量的化學降解和分析測定步驟，而且保證工作人員的健康和推進研究工作的進展。,
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